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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
EHA105
- 保质期:
有效期一年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
低温运输,-80℃保存
- 规格:
500ul甘油菌
| 菌株类型: | 农杆菌 |
|---|---|
| 培养基: | LB培养基 |
| 生长条件: | 37 ℃, 有氧 |
| 基因型: | C58 (rif R) Ti pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) (strepR) Succinamopine |
| 质粒转化条件: | 42 ℃热激 |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| LM1140 | EHA105 | 500ul甘油菌 |
¥1000.00 |
菌株特点
EHA105菌株由EHA105菌株改造而来,为C58型背景,核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) ,此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)型Ti质粒含有筛选标签:strep,赋予EHA105菌株链霉素抗性,适用于水稻、烟草等植物的转基因操作,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率可达104cfu/μg。
EHA105制作程序:

使用说明:
联迈生物的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后,请及时在固体平板上划线培养,挑取单菌落接种到液体培养基中,震荡培养后使用并保存甘油菌。如需获取其他详细信息请登录我司官网联系QQ客服查询。
EHA105的培养方法:
菌种制作菌液的方法(以一瓶为例)1、取10公斤无菌水里面的2公斤烧开,然后加入1公斤的红糖,把红糖充分融化开,便于把红糖里面的有害菌消除。
2、把3公斤的红糖水和剩下的8公斤无菌水装到一个15公斤的容器里,混合均匀,等无菌水冷却到30-40度的时候加菌种1瓶。
3、把菌种和红糖水充分的搅拌均匀,口上盖一层塑料薄膜,要密封发酵,不能漏气。不要装的太满,要预留10-15%的缓冲空间,在发酵过程中会产生气体,装满容易涨破塑料容器。
4、发酵7-12天天左右,温度低要多发酵几天,打开瓶口,有气体产生。闻到酸香味夹杂酒糟味和红糖水的刺激性气味,到就证明发酵成功。(低于15度不能发酵;15-20度发酵20-15天;20-30度,发酵15-10天;30-40度发酵10-6天,发酵时间越长效果越好);或者用PH试纸测试,PH值显示4-5之间即表明发酵成功。如果温度过低,强烈建议用取暖灯或者火炉等加热设备升温。
5、发酵成功后的菌液如果一次不能大量的使用完,就用小瓶子分装密封保存。使用一瓶打开一瓶。如果没有分装。
保存方法:1、菌液宜在常温下避光保存,底部稍有沉淀或浮有些微白沫均属正常,若气味不酸(PH应在4.5以下)或腐臭即已变质勿用。
2、每次用后盖紧瓶盖。保管得好,一年后无异味仍可使用,只是活性有所降低,需适当加大用量。
注意事项:1、制作菌液最好用深井水,若用自来水应放置24小时后用,水只需烧开1/5能够融化开红糖即可。
2、菌液不要与杀菌剂等药物同时混用,要用此类药物,相隔一天以上时间。
3、红糖用热水溶化后,水温降到30-40度,才能投入农盛乐菌种。过高或者过低均影响发酵效果。
4、制作菌液的过程中,不要频繁打开盖子,以免进入杂菌,影响发酵效果。
5、如若遇到特殊问题,请拨打销售电话详询,不要擅做主张,以免对你造成损失。
EHA105注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。
2、使用甘油菌时可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可,也可完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。
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文献和实验: 4 株细菌的序列均为 1009bp ,与广谱酶 TEM-1 相比较,其序列有 6 个位点的改变,即第 124 位、第 8 位、第 48 位、第 134 位、第 160 位和第 242 位( gga → ggg ),相应的氨基酸只有第 124 位的丝氨酸变为天冬酰胺。我们首次登录 GenBank ,并被命名为 TEM-105 。 3. TEM-105 的特性研究:用 ESBLs 浓度梯度法进行鉴定,标准产 TEM-26 菌株的原核表达菌为阳性,而 4 株临床菌株的 TEM 型
ELISA-Based Quantification of p105 (c-erbB-2, HER2/neu) in Serum of Ovarian Carcinoma
The most important prognostic parameters for gynecologic malignancies are tumor stage, residual tumor after surgical treatment, histological subtype, and degree of malignancy (1-2). However, these factors present an incomplete picture
双元载体的农杆菌转化1.1农杆菌感受态细胞的制备1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线,28℃培养。1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中,220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中,28℃220rpm振荡培养至OD600=0.5。1.1.4. 转入无菌离心管,5000rpm离心5min,去上清液。1.1.5. 加入10ml预冷的0.1M的CaCl2溶液,轻轻悬浮细胞,冰上放置
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