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免疫荧光
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弗元生物
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免疫荧光(Immunofluorescence,IF)是在免疫学、生物化学和显微镜技术基础上建立起的一项技术。将已知的抗原或抗体标记上荧光基团检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜观察荧光所在细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位。应用范围广泛,可以测定蛋白质、细胞因子、细胞表面抗原、肿瘤标志物等。目前,细胞免疫荧光抗体有许多已经具有直接标记荧光的产品,可以在活细胞状态下观察,固定的细胞也较ICC简便和快速,也可以作为激光共聚焦抗体预实验。
弗元生物,致力于打造具有国际影响力的生物医学品牌。
弗元生物立足于生物科技蓬勃发展的上海,与张江药谷、中科院、三甲医院等生物医学领域的各企事业单位协作紧密,共同为中国生物医学研究贡献力量。公司以干细胞与再生医学研究为核心,业务经营范围辐射到细胞生物学、分子生物学、免疫学等生物医学领域的多个相关学科。
至2019年初,公司有技术服务事业部、再生医学事业部和生命科学事业部三个主要发展部门。目前,在国际期刊杂志发表论文7篇,中文核心期刊发表论文1篇,申请国家发明专利4项,拥有商标9项;生命科学事业部,已经上市科研产品十余项,在研产品数十项;再生医学事业部,具有在研项目多项,包括间充质干细胞治疗缺氧性脑病、再生医学软骨、再生医学骨等,生物人工肝;技术服务事业部,服务了多家企业和科研机构,在再生医学的基础和转化研究上进一步完善了服务体系。
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文献和实验固定和透化 在培养板中将已爬好细胞的盖玻片用 1 × PBS 浸洗 3 次,每次 3 min。 用 4% 的多聚甲醛固定爬片 15 min,1 × PBS 浸洗玻片 3次,每次 3 min。 0.5%Triton X-100(1× PBS 配制 )室温通透细胞 15 min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤), 1 × PBS 浸洗玻片 3 次,每次 3 min。 封闭 吸水纸吸干 1 ×PBS,在玻片上滴加 5% 的正常血清(与二抗种属来源一致或相似),室温封闭 1 h
实验流程:多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上,随后即可衔接下一轮单标染色,直至全部标记完成,即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合:1)新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2)梯度乙醇浸片,100% 5min;95% 5min;70% 2min。3)灭菌水洗片1min,重复3次。4)10%中性福尔马林浸片10min,灭菌水洗片1min,重复3次。2.微波修复:1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中,用抗原
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