北京土壤基因组提取试剂盒价格

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北京土壤基因组提取试剂盒价格由老牌试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持，本产品用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多土壤基因组提取试剂盒等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。

名称：北京土壤基因组提取试剂盒价格
规格：50次
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：WE0187
  本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的干燥土壤、湿泥、淤泥及海河沉淀物中提取总DNA。本产品使用安全方便，单个样品操作一般可在40分钟内完成。使用本品每克土壤可获得5μg以上的DNA，片段长度主要在20-30 kb之间。本试剂盒采用独特的溶液能够有效去除杂质和腐殖酸，通过优化的缓冲系统使裂解液中的DNA高效结合到吸附柱上，土壤中残留的杂质、PCR和酶反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤有效去除，最后使用低盐缓冲液或水洗脱，即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次
Buffer SW	60ml
Buffer SL	30ml
Buffer GLS	30ml
Buffer PR(浓缩液)	13ml
Buffer GW1(浓缩液)	13ml
Buffer GW2(浓缩液)	15ml
Buffer GE	15ml
吸附柱DM及收集管	50套

自备试剂：无水乙醇，70%乙醇。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PR、GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
3、使用前请检查Buffer SL和Buffer GLS是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer SL和Buffer GLS于56℃水浴重新溶解。

操作步骤：
1、取0.1 g-0.3 g土壤样本，置于离心管(自备)中，加入1ml Buffer SW，涡旋振荡1-3分钟(须将管底的土壤震起来)。12000rpm(～13400×g)离心1分钟，倒掉上清。
2、加入750μl的70%乙醇，涡旋振荡1分钟(须将管底的土壤震起来)，12000rpm离心1分钟，倒掉上清，用移液器将余液吸尽。
3、向沉淀中加入500μl Buffer SL，涡旋振荡1-3分钟(须将管底的土壤震起来)，65℃水浴20分钟(可每隔5分钟涡旋振荡5秒)，12000rpm离心3分钟，将上清移至新的离心管(自备)中。
4、向上清液中加等体积Buffer GLS，颠倒混匀15-25次，冰上放置5分钟。12000rpm离心5分钟。
注意：冰上放置后液体可能会凝结，属正常现象。
5、将步骤4中所得上清加入到已装入收集管的吸附柱DM中，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：若一次不能加完溶液，可分多次转入。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer PR(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-100μlBuffer GE或灭菌水，室温放置 2-5分钟， 12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-100μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤10；若洗脱体积小于100μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
6)基因组DNA模板中微量的残余腐殖酸可能对PCR反应产生不良影响。此时将DNA稀释5-100倍问题通常即可解决。如经稀释后的DNA仍不能有效应用于PCR反应， 请使用腐殖酸清除剂，以获得更高效的清除效果。

储存条件：室温(15～30℃)。

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·Rosetta(DE3)感受态细胞
编号：WE0250
英文名称：Rosetta(DE3)Competent Cell
规格：100μl×10支
  本产品是采用进口Rosetta菌株，经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。Rosetta菌株是携带*霉素抗性质粒BL21的衍生菌，补充大肠杆菌缺乏的6种稀有密码子(AUA，AGG，AGA，CUA，CCC，GGA)对应的tRNA，提高外源基因，尤其是真核基因在原核系统中的表达水平。使用pUC19质粒检测，转化效率可达107。

产品组成：

组份	0.1ml×10支
Rosetta(DE3)Competent Cell	10×100μl
Control DNA pUC19，0.1ng/μl	10μl

实验前准备及重要注意事项
1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供对照试验使用。

使用方法：
1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2、待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3、42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5、根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意：
1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2)新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

储存条件：-80℃。


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