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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输和-20℃保存、有效期一年。
- 保质期:
长期
- 英文名:
MMLV Reverse Transcriptase (RNase H-)
- 库存:
978
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")MMLV逆转录酶(无RNase H活性)厂家现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:MMLV逆转录酶(无RNase H活性)厂家现货
编号:BTN131209
产地:国产|进口
规格:1000U
英文名:MMLV Reverse Transcriptase (RNase H-)
品牌:百奥莱博
M-MLV逆转录酶(RNase H缺失),是RNA依赖的DNA聚合酶,可用于长mRNA(>5kb)为模板的cDNA合成。它是M-MLV 逆转录酶的一种类型,已经经过基因改造,去除了RNase H的活性。虽然许多研究者已经成功使用M-MLV RT(H+)进行了一些cDNA制备应用及分析,但是缺失了RNase H活性的逆转录酶为长cDNA的制备及包含高比例全长cDNA的文库制备提供了更好的选择。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
更多有关MMLV逆转录酶(无RNase H活性)厂家现货的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·链脲佐菌素溶液
编号:BTN120701
英文名称:Streptozotocin Solution
规格:10mL
本产品浓度为10mg/mL的链脲佐菌素溶液。链脲佐菌素,又称链脲菌素;N-(Methylnitrosocarbamoyl)-α-Dglucosamine;STZ),分子式:C8H15N3O7,分子量:265.22,CAS号:18883-66-4。链脲佐菌素是一种*基葡萄糖-亚硝基脲,是一种DNA烷基化试剂,能通过GLUT2葡萄糖转运蛋白(GLUT2 glucose trasport protein)独自进入细胞,可以对实验动物能产生糖尿病,用于建立糖尿病模型。STZ需要用柠檬酸和柠檬酸*配制而成的pH4.2缓冲液配制。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期6个月。
·海洋动物DNA提取试剂盒(柱式提取)
编号:BTN130401
英文名称:Marine animal DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在柱式动物DNA提取试剂盒(BTN71206)试剂盒基础上优化改良而得,专门针对海洋动物的基因组DNA提取的试剂盒,可用于鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物和水产动物的荃因组DNA提取,可以有效去除海洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。
产品特点:
1. 使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规分子生物学操作,如:酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等试验。
2. 操作简单安全,1小时内即可获得超纯的基因组DNA,纯化过程中不需要使用*酚*仿等有机试剂。
3. 应用广泛,适用于多种动物细胞和动物组织等。
4. 性价比高,质量和国外同类试剂盒相当,价格更低。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 蛋白酶K溶液(20mg/mL) | 1ml |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 13ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 15ml |
| 通用洗脱液 | 15ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要低温运输,-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
使用前请先在溶液C和通用洗柱液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
1. 切取不多于30mg的组织材料,放入装有200μL溶液A的离心管中,涡旋振荡15秒。注意:根据提取的组织不同,起始量也稍有不同,腮的细胞量较大,一般建议提取量不超过20mg。如果需要去除RNA,可加入40μL RNase A(10mg/mL)溶液(客户自备,BTN3160),振荡15秒,室温放置5分钟。
2. 加入20μL蛋白酶 K溶液(20mg/mL),涡旋混匀,简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃下放置,直至组织完全溶解,简短离心以去除管盖内壁的水珠,再进行下一步骤。注意:不同组织裂解时间不同,通常需0.5-2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全,虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次,每次振荡混匀15秒。
3. 加入200μl溶液B,充分颠倒混匀,70℃放置10分钟,溶液应变清亮,简短离心以去除管盖内壁的水珠。注意:加入溶液B时可能会产生白色沉淀,一般70℃放置时会消失,不会影响后续实验。如溶液未变清亮,说明细胞裂解不彻底,可能导致提取DNA 量少和提取出的DNA 不纯。
4. 加入200μl 无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀,简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个离心吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13,400×g)离心30秒,倒掉废液,将吸附柱放回收集管中。
6. 向离心吸附柱中加入500μl溶液C(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm(~13,400×g)离心30秒,倒掉废液,将吸附柱放入收集管中。
7. 向吸附柱中加入600μl 通用洗柱液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm(~13,400×g)离心30秒,倒掉废液,将吸附柱放入收集管中。
8. 重复操作步骤7。
9. 将吸附柱放回收集管中,12000rpm(~13,400×g)离心2分钟,倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
10. 将吸附柱转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μl 通用洗脱液,室温放置2-5分钟,12000rpm(~13,400×g)离心2分钟,将溶液收集到离心管中。注意:通用洗脱液的体积不应少于50μl,体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率,可将离心得到的溶液再加入吸附柱中,室温放置2分钟,12000rpm(~13,400×g)离心2分钟。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用超纯水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5 范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率;且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA 降解。
MMLV逆转录酶(无RNase H活性)厂家现货关键词:BTN131209,MMLV逆转录酶(无RNase H活性),MMLV Reverse Transcriptase (RNase H-)
·葡激酶
编号:BTN130875
英文名称:Staphylokinase
规格:100μL
葡激酶,又称金葡菌激酶或SAK,是从金黄色葡萄球菌中分离出来的一种能够特异性溶解血栓的酶类物质。葡激酶与血栓中的纤维蛋白有较高的亲和力,它能在血栓的部位与纤溶酶原结合,此结合物能够激活纤溶酶原转变为纤溶酶,从而溶解血栓。免疫原性较streptokinase强。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·内毒素清除试剂盒
编号:BTN160692
英文名称:Endotoxin removing Kit
规格:1.5mL
本试剂盒使用的是一类高效内毒素清除树脂,它以修饰过的多粘菌素B(PMB)为配体,进行特异性的内毒素清除。经此专用亲和介质纯化,样品最终的内毒素水平可低于0.1 EU/mL。
细菌内毒素(脂多糖,LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分。人们在研究革兰氏阴性菌血症和内毒素血症的过程中,发现细菌内毒素在其中起着关键的作用,内毒素使机体免疫功能严重受损,进一步的发展可能引发脓毒性休克,弥散性血管内凝血,急性呼吸窘迫综合症,全身炎症反应综合症或致命性多器官功能衰竭。因此,内毒素的清除对于人类疾病治疗的注射型药品、生物制品等都是必须的,尤其对于基因药物、蛋白药物、单抗克隆药物、治疗性疫苗、小分子化学药物等生物制品的下游纯化处理来说就显得非常重要。
试剂盒特点:
1.高稳定性,高去除效率。
2.高结合力:> 2000,000 EU/mL。
3. pH范围为5-10时,亲和介质对内毒素的清除率在92%以上;pH值在7-8时,清除效率最高。
4. 无需恒流泵即可调节流速。
5. 重复使用 5次不会改变柱子效果。
6. 使用方便,试剂盒中提供无热原缓冲液,无热原收集管及无热原枪头等。
7.适合纯化对象为蛋白,多肽,抗体,多糖等。
8.可耐受试剂:20% DMSO,20% 乙醇,20% 甘油;1 M 尿素,300mM咪唑; 0.05% 吐温-20,10mM DTT等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 专用亲和介质 | 1.5mL预装柱 |
| 再生缓冲液 | 125ml |
| 平衡缓冲液 | 125ml |
| 流速控制器 | 1个 |
| 无热原接收管 | 1 包(3 支/包) |
| 无热原枪头(1mL) | 2 包(6 支/包) |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.样品处理:样品的pH值和离子强度在内毒素去除的过程中起着重要作用。虽然结合内毒素的pH范围在6-9,但是7-8的pH范围是纯化的最佳范围。合适的离子浓度可以降低非特异性吸附,0.15-0.5 M NaCl的条件可以得到一个很好的去除效率和低的样品损失。所以,纯化之前可以使用处理过的*化*,0.1 M的*氧化*或0.1 M盐*(代"酸")来调节离子强度或pH值。
2.活化亲和介质:将预装柱置于铁架台,垂直固定,去除预装柱顶部的盖子,打开流速控制器,使保护液在重力作用下流干,加入5mL的(预冷)再生缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.25mL/min(或者10滴/min),待再生缓冲液流干,再加入5mL 再生缓冲液,再重复操作两次,确保体系保持无热原(即内毒素)存在。即使是第一次使用也必须进行这一步操作。这步操作大约需要60分钟完成。
3. 平衡亲和介质:活化完毕后,加入6mL的(预冷)平衡缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.5mL/min,流干平衡缓冲液,再按此操作重复两次。这步操作大约需要40分钟完成。
4.内毒素清除:将流速控制器关闭,使用无热原枪头将样品加入,打开控制器,控制流速不高于0.25mL/min,流出液体积达到1.5mL后,使用无热原接收管接受样品,样品流干后,再加入1.5mL-3.0mL的(预冷)平衡缓冲液淋洗,收集淋洗液。检测样品浓度及内毒素水平。
5. 再次使用:如果流出样品内毒素水平未能达到预期值,需要将预装柱重新再生,按照步骤1 重新再生,然后上样纯化。
6. 储存条件:如果预装柱用完后需要保存,先用10mL 平衡缓冲液平衡柱子,待平衡液流干,加入1.5mL的再生缓冲液(含0.02%的叠氮化*)。
MMLV逆转录酶(无RNase H活性)厂家现货关键词:BTN131209,MMLV逆转录酶(无RNase H活性),MMLV Reverse Transcriptase (RNase H-)
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文献和实验,可用于确定 cDNA 5'和3'末端的未知序列。通常,这些方法分别被称为 5' RACE和 3' RACE。 在 5'RACE中,任何长度的(甚至包括未到达mRNA 5'末端的)第一链 cDNA 都将具有添加序列(即同聚物尾部结构或接头),随后通过 PCR 进行扩增。为了最大化全长 cDNA 的合成,应选择具有最小 RNA 酶 H 活性、高持续合成能力和高热稳定性的逆转录酶。 在 3'RACE 中,全长 cDNA 并不重要,因为不会扩增 PCR 起始位点的上游序列。但是,最好选用可生成长 cDNA
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又称 RNA指导的 DNA聚合酶。是以 RNA为模板合成 DNA的酶。这种酶是 1970年美国科学家特明( H.M.Temin)和巴尔的摩( D.Baltimore)分别于动物致癌 RNA病毒中发现的,他们并因此获得 1975年度诺贝尔生理学或医学奖。当 RNA致癌病毒,如鸟类劳氏肉瘤病毒( Rous sar-coma virus)进入宿主细胞后,其逆转录酶先催化合成与病毒 RNA互补的 DNA单链,继而复制出双螺旋 DNA,并经另一种病毒酶的作用整合到宿主的染色
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