胰蛋白酶消化液（0.1% 用于抗原修复）

胰蛋白酶的提取

溶液用于测定激活前的蛋白含量及酶活性。原溶液中加入5mg结晶胰 蛋白酶 ，轻轻搅拌均匀，25℃放置2～4h，或4℃放置12～16h，使胰 蛋白酶 原活化。每隔1h取样测定胰蛋白酶活性增长情况，直至酶激活速度变慢或停止增长。一般比活可达到3 500～4 000 BAEE单位/mg。留取2mL溶液用于测定激活后的蛋白质含量和酶活性。激活酶溶液用2mol/L硫酸调pH至2.5～3.0，滤纸过滤，滤去硫酸钙沉淀，收集滤液，4℃保存备用。方法二称取冷冻猪胰脏100

免疫组化染色方法及常用抗原修复方法

、封片、镜检。 三、常用抗原修复方法 用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片：1、抗原热修复 可根据实验室的具体条件，选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液，如 TBS、PBS、重金属盐溶液等，但实验证明，以 0.01M 枸橼酸盐缓冲液（pH6.0）效果最好。请选用我公司提供的 ZLI-9064 枸橼酸盐缓冲液（粉剂）配制，取该粉剂一包溶于1000ml 的蒸馏水中，混匀，其 pH 值在 6.0 ± 0.1，如因蒸馏水本身造成的 pH 值偏差，请自行调整

抗原修复方法 Antigen Retrieval Methods

技术即可检测到特定抗原。 恢复表位免疫反应性的方法有很多种。即使是改变抗体稀释液的pH值或阳离子浓度这样简单的方法，也能影响抗体与其表位的亲和力。对于部分掩蔽的表位，在进行抗原修复之前，可以先尝试延长一抗的孵育时间。然而，这一步骤也需要进一步优化，包括合适的抗体浓度、孵育时间和温度。在讨论抗原修复方法时，通常将其分为两大类：蛋白酶诱导表位修复（PIER）和热诱导表位修复（HIER）。一旦优化，抗原修复的效果将非常显著。 蛋白酶诱导表位修复（PIER） 在PIER方法中，蛋白酶K、胰蛋白酶和胃