CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒北京厂家

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CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒北京厂家的品牌：百奥莱博，是优质的细胞及免疫学产品，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒等细胞及免疫学产品请联系我司咨询订购。

名称：CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒
编号：BTN121205
英文名：Cell Counting Kit-8
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
本CCK-8试剂盒是基于WTS-8的第二代细胞增殖及毒性检测产品，主要成分为水溶性四唑盐WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝*基)-3-(4-硝*基)-5-(2,4-二磺基*)-2H-四唑单*盐，WST-8为一种MTT类似物，在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下能够被还原成橙黄色水溶性的甲臜(formazan)。生成的甲臜量与活细胞数量成线性相关。

产品特点：
1．溶液稳定，对细胞无毒性，可直接同步加入到细胞样品中长时间孵育，可以多次测定选取最佳测定时间。
2．灵敏度高，实验的灵敏度比其它如MTT，XTT或MTS高，操作简便、快捷，实验结果重复性好。
3．水溶性，免去后续的溶解步骤。
4．不需要换液，尤其适合于悬浮细胞。
5．安全无毒，不会对操作人员身体造成危害。
6．可以广泛应用于生物活性因子的活性检测、药物的筛选、细胞增殖检测、细胞毒性。

储存条件：常温运输和4 ℃干燥避光保存，有效期一年。

使用方法：

一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时测定细胞具体数量时)
1．先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。
2．按比例(例如：1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。
3．接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加 CCK 试剂培养一定时间后测定OD值，制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴)，OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间)。

二、细胞活性检测
1．在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板在培养箱中预培养24小时(37℃,5% CO2)。
2．每孔加入10μL的CCK溶液。
3．将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4．用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5．如果暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl溶液或者 1%w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

三、细胞增殖-毒性检测
1．在96孔板中配置 100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃，5%CO2)。
2．向培养板中加入10μL不同浓度的待测物质。
3．将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如：6、12、24或48小时)。
4．向每孔加入10μL CCK溶液。
5．将培养板在培养箱内孵育 1-4小时。
6．用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
7．如果暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl溶液或者1%w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

注意事项：
1．如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基)，去掉药物影响。如果药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
2．用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡，否则会干扰测定。
3．建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。
4．有条件的情况下建议采用多通道移液器，可以减少平行孔间的差异。加入CCK试剂时，建议斜贴着培养板壁加，不要插到培养基液面下加，容易产生气泡，会干扰OD 值读数。
5．白细胞可能需要培养较长时间。
6．当使用标准 96孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为1000个/孔(100μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2500个/孔(100μL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液。
7．如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片，但是450nm滤光片的检测灵敏度最高。
8．培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。

结果分析：
细胞活力*(％)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)]×100
A(加药)：具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白)：具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0加药)：具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
*细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力
关键词：Cell Counting Kit-8,BTN121205,CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒


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BTN70503Z	DNA marker(300-10000bp)
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BTN60402	超快非醇核酸沉淀剂
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