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        电泳缓冲液、染料和凝胶加样液的配置

        互联网

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        电泳缓冲液

        50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液

        成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量
        2mol/L Tris碱
        1mol/L 乙酸
        100 mmol/L EDTA
        水 242g
        57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)
        200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
        补足1L

        5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液

        成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量
        445 mmol/L Tris碱
        445 mmol/L 硼酸盐
        10 mmol/L EDTA
        水 54g
        27.5g 硼酸
        20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
        补足1L

        染料

        1%溴酚蓝(bromophenol blue)
        加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
        1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)
        溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。
        10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide)
        小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。
        凝胶上样液(gel loading solutions)
        6×碱性凝胶上样液(室温贮存)
        成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
        0.3 N 氢氧化钠
        6 mmol/L EDTA
        18%聚蔗糖(400型)
        0.15%溴甲酚绿
        0.25%二甲苯青FF
        水 300ul 10N 氢氧化钠
        120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
        1.8g
        15mg
        25mg
        补足到10ml

        6×聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

        成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
        0.15%溴酚蓝
        0.15%二甲苯青FF
        5 mmol/L EDTA
        15%聚蔗糖(400型)
        水 1.5ml 1%溴酚蓝
        1.5ml 1%二甲苯青FF
        100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
        1.5g
        补足到10ml

        6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

        成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
        0.25%溴酚蓝
        0.25%二甲苯青FF
        15%聚蔗糖(400型)
        水 2.5ml 1%溴酚蓝
        2.5ml 1%二甲苯青FF
        1.5g
        补足到10ml

        6×甘油凝胶上样液(4℃贮存)

        成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
        0.15%溴酚蓝
        0.15%二甲苯青FF
        5 mmol/L EDTA
        50%甘油
        水 1.5ml 1%溴酚蓝
        1.5ml 1%二甲苯青FF
        100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
        3ml
        3.9ml

        6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

        成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
        0.15%溴酚蓝
        0.15%二甲苯青FF
        5 mmol/L EDTA
        40%聚蔗糖
        水 1.5ml 1%溴酚蓝
        1.5ml 1%二甲苯青FF
        100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
        4g
        补足到10ml

        10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存)

        成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量
        0.2%溴酚蓝
        0.2%二甲苯青FF
        200 mmol/L EDTA
        0.1%SDS
        50%甘油
        水 20mg
        20mg
        4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
        100ul 10% SDS
        5ml
        补足到10ml

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