高纯度质粒提取试剂盒哪里买

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")高纯度质粒提取试剂盒哪里买，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：高纯度质粒提取试剂盒哪里买
英文名：High purity Plasmid Extraction Kit
品牌：百奥莱博
编号：RFT028
产地：国产|进口
本试剂盒采用经典的碱裂解法裂解细菌，再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合DNA的特性，可以从1–5ml大肠杆菌LB培养液中快速提取3–20μg纯净的高拷贝质粒DNA。提取的质粒可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等实验。然而，对质粒纯度要求更高的转染实验(要求无内毒素)，此试剂盒不能达到要求。另外，尽管该试剂盒可以抽提较大的质粒(>10kb)，但我们不推荐使用。如果一定要使用，请参考以下方法：加大菌体使用量(使用5–10 ml过夜培养物)，同时按照比例增加P1、P2、P3的用量；洗脱缓冲液应在70℃预热，在吸附和洗脱时可以适当的延长时间，以增加提取效率，其它步骤相同。

本试剂盒使用了有颜裂解液，菌体裂解是否完全一目了然。由于判断菌体裂解和中和是否彻底更主要取决于操作者的经验，所以我们增加了有颜裂解液(一种能使裂解/中和体系变换颜色的试剂)来帮助观察裂解/中和的程度。加入P1后，有颜裂解液使菌液变为浑浊的红色；加入P2后，有颜裂解液立即使溶液变为澄清的红色，裂解是否完全只要观察红色溶液是否澄清，如果红色非常均一，表明裂解充分；在完全裂解的体系中加入P3混匀后，体系立即变为黄色，任何红色的残留表明没有完全混匀或者中和不彻底。

本试剂盒增加了去蛋白液PD，能更加彻底地去除蛋白污染，得到纯度更高的质粒。

试剂盒组份：

 

试剂盒组成	100次	200次	贮存方式
RNase A	300μl	600μl	-20℃
有颜裂解液	600μl	2×600μl	室温
溶液P1	30 ml	60 ml	室温(加入RNase A后2-8℃保存)
溶液P2	30 ml	60 ml	室温
溶液P3	40 ml	80 ml	室温
去蛋白液PD	60 ml	120 ml	室温
漂洗液PW	25 ml	2×25 ml	室温
洗脱缓冲液EB	15 ml	15 ml	室温
质粒吸附柱CP	100个	2×100个	室温
收集管(2 ml)	100个	2×100个	室温
说明书	1份	1份

储存条件：室温，有效期12个月。

欲咨询购买高纯度质粒提取试剂盒哪里买，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·红细胞裂解液
编号：RFT158
英文名称：Red Blood Cell Lysis Buffer
规格：120ml
本裂解液是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。本裂解液经过优化配方，主要有效成分为*化铵，在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。本裂解液经过无菌处理，处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。

使用方法：

一、对于组织细胞样品：
1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
2、加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入3-5ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。
3、400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5、洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。可再重复1次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

二、对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤：
1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
2、对于0.2ml细胞沉淀加入1ml红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。本步骤在室温或4度操作均可。
3、加入15-20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。
4、400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。
5、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程中的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。

三、对于血液样品：
1、取新鲜抗凝血，400-500g离心5分钟，离心弃上清。
2、加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入6-10ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠的血液，裂解1-2分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至4-5分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。
3、400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5、洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。可再重复1次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
注意：对于微量或少量的血液样品，可以在第一步中不进行离心弃上清的操作，直接在第二步中加入10倍血液体积的红细胞裂解液，并在室温或4℃裂解4-5分钟。对于鼠的血液，裂解4-5分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至10分钟，但通常不宜超过15分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。

四、对于血液样品无需洗涤的快速操作步骤：
1、每1ml新鲜抗凝血中加入10ml红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解4-5分钟。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠的血液，裂解4-5分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至10分钟，但通常不宜超过15分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。
2、加入20-30ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。
3、400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。

注意事项：
1、本裂解液为无菌产品，请注意保持无菌，使用本产品时宜在超净工作台内进行。
2、如果经过红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取，在处理细胞时不必使用经过DEPC处理过的溶液。

储存条件：4℃，有效期12个月。


高纯度质粒提取试剂盒哪里买关键词：高纯度质粒提取试剂盒,RFT028,High purity Plasmid Extraction Kit


·高保真平末端pfu DNA聚合酶
编号：RFT101
英文名称：pfu DNA Polymerase
规格：100U(40μl)|5×100U(5×40μl)
本品是嗜热古细菌来源的DNA聚合酶，该酶除具有5’-3’DNA聚合酶活性外，还具有很强的3’-5’外切酶活性，增强了PCR扩增的保真度。与Taq酶相比，pfu聚合酶热稳定性更好，更能忍耐较高的变性温度。Pfu的保真性是Taq DNA聚合酶的10-15倍。延伸速度为0.5kb/分钟。PCR产物3’端不带碱基A，为平滑末端，要通过平滑末端克隆法进行克隆。适用于高保真的DNA片段的扩增、DNA片段的平滑化。

试剂盒组成：
pfu DNA Polymerase(2.5U/μl)-————————40μl
10×pfu PCR buffer(含Mg2＋)—————————1ml

活性定义：1单位(U) pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

贮存液：50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol

使用方法：
1、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

成分	20μl反应体系	50μl反应体系	终浓度
Template	0.04-0.2 μg	0.1-0.5 μg	as you wish
Primer 1(10μM)	0.4μl	1μl	0.2μM
Primer 2(10μM)	0.4μl	1μl	0.2μM
10×pfu PCR buffer(含Mg2+)	2μl	5μl	1×
dNTP Mixture(10 mM)	0.4μl	1μl	200μM each
pfu (2.5 U/μl)	0.4μl	1μl	0.05U/μl
ddH2O	up to 20μl	up to 50μl	-

注1：如果需要改变Mg2+浓度，根据下表调节

PCR反应体系中Mg2+终浓度	2 mM	2.5 mM	3 mM	4 mM
20μl反应体系中25 mM MgSO4加入量	0μl	0.4μl	0.8μl	1.6μl
50μl反应体系中25 mM MgSO4加入量	0μl	1μl	2μl	4μl

注2：配制反应液时，请最后加入pfu，因为本酶有很强的3’-5’外切酶活性，有可能降解引物。
2、混匀后，离心快甩将反应液收集到管底。
3、PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
4、PCR仪上执行以下程序：

步骤	温度	时间	循环数
初始变性	94℃	3-5 min	1
变性	94℃	30 sec	25-40*
退火	50-60℃*	30 sec
延伸	72℃	0.5kb/min*
最后延伸	72℃	5 min	1

注：PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

注意事项：
1、pfu 酶具有 3’-5’的外切酶活性，所以 pfu 酶扩增时延伸速度远比 Taq 酶低，应根据扩增产物的长度设置相应的延伸时间，一般情况下 pfu 酶的延伸速度为每分钟 0.5kb；同时 pfu 酶的 3’-5’的外切酶活性可能降解引物，所以应最后把pfu 酶到反应体系中，并立即进行 PCR 反应。
2、pfu 酶的热稳定性比 Taq 酶好，对于 GC 含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃，对 pfu 酶的活性无影响。

储存条件：-20℃，有效期一年。


高纯度质粒提取试剂盒哪里买关键词：高纯度质粒提取试剂盒,RFT028,High purity Plasmid Extraction Kit

ARB14063 豌豆凝集素(PSA)Elisa定量检测 Pisum sativum agglutinin,psa ELISA KIT
58-63-9 Inosine      肌苷/次黄嘌呤核苷
ARB11037 人环加氧酶2(COX-2)Elisa方法检测 Human cyclooxygenase-2,cox-2 ELISA KIT
F030424 胶体金标记兔抗牛IgG抗体 Rabbit Anti-Bovine IgG*GOLD
PY02-319  3%*化*MR-VP培养基  250克  
F040105 牛血清白蛋白偶联沙丁胺醇 BSA-SAL
ARB10850 人抗胃壁细胞抗体(AGPA/PCA)酶标法分析 Human anti-gastric parietal cell antibody,agpa/pca ELISA KIT
F020226 兔抗猫IgG抗体 Rabbit Anti-Cat IgG
ARB10282 人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)检测服务 Human epithelial neutrophil activating Peptide 78,ena-78 ELISA KIT
ARB10671 人血管紧张素Ⅱ受体IA型(AgtrIA)ELISA检测服务 Human angiotensin Ⅱ receptor type ia,agtria ELISA KIT
BTN90901 菌体内毒素清除剂 Bacterial Endotoxin Erasol
酒石黄 Cephalin 1934-21-0
碳酸盐缓冲液 Z-Glu-OH
BOC-D-色*酸 Glycyl-L-Tryosine 5241-64-5
BL1129 ELISA包被液(10x)
考马斯亮蓝快速染色液 500ml
ARB10488 人白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)含量测试 Human interleukin 2,IL-2 ELISA KIT
2,4,6-三甲基*甲酰二*氧磷 Phenylfluorone 75980-60-8
乙二*(代"胺")四乙酸二*锌盐 Carbazole 176736-49-5
ARB11368 人前列腺素D合成酶(PGDS)代做ELISA实验 Human prostaglandin d synthase,pgds ELISA KIT
ARB14227 鸡新城疫病毒抗体(NDV-Ab)Elisa方法检测 
甲基环戊烯醇酮 Phosphoglucose isomerase 765-70-8

我公司正在优惠促销DNA纯化等系列产品，期待您的咨询选购高纯度质粒提取试剂盒哪里买。