肠出血性大肠杆菌致贺毒素1荧光PCR检测试剂盒(Stx1)优

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名称：肠出血性大肠杆菌致贺毒素1荧光PCR检测试剂盒(Stx1)优惠价
规格：48次/盒
品牌：百奥莱博
等级：科研试剂
产地：国产|进口

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PY01-040  烟酸  25克  
尿苷二磷酸酶 Tween 65
(L)-2-哌*(代"啶")甲*(代"酸") DL-Cysteine HC1 3105-95-1
ARB12138 大鼠生长抑素(SS)含量测试 Rat somatostatin,ss ELISA KIT
BL0931 RBITC标记兔抗猴IgG抗体
细菌裂解液(免超声)   50ml|100ml
丁二酸 4′-Hydroxypropiophenone 110-15-6
ARB10149 人Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock-2)elisa检测 Human rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2,rock-2 ELISA KIT
Tris缓冲盐溶液(20×TBS,pH7.5)   500ml
ARB14067 ALV J-Ab elisa检测操作说明书 
十二烷基二甲基乙基*化铵 N-Benzylglycine ethyl ester 68207-00-1
PY02-196  碱性琼脂  250克  
ARB13106 小鼠骨*素/骨谷*酸蛋白(OT/BGP)免费代测 Mouse osteocalcin/bone gla protein,ot/bgp ELISA KIT
ARB12307 大鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)含量检测 Rat prolifeRating cell nuclear antigen antibody,pcna ELISA KIT
BL0290 Medium 199
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593-84-0 Guanidine 　异硫*酸胍
ARB10412 人可溶性腺苷酸环化酶(sAC)ELISA代测服务 Human soluble adenylate cyclase,sac ELISA KIT
ARB14164 小鼠流行性出血热(EHF)elisa检测操作说明书 
ARB14023 植物生长素(AuxIn)酶联免疫定量检测 
ARB11481 人胰高血糖素样肽1(GLP-1)代做ELISA实验 Human ghcagons-like pepfide 1,glp-1 ELISA KIT
ARB13200 小鼠脂联素(ADP)含量检测 Mouse adiponectin,adp ELISA KIT
环氧琼脂糖凝胶6B Vitamin A palmitate
迈格林华染色液 May-Grunwald Stain Solution  2×100ml|2×500ml
碱性红1:1 DL-3-Aminoisobutyric acid 3068-39-1
BL0940 生物素化人IgG抗体
BL1356 高效RIPA组织/细胞快速裂解液
36KD单条带蛋白Marker 10mg
1398-61-4 几丁质 Chitin
F030626 FITC标记兔抗大鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Rat IgG*FITC
ARB12622 大鼠维生素B6(VB6)酶联免疫定量检测 Rat vitamin b6,vb6 ELISA KIT
CYB163062 兔抗羊IgG-RBITC
总蛋白提取试剂盒 Total protein extraction kit  50T|100T
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·肺炎支原体/肺炎衣原体双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA052
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对犬细小病毒特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对犬细小病毒核酸进行体外扩增检测，用于对可疑感染病犬的病原学诊断。

二、用途：
本试剂盒适用于检测咽拭子、痰液，肺、淋巴结等组织以及血清等标本中肺炎支原体(MP)和肺炎衣原体(CP)DNA，适用于肺炎支原体和衣原体感染的辅助诊断。其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)

 

名称	数量	规格
核酸提取液	2管	1.5ml/管
Taq 酶系	1管	50μl/管
qPCR MIX	1管	1.0ml/管
阳性质控品	1管	50μl/管
阴性质控品	1管	250μl/管

四、荧光PCR 仪器适用范围：取得资格认证的荧光定量PCR仪。

五、储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。

六、样本采集及运输：
1. 适用标本：咽拭子、痰液、组织、血液等。
2. 标本采集：
痰液：取受检者深部痰液2-3ml置入5ml离心管，密闭送检。
咽试子：受检者生理盐水漱口，无菌咽试子粘取深部痰液，置入5ml离心管，密闭送检。
灌洗液：取待检者肺灌洗2-3ml，置于5ml离心管，密闭送检。
其他标本：取发病动物血液、组织等标本立即送检。
3. 保存运输：标本建议立即送检，如果需要保存建议于-20℃或者-80度保存，不超过6个月。避免反复冻融。标本运送时应采用0℃冰壶。

七、检测步骤：
1. 核酸提取
1.1 痰液或灌洗液：将痰液或灌洗液充分混匀，取0.5ml转至1.5ml干净离心管，加入等体积4%NaOH，充分混匀，室温放置10min，12000rpm离心5分钟，弃上清，沉淀加50μl核酸提取液，充分混匀，100℃处理10分钟，12000rpm离心5分钟，取上清液4μl做PCR反应。
1.2 咽试子：取1ml生理盐水加入5ml离心管，充分洗涤咽试子，将洗涤液转至1.5ml干净离心管中，13000rpm离心5分钟，弃上清，沉淀加50μl核酸提取液，充分混匀，100℃处理10分钟，12000rpm离心5分钟，取上清液4μl做PCR反应。
1.3 固体组织：剪取约0.5g组织，用生理盐水洗去血污，剪碎加入TE0.5ml转移到匀浆器中匀浆。将匀浆液50ul转移到1.5ml离心管中，加入50μl核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀) 并与沉淀混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清4μl进行PCR反应。
1.4 其他液体标本(培养物或血清等)：取标本1-2ml，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀加入50μl核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀) 并与沉淀混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清4μl进行PCR反应。
上述标本也可以选用取得资格认证的商业化试剂盒提取DNA。
2．PCR扩增
从试剂盒中取出qPCR MIX、Taq酶系室温融化并振荡混匀后，瞬时离心。设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
计算好各试剂的使用量，在一个灭菌洁净离心管中充分混匀，瞬时离心，向设定的N个PCR反应管或反应板中加入21μl上述试剂，然后再分别加入4μl 提取的待测样品、阳性质控品和阴性质控品，瞬时离心。放入荧光定量PCR仪器的反应槽内，按对应顺序设置阳性质控品、阴性质控品以及待测样品，并设置样品名称、报告基团设置为FAM和HEX(或JOE或VIC)，其中FAM基团检测肺炎支原体，HEX(或JOE或VIC)基团检测肺炎衣原体，淬灭基团为TAMRA。
推荐扩增条件为：94℃→2分钟，后94℃ 30秒→55℃ 45秒(采集荧光)，40个循环。
基线调整取6-15个循环的荧光背景信号，阈值设定原则上以阈值线刚超过阴性质控品的检测荧光曲线的最高点。
3. 结果分析判定
反应结束后，针对FAM和HEX(或JOE或VIC)双通道，使用手动调整阈值使阴性质控品Ct 值均在40以上，Ct 值小于35的为阳性；Ct 值在35-40之间，为灰区，需要进行重复试验。重复试验之后，如果Ct 值仍然在35-40之间，判断为阴性。
其中FAM通道为肺炎支原体检测结果，HEX(或JOE或VIC)通道为肺炎衣原体检测结果。
4. 质控标准
阴性质控品：CT值均显示UNDET或者CT=40，即结果为阴性；
阳性质控品：Ct 值均应小于 30，且呈标准“S”型扩增曲线。
以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效，全部试验应重新进行。

八、注意事项：
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等)，防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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