呼吸道合胞病毒A亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)哪里买

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

呼吸道合胞病毒A亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)哪里买的品牌：百奥莱博，是优质的病毒PCR检测试剂盒产品，用于生化科学研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多呼吸道合胞病毒A亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)等病毒PCR检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。

名称：呼吸道合胞病毒A亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)哪里买
编号：SYA172
产地：国产|进口
等级：科研试剂
品牌：百奥莱博
规格：48次/盒

我公司的呼吸道合胞病毒A亚型荧光PCR检测试剂盒(RSV)哪里买，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·空肠弯曲菌/结肠弯曲菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA100
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·麻疹病毒/风疹病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA250
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·小肠耶尔森菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA024
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪口蹄疫病毒O型抗体ELISA检测试剂盒
编号：SYA633
等级：科研实验专用
规格：192次/盒|480次/盒

·马尔堡病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA232
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)/B(SEB)双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA057
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·恶性疟原虫/间日疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA137
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·肉毒杆菌EF型双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA020
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·肺炎克雷伯菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA037
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·季节性H1流感病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA148
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鸡毒支原体单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA392
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·肉毒杆菌A型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA018
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·牛源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量)
编号：SYA300
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鸭源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA292
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对鸭源性成分特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用荧光PCR技术对鸭源性成分DNA进行体外扩增检测。本试剂盒中鸭源性成分的探针报告基团为FAM。

二、用途
该试剂盒适合于各种饲料及其它样品中鸭源性成分的检测。

三、试剂盒组成(48T)
组成成分 数量 规格
鸭物种荧光qPCR反应液(Duck-qPCR MIX) 1管 720μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(Duck-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Bio-Rad系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品采集与DNA提取
6.1 样品采集
样品的采集按照国家标准《饲料中牛羊源性成分的定性检测定性聚合酶链式反应(PCR)法》(GB/T 20190-2006)要求进行。
6.2 DNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Duck-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Duck-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(Duck-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明鸭源性成分核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明鸭源性成分核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行鸭源性成分qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明鸭源性成分核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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·玉米特异性基因Invertase单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA275
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·禽流感病毒H3亚型(AIV-H3)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA384
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对禽流感病毒H3亚型特异性引物，结合特异性荧光探针，用一步法荧光RT-PCR技术对禽流感病毒H3亚型RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中禽流感病毒H3亚型的探针报告基团为HEX/VIC/JOE。

二、用途：
本试剂盒适用于鼻咽提取物、鼻咽拭子、支气管肺泡灌洗液等临床样品中禽流感病毒H3亚型的特异性检测。适用于禽流感病毒H3亚型感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
禽流感H3荧光qRT-PCR反应液(H3-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(H5-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-80℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品：在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水，剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20s，取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品：称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮)，再加1mL生理盐水研磨至无块状物，然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可按常规方法提取，也可采用商品化试剂盒提取病毒RNA。
6.2.1 取无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管，做好标识。
6.2.2 加入600 μL裂解液，200 μL样本，200 μL*仿，混匀器上振荡5 s，4℃ 12000 rpm离心15 min。
6.2.3 吸取步骤6.2.2中的上清液转移至新的无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管中(避免吸出中间层)，加入400 μL异丙醇，颠倒混匀。
6.2.4 4℃ 12000 rpm离心15 min，弃上清；加入600 μL 75％乙醇。
6.2.5 4℃ 12000 rpm离心10 min，弃上清。打开离心管管盖，室温干燥5 min-10 min。
6.2.6 加入10μL 无核酸酶水，溶解管底的RNA，5000 rpm离心5 s，-20℃保存。若长期保存需放置-80℃冰箱。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(H3-qRT-PCRMIX)、酶混合物(EnzymesMIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(H3-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为HEX/VIC/JOE，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(H3-PTC)：均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明H3核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明H3核酸阴性。
(3)如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行H3qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明H3核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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