北京现货细菌基因组DNA提取试剂盒销售

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北京百奥莱博专业生产供应北京现货细菌基因组DNA提取试剂盒销*(代"售")，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京现货细菌基因组DNA提取试剂盒销*(代"售")
英文名：Bacterial genomic DNA Extraction Kit
规格：50次|100次
品牌：百奥莱博
编号：RFT037
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统提取细菌(革兰氏阳性菌和阴性菌)的基因组DNA。溶菌酶能有效去除细菌细胞壁；蛋白酶K能把核酸解离出来； RNaseA能去除痕量的RNA污染；离心吸附柱能够高效、专一吸附DNA，最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物，提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次	100次	贮存方式
缓冲液GA	15 ml	30 ml	室温
缓冲液GB	15 ml	30 ml	室温
去蛋白液GD(浓缩液)	18 ml	36ml	室温
漂洗液GW(浓缩液)	25 ml	25 ml	室温
洗脱缓冲液EB	15 ml	15ml	室温
蛋白酶K(20mg/ml)	1 ml	2×1 ml	-20℃
溶菌酶(5mg/ml)	1ml	2×1 ml	-20℃
RNase A(10mg/ml)	1ml	1 ml	-20℃
吸附柱CG	50个	100个	室温
收集管(2 ml)	50个	100个	室温
说明书	1份	1份

准备工作：
1、准备55℃和70℃水浴；无水乙醇；1.5ml灭菌离心管。
2、按照标签所示在去蛋白液GD和漂洗液GW中加入无水乙醇，混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3、每次使用前请检查缓冲液GA，缓冲液GB和去蛋白液GD是否有沉淀生成，如果出现沉淀，37℃温浴至沉淀溶解后再使用。

操作步骤：
如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、取细菌培养液1–2 ml，10,000 g离心1分钟，尽量吸净上清；向细菌沉淀中加入180μl EB，旋涡混匀后加入18μl 溶菌酶，室温放置10-15分钟，期间间歇混匀几次。
注：溶菌酶的用量和处理时间与处理的细菌种类密切相关，用户可以根据细菌种类进行调节。如革兰氏阳性菌应将处理时间延长到30-60分钟。
2、10000g离心1分钟，吸弃大部分上清，留下约10μl液体，彻底混匀。
注：由于余留的液体较少，彻底混匀菌体不太容易，用手指弹动管壁附加枪头反复吹打既能完全混匀菌体。混匀一定要彻底，否则容易导致步骤8中离心柱堵塞。
3、向菌体沉淀中加入200μl缓冲液GA，混匀。
4、向管中加入20μl 蛋白酶K，混匀，55℃处理15-30分钟，期间间歇混匀2-3次至溶液清亮。
注：加入蛋白酶K后会产生絮状物，消化彻底的标志是絮状物完全消失，溶液变清亮。如消化不彻底，会导致步骤8中离心柱堵塞。
5、加入10μl RNaseA(10 mg/ml)溶液，混匀后室温放置2分钟。
6、加入220μl缓冲液GB，混匀，70℃放置10-30分钟(对于革兰氏阳性菌，时间应延长到60分钟)。
注：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置相应时间后溶液会变清亮。如溶液未变清亮，应延长70℃处理时间。如果絮状物不能处理干净，容易导致步骤8中离心柱的堵塞。
7、加入220μl无水乙醇，充分混匀。
注：加入乙醇后会产生絮状沉淀，可用枪头反复抽打1-2次将沉淀弄碎后再上柱。如果絮状物未做处理，容易导致步骤8中离心柱的堵塞。
8、将上一步所得溶液和絮状沉淀加入到吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中)，11000g离心5分钟，倒掉废液，吸附柱CG放入收集管中。
注：如果出现吸附柱堵塞现象，可将离心时间延长到10分钟。
9、向吸附柱CG中加入500μl去蛋白液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，11,000 g离心2分钟，倒掉废液，吸附柱放入收集管中。
10、向吸附柱CG中加入700μl漂洗液GW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，11,000 g离心60秒，倒掉废液，吸附柱放入收集管中。
11、向吸附柱CG中加入500μl 漂洗液GW，11,000 g离心60秒，倒掉废液。
12、吸附柱CG放回收集管中，11,000 g离心2分钟。
注：此步骤非常重要，其目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
13、将吸附柱CG转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50–100μl经70℃水浴预热的洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟，11,000 g离心2分钟。
注意：
a.洗脱缓冲液体积最好不少于50μl，体积过小影响回收效率。
b.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。
14、DNA产物-20℃保存。

DNA浓度及纯度检测：
基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0％琼脂糖凝胶，使用λ/HindIII判断基因组的大小，完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时， OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水洗脱，比值可能偏低，但并不表明DNA纯度不高。

储存条件：室温，有效期12个月。

关于北京现货细菌基因组DNA提取试剂盒销*(代"售")的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·λDNA/HindIII(125～23130bp)
编号：RFT026
规格：100次(2×25μg/2×250μl)
本产品是由λDNA经HindIII完全酶切而成，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。产品浓度为0.1μg/μl，已含有1×loading buffer，可直接取2-5μl上样，使用方便。8条带的大小分别为125，564，2027，2322，4361，6557，9416，23130bp。



使用方法：
1.65℃加热5分钟，立即冰浴3分钟，取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中。
注：根据梳子的厚度和宽度进行上样。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl。窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl；宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子，可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为1.0％，凝胶长度10cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间45分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. λDNA酶切Marker的末端容易由COS末端结合在一起，电泳前65℃预热5分钟能解开结合的COS末端，得到更清晰的电泳图像。如果不预热，23130bp和4361bp会结合形成27491bp的额外片段，同时电泳后4361bp亮度会明显弱于其他片段。
2. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
3. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。


北京现货细菌基因组DNA提取试剂盒销*(代"售")关键词：细菌基因组DNA提取试剂盒,RFT037,Bacterial genomic DNA Extraction Kit


·200bp DNA ladder(200～3000bp)
编号：RFT005
规格：100T(2×250μl)
本产品是由11条带状双链DNA组成的即用型DNA Ladder，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。 11条带包括200，400，600，800，1000，1200，1400，1600，1800，2000，3000bp，其中1000bp条带为100ng/5μl，其余条带浓度为50ng/5μl。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注：根据梳子的厚度和宽度进行上样。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl。窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl；宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子，可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为1.0％，凝胶长度8-10cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间35-40分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。


北京现货细菌基因组DNA提取试剂盒销*(代"售")关键词：细菌基因组DNA提取试剂盒,RFT037,Bacterial genomic DNA Extraction Kit

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