JM109化学感受态细胞(国产,进口)

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括JM109化学感受态细胞(国产,进口)在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：JM109化学感受态细胞(国产,进口)
品牌：百奥莱博
编号：RFT113
规格：20×100μl
产地：国产|进口
本公司生产的JM109感受态细胞采用经特殊工艺处理得到，可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测，转化效率可达108cfu/μg，-70℃保存几个月转化效率不发生改变。

基因型：endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk-,mk+) relA1 supE44 D (lac-proAB) [F′traD36 proAB laqI qZΔM15]

特点：用于蓝白斑筛选；recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

操作方法：(以下操作均按无菌条件的标准进行)
1、取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中，置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100μl感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入目的DNA(50μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30分钟。
3、将离心管置于42℃水浴中放置45秒，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3分钟，该过程不要摇动离心管。
4、向每个离心管中加入500μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)， 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟)，目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5、将离心管内容物混匀，吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收，倒置平板，37℃培养12—16小时。
注意：涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多，可取更少量转化产物涂布平板；反之，如转化的DNA总量较少，可取200—300μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少，可通过离心(4,000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)

注意事项：
1、感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免感受态细胞的转化效率。
2、进行转化操作时，应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
3、为防止转化实验不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，将损失降到最低。

储存条件：-70℃，有效期6个月。

欲咨询购买JM109化学感受态细胞(国产,进口)，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·4×蛋白上样缓冲液(非变性胶)
编号：RFT066
英文名称：4×Native-PAGE protein loading buffer
规格：10×1ml
本制品是蛋白质样品进行 Native-PAGE(非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶)电泳用的上样 Buffer。制品中含有示踪色素*酚蓝，可以确认电泳的进行情况。使用本制品，蛋白质在电泳胶中可以得到很好地分离。电泳后用考马斯亮蓝或者银染色等方法染色后，蛋白质电泳带能够得到清晰显示。非变性蛋白质电泳时，蛋白质的迁移速度与其固有的分子量、分子的形状及所带的电荷量等有一定关系。

使用方法：
使用前，先离心快甩使溶液至管底，以防开盖后造成污染。
向6μl的蛋白质样品中加入本制品 2μl(本制品与蛋白质样品按照 1：3的体积比混合)，振荡混匀后稍离心，即可上样电泳。本制品使用方便，可以根据蛋白质样品和电泳胶孔的体积，按照上述比例调整本制品的使用量。

注意事项：
1、为了您的安全，使用时请使用一次性手套操作，注意防护！
2、本制品不适用于变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶蛋白电泳。

储存条件：-20℃，避光。


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·高纯度质粒提取试剂盒
编号：RFT028
英文名称：High purity Plasmid Extraction Kit
规格：100次|200次
本试剂盒采用经典的碱裂解法裂解细菌，再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合DNA的特性，可以从1–5ml大肠杆菌LB培养液中快速提取3–20μg纯净的高拷贝质粒DNA。提取的质粒可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等实验。然而，对质粒纯度要求更高的转染实验(要求无内毒素)，此试剂盒不能达到要求。另外，尽管该试剂盒可以抽提较大的质粒(>10kb)，但我们不推荐使用。如果一定要使用，请参考以下方法：加大菌体使用量(使用5–10 ml过夜培养物)，同时按照比例增加P1、P2、P3的用量；洗脱缓冲液应在70℃预热，在吸附和洗脱时可以适当的延长时间，以增加提取效率，其它步骤相同。

本试剂盒使用了有颜裂解液，菌体裂解是否完全一目了然。由于判断菌体裂解和中和是否彻底更主要取决于操作者的经验，所以我们增加了有颜裂解液(一种能使裂解/中和体系变换颜色的试剂)来帮助观察裂解/中和的程度。加入P1后，有颜裂解液使菌液变为浑浊的红色；加入P2后，有颜裂解液立即使溶液变为澄清的红色，裂解是否完全只要观察红色溶液是否澄清，如果红色非常均一，表明裂解充分；在完全裂解的体系中加入P3混匀后，体系立即变为黄色，任何红色的残留表明没有完全混匀或者中和不彻底。

本试剂盒增加了去蛋白液PD，能更加彻底地去除蛋白污染，得到纯度更高的质粒。

试剂盒组份：

 

试剂盒组成	100次	200次	贮存方式
RNase A	300μl	600μl	-20℃
有颜裂解液	600μl	2×600μl	室温
溶液P1	30 ml	60 ml	室温(加入RNase A后2-8℃保存)
溶液P2	30 ml	60 ml	室温
溶液P3	40 ml	80 ml	室温
去蛋白液PD	60 ml	120 ml	室温
漂洗液PW	25 ml	2×25 ml	室温
洗脱缓冲液EB	15 ml	15 ml	室温
质粒吸附柱CP	100个	2×100个	室温
收集管(2 ml)	100个	2×100个	室温
说明书	1份	1份

储存条件：室温，有效期12个月。


JM109化学感受态细胞(国产,进口)关键词：RFT113,JM109化学感受态细胞,JM109 Competent cell

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