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        无以伦比的高效化合物全自动存取解决方案之三:大规模的DNA库和转化医学的研究结合

        互联网

        2778
        作者:Cara Sutcliffe M.S. • Jill Pulley M.B.A. • Janey Wang M.S. • Brandon Martin • Dan Masys M.D. • Dan Roden M.D. Vanderbilt University School of Medicine, Nashville, TN 37232

        摘要

        实验目的:个性化医疗的愿景是通过定制预防方案、进行个性化诊断和个性化治疗等方法,改变医疗护理的现有方式。

        大规模的、可分类的生物样品库可提供大量研究所必须的临床和遗传信息,是实现个性化医疗的先决条件。Vanderbilt DNA数据库项目建议通过整理废弃样本的DNA信息和关联相关的临床数据,同时生成临床的和遗传的这两类信息

        实验方法:储存系统的设计是这个过程的关键组成部分,要求有稳健的后台、样品追踪方法和综合的质量控制步骤。我们的储存系统的主要用途是:验证样本适用于数据库,识别、提取、储存和控制DNA的分布。

        实验结果:储存系统在每一个关键功能模块中都进行自动化整合和批量处理,这大大减少了实验误操作的风险和大大提高了实验通量。储存系统的初步功能都已经通过测试并在正常条件下运行。

        结论:需要进一步进行样本存活条件下的测试。

        一、获取样本

        • 利用日常临床护理时收集的血液样本。相关样本处理流程:

        1. 储存在Central Receiving Lab的架子上(-4°C)

        2. EDTA管子上的条码关联Central Receiving Lab的一个ID

        3. 丢弃样本(72+小时后)

        • 样本收集量非常大(~1000/工作日,500/周末和假期)

        1. 每个工作日早上由DNA Resources Core收集

        2. 用手推车运送到DNA Resources Core

        3. 质量控制-检测样本管的以下现象:
        • 结块

        • 破损的样本

        • 交叉污染

        • 丢失标签或无法读取条码

        • 体积不足(现有protocol下<1ml)

        出现这些现象的管子将被丢弃(~10%)

        二、样本可用性检测和分类

        1. 每一个管子上的Central Receiving Sample ID条码都被扫描,无需人工读取这些标签。

        2. 样本可用性检测程序以条码ID与Central Receiving Database相关联,可在Medical Record Number中检索。

        3. 利用 Medical Record Number,样本可用性检测程序可确定样本是否适合进入数据库。程序会确认样本的以下条件:

        a. 一份已签署同意处理自身样本的协议

        b. 并非从一个已退出项目的病人身上获得的

        c. 从成年人身上获得的

        d. 有医疗记录

        4. 样本以SHA512方式加密,并与一个6位数字的位置代码相关联。

        ~undefined不可能从加密代码中确获得Medical Record Number,可确保病人隐私~K~Hdiv~M~Kp~M~K~Hp~M~Kdiv~M5._程序可检测样本是否重复或者该随机丢弃(Randomly Excluded)。

        6. 预提取加工过程中,6位数字的位置代码标签会自动打印。

        三、DNA的提取和储存

        1. 利用Autopure LS from [Gentra Systems] 可进行DNA批量提取,记录所有信息,可与LIMS结合。

        2. 每个样本可用fluorometric Hoescht assay进行定量,数据会自动地上传到LIMS。

        3. 人类大分子量的DNA可利用凝胶成像确认。

        4. 样本储存在一个自动化的可检索的系统中。

        5. 所有血液样本在这个过程中被消耗。

        无以伦比的高效化合物全自动存取解决方案之三:大规模的DNA库和转化医学的研究结合

        四、样本检索和分配

        无以伦比的高效化合物全自动存取解决方案之三:大规模的DNA库和转化医学的研究结合

        1. 提交符合一定标准的样本的提取请求。

        2. 请求到达自动化储存系统和检索系统。

        3. 样本被检索。

        4. 机械的液体处理设备将stock plate中的部分DNA转移到384孔板,96孔板或者管子中,用于终点分析和下游检测。

        5. 提交请求的用户信息,DNA的消耗量,检索日期都会被自动记录。

        6. 储存系统中剩余的DNA量和可被提取的DNA量等信息会被更新。

        7. 大小合适的遗传信息会与可识别的医疗记录相关联,用于研究基因组与表型的相关性。另外这些数据会发送给具有已被批准的protocol和已签署协议的研究者。

        无以伦比的高效化合物全自动存取解决方案之三:大规模的DNA库和转化医学的研究结合

        五、数据的重新整合

        • 研究者的研究结果,包括但不限于样本的基因型数据,会依次重新整合到数据库中。

        无以伦比的高效化合物全自动存取解决方案之三:大规模的DNA库和转化医学的研究结合

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        2010年9月,腾泉通过收购上海丰泉生物科技公司,建立了从试剂到耗材的SPM一站式采购供应服务。此外腾泉还是众多国外知名试剂和耗材品牌的独家或一级经销商,如Hampton Research、Molecular Dimensions、Emerald BioSystems、Expression Systems、Microlytic、Anatrace和法国cisbio的HTRF试剂盒。我们的服务宗旨是:一点一滴、持之以恒,成为您身边最用心的供应商。

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