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6个月
- 英文名:
GS115 Strain
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20
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
株
GS115毕赤酵母菌
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文献和实验【原创/分享】GS115毕赤酵母表达外源蛋白较详细步骤!!!(从验证到阳性克隆的筛选)
小弟把最近一个多月来所做的工作,做了个总结,供大家一起分享,希望版主能加分,现在我还是0分,很多帖子不能阅览,希望版主加分,今后我实验有了新的进展,我会把总结发上来,和大家一起分享。我做的是GS115表达VEGF,目前已经做到阳性克隆的筛选这一步。待以后再次做了总结,再与大家分享。希望大家支持,绝对原创!!! 一.实验材料 1.菌珠 E.coli DH5α GS115酵母菌 2.质粒 PIC9K/VEGF165重组质粒 3.试剂 NB酵母氮源 G418 gl2、Not1
一,酵母表达系统 毕赤酵母表达系统(invitrogen公司):分泌型质粒pPIC9K, 宿主菌毕赤酵母GS115 分泌型质粒pPICZalpha (甲醇诱导)宿主菌毕赤酵母x33 分泌型质粒pHIL-S1 二,原核表达质粒 表达宿主菌为BL21(DE3)系列 带His标签(N端):PET5-(a)氨苄抗性 带His标签(N端):PET28-(a)卡那抗性 带His标签(C端):PET24-(b)卡那抗性 带His标签(C端):PET21
一,酵母表达系统毕赤酵母表达系统(invitrogen公司):分泌型质粒pPIC9K,宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha (甲醇诱导)宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二,原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签(N端):PET5-(a)氨苄抗性带His标签(N端):PET28-(a)卡那抗性带His标签(C端):PET24-(b)卡那抗性带His标签(C端):PET21-(a)氨苄抗性带His标签(N端)+TrxA(硫氧还蛋白):PET-32
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