- ¥1000
- 联迈生物
- LM1030
- 美国/中国
- 2025年07月15日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
GS115
- 保质期：
有效期一年
- 供应商：
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件：
低温运输，-80℃保存
- 规格：
500ul甘油菌
| 菌株类型: | 毕赤酵母 |
|---|---|
| 培养基: | YPD培养基 |
| 生长条件: | 28-30 ℃, 有氧 |
| 基因型: | His4 |
| 表型: | Mut+ |
| 抗性: | 氨苄和卡那 |
| 质粒转化条件: | 电转 |
| 应用: | 蛋白表达 |
| 诱导方法: | 甲醇 |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| LM1030 | GS115 | 500ul甘油菌 |
¥1000.00 |
菌株特点
GS115是毕赤酵母菌株，属于真核细胞。一般的针对原核生物的抗生素例如卡那和氨苄对酵母是无效的，因此为了防止大肠杆菌等原核生物对酵母培养菌株污染，往往会在培养基中加入一些氨苄和卡那霉素的抗生素，来抑制细菌菌的污染和生长。
GS115毕赤酵母自身表型为Mut+，但是GS115转化株既能够产生出Mut+菌株，也能够产生出Muts菌株。目的蛋白在这两种转化株的表达水平可能是不同的，并且具有不可预测性，所以只有通过实验才能得到最好的酵母表达方案。
毕赤酵母适宜的生长温度是28至30度，温度超过32度对蛋白的表达是有害的，并可能导致细胞的死亡。
GS115毕赤酵母是是组氨酸缺陷型（His4基因型），如果表达载体上携带有组氨酸基因，可补偿宿主菌的组氨酸缺陷，因此可以在不含组氨酸的培养基上筛选转化子。这些受体菌自发突变为组氨酸野生型的概率一般低于10-8。
GS115毕赤酵母可以在YPD培养基中生长，或者在补充有组氨酸的minimal media中生长，但是无法在单独的minimal media培养基中生长。
GS115制作程序：
使用说明：
联迈生物的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证，如存在质量问题，请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后，请及时在固体平板上划线培养，挑取单菌落接种到液体培养基中，震荡培养后使用并保存甘油菌。如需获取其他详细信息请登录我司官网联系QQ客服查询。
GS115的培养方法：
菌种制作菌液的方法（以一瓶为例）1、取10公斤无菌水里面的2公斤烧开，然后加入1公斤的红糖，把红糖充分融化开，便于把红糖里面的有害菌消除。
2、把3公斤的红糖水和剩下的8公斤无菌水装到一个15公斤的容器里，混合均匀，等无菌水冷却到30-40度的时候加菌种1瓶。
3、把菌种和红糖水充分的搅拌均匀，口上盖一层塑料薄膜，要密封发酵，不能漏气。不要装的太满，要预留10-15%的缓冲空间，在发酵过程中会产生气体，装满容易涨破塑料容器。
4、发酵7-12天天左右，温度低要多发酵几天，打开瓶口，有气体产生。闻到酸香味夹杂酒糟味和红糖水的刺激性气味，到就证明发酵成功。（低于15度不能发酵；15-20度发酵20-15天；20-30度，发酵15-10天；30-40度发酵10-6天，发酵时间越长效果越好）；或者用PH试纸测试，PH值显示4-5之间即表明发酵成功。如果温度过低，强烈建议用取暖灯或者火炉等加热设备升温。
5、发酵成功后的菌液如果一次不能大量的使用完，就用小瓶子分装密封保存。使用一瓶打开一瓶。如果没有分装。
保存方法：1、菌液宜在常温下避光保存，底部稍有沉淀或浮有些微白沫均属正常，若气味不酸（PH应在4.5以下）或腐臭即已变质勿用。
2、每次用后盖紧瓶盖。保管得好，一年后无异味仍可使用，只是活性有所降低，需适当加大用量。
注意事项：1、制作菌液最好用深井水，若用自来水应放置24小时后用，水只需烧开1/5能够融化开红糖即可。
2、菌液不要与杀菌剂等药物同时混用，要用此类药物，相隔一天以上时间。
3、红糖用热水溶化后，水温降到30-40度，才能投入农盛乐菌种。过高或者过低均影响发酵效果。
4、制作菌液的过程中，不要频繁打开盖子，以免进入杂菌，影响发酵效果。
5、如若遇到特殊问题，请拨打销售电话详询，不要擅做主张，以免对你造成损失。
GS115注意事项：
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。
2、使用甘油菌时可不完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可，也可完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，菌株的活力会逐渐下降。
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文献和实验【原创/分享】GS115毕赤酵母表达外源蛋白较详细步骤！！！（从验证到阳性克隆的筛选）
小弟把最近一个多月来所做的工作，做了个总结，供大家一起分享，希望版主能加分，现在我还是0分，很多帖子不能阅览，希望版主加分，今后我实验有了新的进展，我会把总结发上来，和大家一起分享。我做的是GS115表达VEGF，目前已经做到阳性克隆的筛选这一步。待以后再次做了总结，再与大家分享。希望大家支持，绝对原创！！！ 一.实验材料 1．菌珠 E.coli DH5α GS115酵母菌 2．质粒 PIC9K/VEGF165重组质粒 3．试剂 NB酵母氮源 G418 gl2、Not1
实验步骤 1. Mut 胞内或分泌表达：为检测表达条件是否有效，可培养GS115β-gal (Mut )(胞内表达-半乳糖苷酶)。亲代载体转化GS115 或KM71 作为胞内表达背景对照。 1) 挑取单克隆，接种至25mlMGY，BMG或BMGY中，(250ml摇瓶)，28-30度，250-300rpm摇至OD600=2-6(对数生长，大约16-18小时)。 2) 室温1500-3000g离心
我先说我有的质粒和菌株：PPIC9K，PPIC9，PPICZahphaA，B，C 以及一个改造的PPIC9K载体，EcoRI和BamHI双酶切，C末端引入了一个6histag 菌株：GS115，KM71，X33，以及十几个空载体对照菌株 我的酵母表达Protocol： >10ug质粒用Sal线性化，加1/10体积的3M NaAC PH5.2和3倍体积的乙醇沉淀 70％乙醇洗一遍，20ul ddH2O重溶 按照公司手册做电转化感受态，一般OD
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