一站式RNA电泳套装品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")一站式RNA电泳套装品牌，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：一站式RNA电泳套装品牌
规格：10次
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：One-Stop RNA Electrophoresis Pack
本品是包括琼脂糖、去离子甲醛、RNA上样液、电泳液等在内的RNA电泳套装，专门用于RNA电泳分析。可以进行至少10次mini变性胶电泳。

产品特点：
1. 即开即用，用户不需要自己进行RNase 灭活、高压灭菌、pH调节等操作。
2.与Northern杂交等后续反应兼容。

产品组成：

 

成分	规格
琼脂糖	5g
超纯水	250ml
甲醛	60ml
RNAload(含EB)	0.5ml
RNAep，10×	100ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，但收到货后RNAload 需要4℃保存，RNAep，10×一旦打开需要-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
注意：所有器皿(三角瓶，电泳槽，枪头等)均需去除RNase。强烈推荐使用本公司的超强无毒的固相RNase 清除剂。

一、配制琼脂糖甲醛变性胶(1.2%，100mL)
1.在三角瓶中加入下列成份：琼脂糖 1.2-1.5g；DEPC水 87mL
2. 将琼脂糖加热融化后，加入10mL 10×RNAep(10×RNAep 就是10×MOPS缓冲液，其瓶子一旦打开，就很容易产生污染细菌，细菌大量繁殖后会释放大量 RNase，所以剩下的10×RNAep 最好-20℃放置)。
3. 待胶冷却至 60℃左右，再加下列成份：甲醛 3.0mL；自备EB(10mg/mL)2-4μL
注意：由于本试剂盒提供的RNAload中含EB，所以也可以不加EB，但效果较差。如果使用自备的其他染料，如SYBR Green I，则不能同时使用其他染料，包括含EB的RNAload，用户需要另购不含EB的RNAload)。
4. 混匀后倒胶，凝固半小时后即可以使用。

二、配制电泳液
5. 将RNAep 用DEPC 水稀释十倍后即成电泳液，所需要的体积根据使用的电泳槽决定。

三、变性RNA样品
6.在一干净的离心管中将5-10μL RNA和15μL RNAload 混合，50-60℃保温10分钟后冰浴5-10分钟，直接上样。注意：每一泳道至多可分析30μg RNA，通常用10-20μg 总RNA进行Northern杂交，可以检测高丰度mRNA(占mRNA 总量的0.1%以上)；如待测RNA含量极微，每个泳道需加0.5-3.0μg poly(A)+ RNA。

四、电泳
7.电泳时，将凝胶预电泳5 min(电压为5 V/cm)。随后加样品和分子量对照(如果有的话)，以3－4 V/cm的电压电泳，直至染料迁移至胶下游的3/4处。
8.电泳结束后，在300nm 紫外灯下拍照。

五、后续处理
9. 按标准方法进行Northern杂交等后续处理。

使用效果：

图注: 用本产品电泳兔全血总RNA效果图。10μL 总RNA与15μL RNAload 混合后在甲醛琼脂糖变性胶上电泳0.5小时，直接在紫外灯下观察并照相。

疑难解答：
Q：RNA电泳为何最好使用RNAep，不要使用DNA电泳液TAE或TBE？
A：一是因为RNAep 经过去RNase处理，而一般实验室使用的TAE或TBE都没有经过去RNase处理，故极有可能含RNase，使样品RNA 降解。即使要灭活TAE或TBE中的RNase 也十分麻烦，因为DEPC 不能处理含Tirs的缓冲液；二是TEB含有硼*(代"酸")，硼*(代"酸")是研究多羟基醇和糖的经典试剂，它能与RNA中含多羟基的核糖反应生成糖硼*(代"酸")络合物，故电泳时RNA 带型十分弥散。在一定浓度范围内，RNA分子间还能通过硼*(代"酸")形成分子间复合物，出现电泳时各种RNA以一条带的形式出现的现象。所以RNA电泳时要避免使用含硼*(代"酸")的缓冲液。使用TAE效果虽然比TBE 稍好，但文献报道(BioTechniques 2000，28:414-415)，它不能分离某些大小不同的RNA分子。
Q：上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶，也必须在上样前使RNA变性。
使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时，可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2，最好不要使用TBE缓冲液，因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物，RNA 很难形成锐利的条带。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA去除剂DNAScavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。
Q：为何我的植物RNA样品有4-5 条带？
A：部分植物组织有叶绿体等质体，而叶绿体有核糖体，所以也有其rRNA。
叶绿体的rRNA跟细胞浆里面核糖体的rRNA大小不同，所以一般会多出两条带(共4 条rRNA 条带)。小的tRNA和5S rRNA 有时可见，有时不可见，取决于回收效率。

一站式RNA电泳套装品牌正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·TBE电泳液，10×
编号：BTN90313
英文名称：10×TBE Buffer
规格：250mL
TBE Buffer全名为Tris-Borate-EDTA buffer。它主要用于DNA的琼脂糖电泳和DNA和RNA的PAGE电泳。跟TAE相比，其特点是含硼*(代"酸")，可能会影响连接等后续酶反应。硅胶模回收时，回收率比TAE低。缓冲能力强于TAE，可反复使用几次。PAGE电泳最好使用1×，琼脂糖电泳可以使用0.5×。线性双链DNA的泳动速度慢于TAE。最好不要使用含甘油的上样品液，因为甘油可使硼*(代"酸")多次解离，改变pH。

储存条件：常温运输及保存、有效期一年。长时间放置可能会出现沉淀。

·Baker甲醛*中性固定液
编号：BTN131276
英文名称：Baker Fixative Solution
规格：250mL
本产品主要成分为中性甲醛水溶液和10%*化*。本固定液为组织和细胞化学技术中最常用的固定液之一，适合各种染色方法。本产品固定时间2～4小时，温度0～4℃。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·1M Tris-HCl(pH8.0)(DNA级)
编号：BTN101206
英文名称：Baker Fixative Solution
规格：250mL
本产品主要成分为中性甲醛水溶液和10%*化*。本固定液为组织和细胞化学技术中最常用的固定液之一，适合各种染色方法。本产品固定时间2～4小时，温度0～4℃。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·植物叶绿体蛋白提取试剂盒
编号：BTN130887
英文名称：Plant Chloroplast Protein Extraction Kit
规格：15次
本试剂盒是结合植物叶绿体纯化试剂盒和细菌蛋白质提取试剂盒而推出的新兴产品，专门用于植物叶绿体蛋白的快速提取。

产品特点：
1. 即用型试剂盒，用户不需要单独配制各种溶液。
2. 本产品足够15次提取，每次可处理30g叶片。
3. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、免疫印迹分析、蛋白活性测定和BCA法及Lowry法蛋白定量(不适用于Bradford法)。
4. 已经成功用于菠菜、大豆、莴笋、白菜、烟草和甜菜等植物，还可用于更多植物(可能需要优化条件)。

试剂盒组成：

成份	规格
匀浆液成分一	250mL×2
匀浆液成分二(干粉)	3g
Percoll	60mL
带柄尼龙滤膜	1个
植物叶绿体纯化试剂盒	15次
溶液A	15mL
溶液B	1.5mL
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，保存期限一年。

使用方法：
注意：叶绿体对温度高度敏感，所以整个操作必须在冰上或者在冷室进行，所用器皿和溶液均需要在4℃预冷。离心时一定要在4℃进行，离心力以g而不是rpm计算。如果需要研究叶绿体的功能，提取还需要在昏暗的光线条件下进行。

一：叶绿体的纯化
1. 实验前1-2天将植物放在暗室培养以减少叶绿体中淀粉颗粒的形成，否则离心时这些颗粒很容易使叶绿体破裂。叶片在实验前需先用自来水洗净，再用蒸馏水淋洗，去掉多余水分。如果叶片采集后不能立即处理，则保存时需要保持叶片湿润，即使如此，叶片的放置时间也不能超过一天。
2. 新鲜(实验当天)制备匀浆液：将自备的去离子水与匀浆液成分一按4：1的比例混合，然后在混合液中加入匀浆液成分二干粉到终浓度0.1%(每100mL中加入0.1 g干粉)，摇晃溶解后所得溶液即为匀浆液，冰上预冷待用。一次实验(从30 g叶片提取叶绿体)所需要的匀浆液体积跟材料不同而不同。
3. 新鲜采集植物叶片，快速去除叶脉并将叶片剪成1-3 cm2大小的碎片并浸泡在适量的预冷的匀浆液中(每克叶片加4mL匀浆液，但对烟草和大豆，每克叶片需要加6mL匀浆液)。
4. 将浸泡了叶片的匀浆液转移到Waring匀浆机(即家用制备果汁的匀浆机)中，低速匀浆10秒，避免起泡沫。用玻璃棒把液面的碎片按入匀浆机底部后，再低速匀浆10秒。注意：除Waring匀浆机外，还可以选择Dounce玻璃匀浆器，Polytron匀浆机和研磨(加玻璃珠)等裂解细胞的方法，但这些方法的单次处理量都比较小，需分成很多小份单独匀浆，然后再汇集。
5. 用带柄尼龙滤膜过滤匀浆液，可先将滤液收集到预冷的200mL量筒中，再等分到4个预冷的50mL的塑料离心管中(每个管中的滤液不要超过35mL)。带柄尼龙滤膜后可反复使用。
6.在水平转子离心机上4℃ 200 g离心3分钟(对菠菜，白菜和莴笋材料)或400 g离心1分钟(对甜菜材料)，白色沉淀为未破裂的细胞或细胞核。
7. 将上清液(含叶绿体)转移到一个新的、预冷的50mL塑料离心管中。
8.在水平转子离心机上4℃ 1000 g离心7分钟，小心弃上清，沉淀含叶绿体，呈浅绿色。
9.在沉淀中加入1.5mL预冷的匀浆液，手弹离心管底部使叶绿体重悬。注意：重悬时最好避免溶液起泡，也不要用枪头吹打，否则叶绿体容易破裂。沉淀下有白色淀粉属于正常现象，但重悬叶绿体时避免将白色淀粉重悬。
10. 将4管叶绿体重悬液汇集(共约6mL)，得到叶绿体粗提液，可直接用于后续的SDS-PAGE，Western，ELISA和蛋白组分析。
11. 如果需要以之为材料精提叶绿体，就需要用密度梯度离心法将完整的叶绿体和其他污染物进一步分离。具体操作步骤是：在50mL塑料离心管中先加入6mL匀浆液成分一和4mL Percoll，充分混合均匀。在其液面上小心铺上叶绿体粗提液。在水平转子离心机上4℃ 1000 g离心8分钟，管底绿色沉淀为完整的叶绿体。小心将上清倒出后，用于叶绿体蛋白提取。

二：叶绿体蛋白质的提取
12. 将1mL的溶液A和100μL溶液B加入到叶绿体沉淀(约15mg湿重)中，吹打混匀。
13. 冰上放置30分钟至1小时至溶液变清。
14. 4℃ 1,2000 g离心1分钟。
15. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分样品到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×)，在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。


一站式RNA电泳套装品牌关键词：一站式RNA电泳套装,One-Stop RNA Electrophoresis Pack,BTN60904


·棉蓝乳酚油染色液
编号：BTN150802
英文名称：Lactic Acid Phenol Cotton Blue Staining Solution
规格：250mL
霉菌是形成分枝菌丝的真菌的统称，意即“发霉的真菌”，它们往往能形成分枝繁茂的菌丝体，但又不象蘑菇那样产生大型的子实体。霉菌菌丝较粗大、孢子容易在空气中飘散，所以制标本时常用棉蓝乳酚油染色液。

棉蓝乳酚油染色液特点：细胞不变形，具有杀菌，且不易干燥，能保持较长时间，是霉菌菌丝、孢子的形态常分类的重要依据。

储存条件：常温运输，避光保存，有效期一年。

使用方法：
1．涂片：载玻片编号，于载玻片中央滴加2~3滴棉蓝乳酚油染色液。
2．用灭菌接种环或牙签等器具取一小块有颗粒或颜色部分真菌菌落。
3．放入载玻片上的棉蓝乳酚油染色液中，混匀。
4．加盖洁净的盖玻片，轻轻按压制成压片。
5．光学显微镜在低倍、高倍或油镜下观察真菌形态。
6．染色结果：真菌(尤其是烟曲霉菌)中孢子与菌丝是呈蓝色的，背景为淡蓝色。待检细菌培养时间会影响染色，菌落培养时间过长或已死亡或细菌溶解，染色结果都常呈阴性反应。


一站式RNA电泳套装品牌关键词：一站式RNA电泳套装,One-Stop RNA Electrophoresis Pack,BTN60904


·Karnovsky固定液
编号：BTN131226
英文名称：Karvovsky Fixative Solution
规格：250mL
Karnovsky固定液是组织化学中最常用的混合型固定液之一，主要成分含能快速渗透的多聚甲醛和缓慢渗透的戊二醛。它能很好保存组织的抗原性和精细结构，故尤其适用于电镜免疫化学样品的固定。本产品是在Karnovsky原始配方的基础上修改而得。

产品特点：
1．既可用于灌注法固定，也可用于浸泡法固定。
2．渗透能力强，固定均匀，组织收缩小，染色效果好。
3．适用范围广，可以用于固定从细菌、真菌，植物到动物的各种生物材料。
4．对原始配方进行了改良，不使用有毒的含砷化合物，减少了对操作者的毒害。
5．固定的组织经过包埋切片等处理用既可用于光学显微镜检测，也可用于电子显微镜检测。

储存条件：低温运输、4℃保存，保存期为1年。

使用方法：
1．对动物，最好先灌注固定，然后再浸泡固定10-30分钟。对植物、真菌、细菌、病毒、原虫等材料，直接采用浸泡法固定。浸泡在Karnovsky 固定液中的材料可以在4℃放置5年。
2．固定后的组织洗涤后即可用于包埋、切片、染色、检测等后续操作。

北京百莱博科技有限公司专业生产核酸电泳和回收产品，欢迎来电咨询选购一站式RNA电泳套装品牌。