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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
228
- 英文名:
Heat labile Double-stranded DNA-specific Nuclease
- 保质期:
3年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
100U|1000U
特别提示:包括双链DNA特异性核酸酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:双链DNA特异性核酸酶
英文名称:Heat labile Double-stranded DNA-specific Nuclease
产品货号:MT0088
产品规格:100U|1000U
本制品是双链DNA特异性核酸酶。其特异性的识别降解双链DNA,对单链DNA或RNA几乎无活性,其降解dsDNA的能力比ssDNA高~5000倍。除此外,该双链DNA特异性核酸酶降解双链DNA的能力比bovine DNaseI高~30倍,因此特别适用于去除RNA样品中的基因组DNA污染。该热敏型双链DNA核酸酶可将DNA降解为2~8bp的产物,且55℃ 5分钟可使该酶不可逆失活,同时又能保持RNA和ssDNA的稳定性,因此产物无需再纯化,可直接用于后续反应。同时该酶与M-MLV和AMV的反应Buffer都是兼容的,可应用于反转录反应中去除样本中基因组DNA的污染,提高反转录效率。
产品组成:
| 组分 | 100U | 1000U |
| 热敏型dsDNase(2 U/μl) | 50μl | 500μl |
| 10×dsDNase Buffer | 1ml | 2ml |
保存条件:置于-20℃,可保存3年。
单位定义:1单位指在25℃标准反应条件下,每分钟OD260增加0.001(约每分钟消化1pmol核酸底物)所需的酶量。
使用注意事项:
1.1×dsDNase Buffer:20mM Tris-HCl pH8, 2mM MgCl2。该酶需要1~3mM MgCl2。
2.该酶对DTT敏感,任何反应体系中不得包含DTT。
3.通常在RT反应中的用量为0.1~0.5U/20μl体系。
4.任何浓度的SDS、盐酸胍、β-mercaptoethanol或高盐离子(>300mM)均抑制该酶活性。
5.该酶的最佳反应温度为25~37℃,42℃ 30分钟后活性损失70%。
别名:ezDNase;HL dsDNase
核酸酶选择指南:
| 货号 | 酶 | 消化活性 | 底物 | 产物 | 用途 |
| MT0068 | Benzonase核酸酶 | 核酸内切酶活性 | 任何形式的DNA/RNA | 3-5bp寡核苷酸 | 消化任何形式的核酸; 去除蛋白样品中的核酸污染。 |
| MT0084 | T5核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 单链和双链DNA | dNMP至6寡核聚体 | DNA消化和Gibson组装 |
| MT0085 | T7核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 双链DNA | ssDNA和二核苷酸 | 消化双链DNA |
| MT0086 | λ核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 单链和双链DNA | ssDNA和dNMP | 消化双链DNA |
| MT0087 | 核酸外切酶I | 3"-5"单链外切酶活性 | 单链DNA | dNMP、二核苷 | PCR扩增后降解消化引物 |
| MT0088 | 双链DNA特异性核酸酶 | 双链DNA核酸酶活性 | 双链DNA | 2-8bp寡核苷酸 | 去除RNA样品中的DNA污染。 |
| MT0089 | Rnase H | 核糖核酸内切酶活性 | 杂交到DNA链上的RNA | ssDNA和2-8bp的 5"磷酸寡核苷酸 |
除去杂交到poly(dT)上的mRNA poly(A); 在cDNA第二链合成时除去mRNA。 |
| MT0090 | Dnase I | 核酸内切酶活性 | 单链和双链DNA | 2-3bp寡核苷酸 | 蛋白样品中DNA的去除 |
| MT0091 | Rnase A | 核酸内切酶活性 | 单链RNA | 3"-核苷磷酸 | 质粒或基因组中RNA污染的去除 |
| MT0092 | DNA损伤修复酶 | 核酸外切酶活性 | DNA | DNA修复 |
我公司销售的双链DNA特异性核酸酶价格,双链特异性DNA酶,HL dsDNase,dsDNase,ezDNase,双链DNase,双链DNA酶质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验部位 2、SYBR Green 只有和双链DNA结合后才发荧光 3、变性时,DNA双链分开,无荧光 4、复性和延伸时,形成双链DNA, SYBR Green 发荧光,在此阶段采集荧光信号。 PCR反应体系的建立及优化: 1、SYBR Green 使用浓度:太高抑制Taq酶活性,太低,荧光信号太弱,不易检测 2、Primer:引物的特异性高,否则扩增有杂带,定量不准 3、MgCl2的浓度:可以降低到1.5mM,以减少非特异性产物 4、反应Buffer
基因沉默的时效性和遗漏,尤其在多基因家族中的非特异性问题尚未得到解决。 目前RNAi 机制尚未完全阐明,因此需要更加深入的研究。 还有 ZFNs技术和TALEN技术 ZFNs(锌指核糖核酸酶)是由一个DNA识别域和一个非特异性核酸内切酶构成。DNA 识别域是由3-6个Cys2-His2锌指蛋白(zinc-fingers)串联组成,每个锌指蛋白识别并结合一个特异的三联体碱基,形成α-β-β二级结构。其中α螺旋的16氨基酸残基决定锌
。但是当Berk和Sharp进行研究时,还没有可靠的方式去除其互补部分的单链DNA。链分离凝胶电泳是那时惟一可行的方式,但它始终是一种技巧 性很强、难于掌握的技术。只有70%的DNA片段可以得到分离,而且即使在相当成功的条件下,样品中也不可避免的污染互补DNA单链。直到20世纪80年代后期,通过制造有高度特异活性的标记单链DNA或RNA探针才解决了这一问题。 S1核酸酶保护试验中使用的探针 通常是由双链DNA两条链分离得到的,已知极性且特异性高。或者更普遍地,从头合成与双链DNA模板的一条链
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