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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
阴凉干燥
- 保质期:
长期
- 英文名:
5×RNA loading buffer
- 库存:
724
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应5×RNA上样液哪里买,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:5×RNA上样液哪里买
产地:国产|进口
编号:RFT189
规格:5×1ml
英文名:5×RNA loading buffer
品牌:百奥莱博
欲咨询购买5×RNA上样液哪里买,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·1kb DNA ladder(1000~10000bp)
编号:RFT003
规格:100T(2×250μl)
本产品是由8条带状双链DNA条带组成的即用型DNA Ladder,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。条带分为1000,2000,3000,4000,5000,6000,8000,10000bp。其中4000bp条带为100ng/5μl,其余条带浓度50ng/5μl。
使用方法:
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl,如果加样孔宽于5mm,可以适当增加上样量)就行电泳。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度5-7cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间30-35分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
5×RNA上样液哪里买关键词:RFT189,5×RNA上样液,5×RNA loading buffer
·高保真平末端pfu DNA聚合酶
编号:RFT101
英文名称:pfu DNA Polymerase
规格:100U(40μl)|5×100U(5×40μl)
本品是嗜热古细菌来源的DNA聚合酶,该酶除具有5’-3’DNA聚合酶活性外,还具有很强的3’-5’外切酶活性,增强了PCR扩增的保真度。与Taq酶相比,pfu聚合酶热稳定性更好,更能忍耐较高的变性温度。Pfu的保真性是Taq DNA聚合酶的10-15倍。延伸速度为0.5kb/分钟。PCR产物3’端不带碱基A,为平滑末端,要通过平滑末端克隆法进行克隆。适用于高保真的DNA片段的扩增、DNA片段的平滑化。
试剂盒组成:
pfu DNA Polymerase(2.5U/μl)-————————40μl
10×pfu PCR buffer(含Mg2+)—————————1ml
活性定义:1单位(U) pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
贮存液:50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol
使用方法:
1、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
| 成分 | 20μl反应体系 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| Template | 0.04-0.2 μg | 0.1-0.5 μg | as you wish |
| Primer 1(10μM) | 0.4μl | 1μl | 0.2μM |
| Primer 2(10μM) | 0.4μl | 1μl | 0.2μM |
| 10×pfu PCR buffer(含Mg2+) | 2μl | 5μl | 1× |
| dNTP Mixture(10 mM) | 0.4μl | 1μl | 200μM each |
| pfu (2.5 U/μl) | 0.4μl | 1μl | 0.05U/μl |
| ddH2O | up to 20μl | up to 50μl | - |
注1:如果需要改变Mg2+浓度,根据下表调节
| PCR反应体系中Mg2+终浓度 | 2 mM | 2.5 mM | 3 mM | 4 mM |
| 20μl反应体系中25 mM MgSO4加入量 | 0μl | 0.4μl | 0.8μl | 1.6μl |
| 50μl反应体系中25 mM MgSO4加入量 | 0μl | 1μl | 2μl | 4μl |
注2:配制反应液时,请最后加入pfu,因为本酶有很强的3’-5’外切酶活性,有可能降解引物。
2、混匀后,离心快甩将反应液收集到管底。
3、PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
4、PCR仪上执行以下程序:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 初始变性 | 94℃ | 3-5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
| 退火 | 50-60℃* | 30 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 0.5kb/min* | |
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
注:PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
注意事项:
1、pfu 酶具有 3’-5’的外切酶活性,所以 pfu 酶扩增时延伸速度远比 Taq 酶低,应根据扩增产物的长度设置相应的延伸时间,一般情况下 pfu 酶的延伸速度为每分钟 0.5kb;同时 pfu 酶的 3’-5’的外切酶活性可能降解引物,所以应最后把pfu 酶到反应体系中,并立即进行 PCR 反应。
2、pfu 酶的热稳定性比 Taq 酶好,对于 GC 含量很高的模板,变性温度可以提高到98℃,对 pfu 酶的活性无影响。
储存条件:-20℃,有效期一年。
5×RNA上样液哪里买关键词:RFT189,5×RNA上样液,5×RNA loading buffer
ARB14111 人胃生长素(GhrelIn)含量分析
木质素磺酸* Potassium hydrogen tartrate 8061-51-6
马休黄指示剂 100ml
dTTP(100mM)(超纯)
9032-75-1 Pectinase 果胶酶(40u/mg)
鸟嘌呤 PASAM 73-40-5
SJ0849 人血清(混合血型)
987-65-5 三磷酸腺苷二* ATPNa2
BTN131195 Deep Vent DNA聚合酶 Deep Vent(exo-)DNA Polymerase
PY02-290 麦氏培养基(醋酸*培养基) 250克
32986-56-4 Tobramycin 托普霉素/妥布霉素
FMOC-L-异亮*酸 o-Phenanthroline hydrochloride 71989-23-6
NF-201 羊抗人APO-A血清
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文献和实验8.0) 0.05% SDS 实验设备 层析系统,水浴,离心机,取液器,分光光度计 实验步骤 1. DEPC处理层析柱。 2. 0.1M NaOH处理Oliga(dT)-纤维素。 3. 用1×上样液洗柱至pH 4. 无菌水溶解RNA,65℃温浴5分钟后,迅速冷却至室温,加等体积2×上样液,上样,分部收集。 5. 1倍体积1×上样液洗柱,分部
1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。 凝胶上样液(gel loading solutions) 6×碱性凝胶上样液(室温贮存) 成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量 0.3 N 氢氧化钠 6 mmol/L EDTA 18%聚蔗糖(400型) 0.15%溴甲酚绿 0.25%二甲苯青FF 水 300ul 10N 氢氧化钠 120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。 凝胶上样液(gel loading solutions) 6×碱性凝胶上样液(室温贮存) 成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量 0.3 N 氢氧化钠 6 mmol/L EDTA 18%聚蔗糖(400型) 0.15%溴甲酚绿 0.25%二甲苯青FF 水 300ul 10N 氢氧化钠 120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 1.8g 15mg 25
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