北京土壤基因组提取试剂盒优惠促销

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京土壤基因组提取试剂盒优惠促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京土壤基因组提取试剂盒优惠促销
编号：WE0187
产地：国产|进口
英文名：Soil Genomic DNA Extraction Kit
  本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的干燥土壤、湿泥、淤泥及海河沉淀物中提取总DNA。本产品使用安全方便，单个样品操作一般可在40分钟内完成。使用本品每克土壤可获得5μg以上的DNA，片段长度主要在20-30 kb之间。本试剂盒采用独特的溶液能够有效去除杂质和腐殖酸，通过优化的缓冲系统使裂解液中的DNA高效结合到吸附柱上，土壤中残留的杂质、PCR和酶反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤有效去除，最后使用低盐缓冲液或水洗脱，即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次
Buffer SW	60ml
Buffer SL	30ml
Buffer GLS	30ml
Buffer PR(浓缩液)	13ml
Buffer GW1(浓缩液)	13ml
Buffer GW2(浓缩液)	15ml
Buffer GE	15ml
吸附柱DM及收集管	50套

自备试剂：无水乙醇，70%乙醇。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PR、GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
3、使用前请检查Buffer SL和Buffer GLS是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer SL和Buffer GLS于56℃水浴重新溶解。

操作步骤：
1、取0.1 g-0.3 g土壤样本，置于离心管(自备)中，加入1ml Buffer SW，涡旋振荡1-3分钟(须将管底的土壤震起来)。12000rpm(～13400×g)离心1分钟，倒掉上清。
2、加入750μl的70%乙醇，涡旋振荡1分钟(须将管底的土壤震起来)，12000rpm离心1分钟，倒掉上清，用移液器将余液吸尽。
3、向沉淀中加入500μl Buffer SL，涡旋振荡1-3分钟(须将管底的土壤震起来)，65℃水浴20分钟(可每隔5分钟涡旋振荡5秒)，12000rpm离心3分钟，将上清移至新的离心管(自备)中。
4、向上清液中加等体积Buffer GLS，颠倒混匀15-25次，冰上放置5分钟。12000rpm离心5分钟。
注意：冰上放置后液体可能会凝结，属正常现象。
5、将步骤4中所得上清加入到已装入收集管的吸附柱DM中，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：若一次不能加完溶液，可分多次转入。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer PR(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-100μlBuffer GE或灭菌水，室温放置 2-5分钟， 12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-100μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤10；若洗脱体积小于100μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
6)基因组DNA模板中微量的残余腐殖酸可能对PCR反应产生不良影响。此时将DNA稀释5-100倍问题通常即可解决。如经稀释后的DNA仍不能有效应用于PCR反应， 请使用腐殖酸清除剂，以获得更高效的清除效果。

储存条件：室温(15～30℃)。

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·2×Pfu MasterMix(含染料)
编号：WE0108
英文名称：2×Pfu MasterMix(With Dye)
规格：5ml
  本品为Pfu DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，浓度为2×。Pfu DNA Polymerase具有5"-3"DNA聚合酶活性和5"-3"外切核酸酶活性的同时具有3"-5"外切核酸酶活性，因此在DNA扩增过程中具备纠错能力，是目前发现的错配率最低的耐高温DNA Polymerase。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷，可最大限度地减少人为误差和污染。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定，重复性好。本产品已加入染料(蓝色)，反应结束后可直接进行电泳检测，无需再使用上样缓冲液。本产品所含的Pfu DNA聚合酶具有错配率低，耐高温的特点，适用于基因克隆、基因定点突变、SNP和末端补平等反应。

产品组成：

组份	1ml	5ml
2×Pfu MasterMix(With Dye)	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

注意：2×Pfu MasterMix含有Pfu DNA Polymerase, 3 mM MgCl2和400μM each dNTP。

质量控制：
1、经检验无外源核酸酶活性；
2、PCR方法检测无宿主残余DNA；
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因；
4、2～8℃存放三个月，活性无明显改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×Pfu MasterMix(With Dye)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：用Pfu酶扩增时，引物的纯度要求较高，引物长度大于18个碱基，引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	25-35个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)Pfu酶的热稳定性比Taq酶好，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃，对Pfu酶的活性无影响。
2)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
3)Pfu酶具有3"-5"外切酶活性，所以Pfu酶扩增时延伸速度远比Taq酶低，延伸时间根据所扩增片段大小设定，本产品的扩增延伸速率为1 kb/min。
4)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
5)本产品具有3"-5"外切核酸酶活性，PCR产物为平端不能直接用于T/A克隆，如需进行T/A克隆则需要在其末端添加“A”或用平末端载体进行克隆。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。


北京土壤基因组提取试剂盒优惠促销关键词：土壤基因组提取试剂盒,Soil Genomic DNA Extraction Kit,WE0187


·UltraStain核酸染料
编号：WE0210
英文名称：UltraStain Nuclear Dye
规格：500μl
  UltraStain是一种生物大分子，不能穿透细胞膜进入细胞内。相对于EB的强诱变性，是一种安全无毒的核酸染料。UltraStain与EB具有相同的光谱特性，无需改变滤光片及观察装置，在正常紫外光激发检测即可，集无毒性、高灵敏性和高稳定性等优点于一体，可以选择胶染法或泡染法进行染色，使用非常方便和灵活。

自备试剂：琼脂糖，TAE/TBE电泳缓冲液(WE0216S/WE0215S)

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、使用泡染法染色时，染料用量较多，单次使用的染色液可重复使用3次左右。3×染色液可以大量制备，在室温下避光保存。
2、如果总是看到条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关，请尝试：选择合适的琼脂糖浓度；选用更长的凝胶；延长凝胶时间以保证边缘清晰；减少DNA上样量(推荐上样量为50-200ng/泳道)。

操作步骤：
1、胶染法
向琼脂糖溶液中加入UltraStain(10000× in Water)至终浓度为1×(如琼脂糖溶液为50ml，则加入5μl染料)，并充分混匀。待凝胶凝固后，按照常规方法进行电泳和图像采集。
注意：由于UltraStain具有良好热稳定性，可以直接添加到热的琼脂糖溶液中而不需要等待溶液冷却。摇晃，振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将UltraStain加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中，然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。
2、泡染法
1)配置不含染料的琼脂糖凝胶， 按照常规方法进行电泳。
2)用H2O将UltraStain(10000× in Water)稀释约3,300倍到0.1M NaCl中，制成3×染色液，如将15μl UltraStain(10000× in Water)和5ml 1M NaCl加到45ml H2O中。
3)将凝胶小心地放入合适的容器中，缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶。室温振荡染色30 min左右，最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。按照常规方法进行图像采集。


图为Super DNA Ladder(货号：WE0243)在含有UltraStain染料的琼脂糖凝胶中的电泳图

储存条件：室温避光


北京土壤基因组提取试剂盒优惠促销关键词：土壤基因组提取试剂盒,Soil Genomic DNA Extraction Kit,WE0187

辛烷磺酸* Gum benzoin 5324-84-5
F030827 BIOTIN标记兔抗鸭IgY IgG抗体 Rabbit Anti-Duck IgY*BIOTIN
ARB11506 人脂蛋白脂酶(LPL)Elisa分析 Human lipoprotein lipase,lpl ELISA KIT
CYB161025 小鼠IgG(液体-pH7.2PBS)
BL0843 羊抗大鼠IgG纯化抗体
BTN120720 柱式冻存血液DNAOUT Column Frozen Blood DNAOUT
直链淀粉 Sodium DL-lactate 9005-82-7
1,3-二羟基丙*(代"酮") Lymphocyte separation medium 62147-49-3
ARB11219 人细胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)免费代测 Human cytokeRatin 18-m65,ck 18-m65ELISA KIT
D-葡萄糖-6-磷酸单*盐 Hematoxylin 54010-71-8
PY02-196  碱性琼脂  250克  
ARB10358 人心纳素(ANF)Elisa分析 Human atrial natriuretic factor,anf ELISA KIT
BL1376 20×SSC PH7.0
对硝基*(代"*")基-β-D-吡喃葡糖醛酸苷 2-Nitrobenzoic acid 10344-94-2
F030218 HRP标记兔抗猪IgG抗体 Rabbit Anti-Pig IgG*HRP
ARB12346 大鼠层连蛋白/板层素(LN)含量检测 Rat laminin,ln ELISA KIT
ARB13074 小鼠肿瘤标志物(CA724)含量分析 Mouse ca724 ELISA KIT
RN0901 EASYspin 植物RNA快速提取试剂盒
ARB14074 人腺病毒Ⅳ抗体(AdenovIrus Ⅳ-Ab)elisa检测说明书 
PY02-120  改良MC培养基  250克  

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