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- YOYOBIO
- 上海
- R40001
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
—20℃,12个月
- 库存：
大量供应
- 供应商：
上海研谨生物
- 规格：
125ml
0.25% Trypsin-EDTA (1X)
胰蛋白酶消化液货号：R40001 Size： 125ml
产品介绍
胰蛋白酶消化液，含有胰蛋白酶（0.25%）、EDTA 和酚红，不含有钙、镁离子。该产品经过严格的过滤除菌，适用于组织和单层细胞的分离。
| 货号 | 品牌/规格/主要参数 | 市场价 | 货期 | |
| R40001-125ml | 国产 | ￥140.00元 | 2-3天 |
操作步骤
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- 吸取培养基，用无菌的 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以除去残余的血清。
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- 加入适量的胰蛋白酶消化液，略盖过细胞即可。根据细胞的特性可以增加或减少胰酶用量，室温放置30秒至 2分钟。（不同的细胞消化时间有所不同）
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- 显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。
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- 此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。
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-20℃保存，冰袋运输，至少 1 年有效；
注意事项
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- 应根据不同组织和细胞的性质确定最佳消化时间和胰蛋白酶的用量，消化时间不宜过长，以免影响细胞的活力。
- 解冻后宜分装使用，避免反复冻融。
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文献和实验［原理］ 在动物胰脏中除了存在胰蛋白酶外，还有另外两种与胰蛋白酶性质相似的蛋白水解酶：胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶。在胰蛋白酶提取过程中，三者彼此很难分开。需采用合适的方法进一步分离纯化。 从动物胰脏中提取胰蛋白酶，一般是用稀酸将胰腺细胞中含有的胰蛋白酶原提取出来，然后根据等电点沉淀的原理将提取液的pH值调至酸性（pH3.0左右），使大量的酸性
样品：重组胰蛋白酶，比活 4500USP u/mg pro.，上海雅心生物技术有限公司，纯度如图 1 所示。BAEE，Sigma. 图 1. 重组胰蛋白酶的纯度的 SDS-PAGE 鉴定 1. 最适 pH 的研究 准备 pH 为 3~12 的底物 BAEE（0.25 mM），分别测定 rPT 纯酶液的活性，最后结果表示为测定数值占最高酶活的百分比。缓冲液成分依次为 25 mM NaAc-HAc (pH 3~6)，25 mM Tris-HCl (pH 7~8)，25
问：有人说白颜色胰蛋白酶的要比黄颜色的效果好，是吗？我近期买的胰蛋白酶倒是白颜色的，但是不能溶解在PBS中，呈细小的悬浮颗粒状，是GIBCO公司出产的。这会是什么原因呢？望各位师兄师姐回复。 答：以我们的经验确实是这样的，我们做过比较的是白颜色的比较好，究其原因我们认为是黄颜色的胰蛋白酶提纯不够，里面混有杂质所致。
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