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AMPPD发光显色试剂盒 NobleRyder P9871

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  • NobleRyder
  • P9871
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  • 2025年12月07日
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       12个月

    • 供应商

      北京诺博莱德科技有限公司

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      已收到实际货物为准

    AMPPD发光显色试剂盒
    产品简介:
    AMPPD是碱性磷酸酶的化学发光底物,在适宜的缓冲液中,随着酶的催化水解作用,AMPPD分解成AMP-D,后者发出强度很高的光信号,其发光的速度取决于碱磷酶的浓度。当碱磷酶偶合到杂交的探针时,便可以通过此系统检测到杂交分子的存在量。乙醇胺可使光信号输出更理想。AMPPD为1,2-二氧环已烷衍生物,它是一种生物化学领域中最新的超灵敏的碱性磷酸酶底物,其特点:反应速度快,在很短时间内提供正确可靠的结果。在它的分子结构中有两个重要部分,一个是联接苯环和金刚烷的二氧四节环,它可以断裂并发射光子;另一个是磷酸根基团,它维持着整个分子结构的稳定。在通常情况下,这种化合物很稳定。但是,结果有碱性磷酸酶存在,Dioxetane Phosphate作为酶的底物会在酶的催化一脱去磷酸根基团,形成一个不稳定的中间体。这个中间体随即自行分解(二氧四节环断裂),同时发射光子。Leagene AMPPD发光显色试剂盒适用于PVDF膜,不推荐用于硝酸纤维素膜。

    产品组成: 
                                编号
    名称
    P9871
    25T
    P9871
    50T
    Storage
    试剂(A):
    Dioxetane Buffer
    A1: Dioxetane A 50ml 100ml -20℃
    A2: Dioxetane B 50ml 100ml -20℃
    临用时,取A1、A2等量混合,即为Dioxetane Buffer,不可预先配制。
    试剂(B): AMPPD 2.5mg 5mg -20℃ 避光
     
    自备材料:
    1、转印了蛋白并已以抗体-酶复合物检测过的PVDF膜
    2、Tris盐缓冲液(TBS)
    3、透明的塑料保鲜膜
    4、蒸馏水
    AMPPD发光显色试剂盒 
    操作步骤(仅供参考)
    1.临用前,取适量的A1和A2,等量混合后获得Dioxetane Buffer。
    2.按2.5mgAMPPD溶于25ml Dioxetane Buffer, 配制0.1mg/ml AMPPD底物溶液即为AMPPD Dioxetane Buffer(发色发光显迹液),用于膜的染色。
    3.取适量Dioxetane Buffer洗膜两次,每次15min。
    4.对于PVDF膜进行的碱性磷酸酶反应, 膜置于新鲜配制的AMPPD Dioxetane Buffer 作用5min。
    5.将膜移入适量的AMPPD Dioxetane Buffer中,浸泡5min(AP反应)。
    6.取出PVDF膜,滴干水分,将膜正面朝下放在一张透明的塑料保鲜膜上,向后折叠将膜包裹起来,成为不漏水的封闭体。
    7.在暗房中,将膜正面朝下放在感光胶片上,曝光数秒至数小时。
    8.如需要,在室温下以适量的TBS洗膜15min。
    9.将膜放入AMPPD Dioxetane Buffer,条带应在10~30min内出现。
    10.用蒸馏水洗膜,终止反应。晾干后拍照留永久的记录。
     
    注意事项:
    1、 PVDF膜置于胶片上后,不要改变位置。
    2、 曝光时间应根据实验情况,自行摸索。
    3、 配制好的AMPPD Dioxetane Buffer,应避光低温保存。
    4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
     AMPPD发光显色试剂盒
    有效期: 12个月有效。
     

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