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- 上海
- 2026年04月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
代轩生物
- 服务名称：
Realtime PCR检测技术服务
- 规格：
批
实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。荧光定量PCR的荧光检出方法包括SYBR green（荧光染料掺入法） 和Taqman probe （探针法）两种方法。
一、实验步骤
1.样品RNA的提取（组织样品，细胞样品…等）
2.RNA质量检测
3.将样品RNA逆转录为cDNA
4.引物设计、合成、验证，反应体系和反应条件优化
5.上机检测：包括扩增曲线、溶解曲线
6.数据整理、表达量计算、作图
7.提供实验报告（实验数据及结果分析图表）
二、客户提供
1.组织或细胞等
2.已知的基因全长序列
3.相关的文献报告，或具有指导性的实验内容等。
三、送样要求
细胞（≥106）、组织（≥100mg）、血液（≥1ml）、叶片（≥100mg）等样品材料，基因组DNA或总RNA（体积≥20μl，浓度≥50 ng/μl）。外地客户可以干冰邮寄，上海客户可上门取样
四、结果 提供
实验所用所有仪器试剂及耗材、引物序列；详细的实验过程；原始数据（包括扩增曲线和熔解曲线）及数据分析结果。
| 技术服务 | 集体内容及说明 | 周期 | 价格 |
| Real time PCR | 逆转录成cDNA、引物设计合成 | 7工作日 | 100元/样本/基因 |
| MicroRNA荧光定量PCR | 逆转录成cDNA、引物设计合成 | 7工作日 | 150元/样本/基因 |
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文献和实验相关专题 Hello, I"m doing RT PCR , and i"m stuck. here"s the thing... i"ve got two pairs of primers, one pair for my gene and one pair for my control (cyclophylin). I took 1ug of RNA, made cDNA, and ran a normal PCR
那是一个不平凡的年代—— 2009 年，那年的下半年我一直在跟 RNA 提取、逆转录和 SYBR GREEN realtime-PCR 反应做斗争。 当我艰难摸索的时候，我就想：等我都学会了，我一定要写篇文章，把一个初学者最初的想法和觉得矛盾、困难、不知如何入手的方法、难点和最后解决的办法写出来。既可以帮助像我一样的人，又可以让自己有点小小的成就感。好了，现在开始吧。 仪器 ABI7000 是如何做溶解曲线的？ 我们单位刚开始的时候只有一台仪器 ABI
【求助】miRNA mimic qRT-PCR检测可以提高多少倍？
nvonne 我购买的miRNA mimic 带FAM标记，本打算用流式检测转染效率，但发现荧光信号很弱，转染后采用定量PCR检测miRNA的表达变化，相对定量分析，发现mimic组比NC阴性对照组的miRNA表达量提高了100多倍，这虽然表明转染mimic成功，但总感觉这么高的变化有点太离谱了是不是？也没查到相关文献，谁能给我一些参考？非常感谢 zhujoker 顺转就是这么高，我的也是这样，有的能够上调1000倍
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