柱式植物RNA大量提取试剂盒特价促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")柱式植物RNA大量提取试剂盒特价促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：柱式植物RNA大量提取试剂盒特价促销
品牌：百奥莱博
编号：BTN80903
规格：5次
产地：国产|进口
英文名：Plant RNA Column large-scale extraction kit
本试剂盒是柱式植物RNA提取试剂盒(BTN71203)的大提升级产品，它结合了植物RNA提取试剂盒的高效性(其效果在近五十多种各类植物中得到验证，植物名单见植物RNA提取试剂盒产品介绍的附录)和柱式纯化系列产品的快捷性。

试剂盒特点：
1.样品处理量大，一次可以处理5g的植物材料。
2. 操作简单快速，处理一个样品只需要约二十分钟。
3. RNA 纯度更高，平均OD260/280一般都在2.0左右，能够有效去除大多数植物中的多糖污染。
4.产量高(具体根据材料不同而不同)。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B	30ml
溶液C	100ml
大提离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
RNA洗脱液	5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 估算组织细胞的用量。每次大量提取一般需要3-5g植物叶片、或1-3g植物种子、或5-10g植物果实。
2. 先将新鲜植物组织剪切成小块(保存在RNAhold中的植物组织需用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块)，放入50mL塑料离心管中，加入20mL溶液A，然后用匀浆器匀浆。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎植物组织，但为避免氧化，砚磨时必须将组织浸泡在溶液A中进行，不能只在液氮中砚磨，然后再将砚磨物转移至干净的50mL塑料离心管中。注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3.在离心管中加入5mL的溶液B和5mL自备*仿，在振荡器上充分振荡1-3分钟，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
4.室温12000～15000g离心3～5分钟，水相和有机相之间将有较厚的细胞破碎物。
5. 将上清液转移到另一干净的50mL塑料离心管中。下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。最好留下少量上清液不取。
6. 加入等体积的溶液C，充分颠倒混匀。
7. 将一半的溶液转移到大提离心吸附柱中，13000-15000g室温离心3～5分钟，弃穿透液。
8. 将剩下的一半溶液转移到同一大提离心吸附柱中，13000-15000g室温离心3～5分钟，弃穿透液。
9. 加10mL 通用洗柱液，室温离心3～5分钟，弃穿透液。
10. 重复上步一次，加10mL 通用洗柱液，室温离心3～5分钟，弃穿透液。
11.室温离心1-3分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
12. 将大提离心吸附柱转移到一个自备的RNase-free 收集管中，加入0.5mLRNA 洗脱液，室温放置1-2分钟。
13. 13000-15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品。
14. 再加入0.5mL RNA 洗脱液，重复上面两步一次。
15. 将两次洗脱得到的RNA 立即使用或存放于-80℃待用
16. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
17. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
18. RNA 纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

想要了解更多关于柱式植物RNA大量提取试剂盒特价促销的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：

·20×SSPE(pH7.4)
编号：BTN100809
规格：250mL

·超快蛋白银染试剂盒
编号：BTN100810
英文名称：Rapid Silver Stain for Protein
规格：1000mL
核酸银染的原理是银离子(Ag+)可与蛋白质等大分子有机物形成稳定的复合物，然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银颗粒，可把蛋白电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳染色，其灵敏度比考马斯亮蓝高100倍。但常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等步骤组成，操作十分繁琐，尤其不适用于大批量实验。为解决此问题，本公司推出本产品。

产品特点：
1．超快，整个过程只需要不到60分钟。
2．操作简单，只有固定(30分钟)、染色(10分钟)和显影(10分钟)三步。
3．灵敏度比考马斯亮蓝染色高100倍，能检测到10ng的蛋白质条带。
4．三个成分中的两个都是现用现配，可重复性好。

产品组成：

成分	规格
溶液A组分一(干粉)	2g
溶液A组分二，10×	100ml
溶液A组分三，10×	100ml
溶液B组分一，10×	100ml
溶液B组分二	5ml
说明书	1份

注：1000mL规格指可配制的溶液A(染色液)的体积，实际使用次数根据PAGE胶大小不同而不同。

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

自备试剂：去离子水，乙醇和乙酸。

使用方法：

一、配制银染固定液 100mL(对mini PAGE胶)
将40mL 无水乙醇、10mL 乙酸和50mL去离子水充分混合即可使用。

二、配制溶液A
需要配制的溶液A(染色液)的体积完全跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。下面的用量是针对配制100mL溶液A。如果配制的溶液A的体积不是100mL，则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。溶液A需要新鲜配制。

成分	用量
去离子水	80ml
溶液A成分一	0.2g
溶液A成分二	10ml
溶液A组分三	10ml

三、配制溶液B
需要配制的溶液B(显色液)的体积完全跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。下面的用量是针对配制100mL溶液B。如果配制的溶液B的体积不是100mL，则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。溶液B需要新鲜配制。

成分	用量
去离子水	89.5ml
溶液B成分一	10ml
溶液B组分二	0.5ml

四、银染
1．PAGE电泳或SDS-PAGE电泳结束后，将胶转移到装有100mL银染固定液的瓷盘中，摇晃30分钟以去除干扰银染的成分(如甘*酸、SDS、DTT、甘油等)。注：此步很重要，否则银染背景很高。
2．用100mL去离子水漂洗2次，每次2分钟。
3．将PAGE胶转移到适当体积的溶液A中，使溶液A在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃处理10分钟。
4．倒掉溶液A，用100mL去离子水快速漂洗2次，每次半分钟。
5．将PAGE胶转移到适当体积的溶液B中，使溶液B在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃直到蛋白电泳条带显现(一般需要10分钟左右)。
6．迅速将PAGE胶置于适当背景下照相留存。胶的颜色肯能会逐渐加深，如果有必要保存胶，可以用自备的5%的乙酸终止显色。


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·*酚蓝溶液(电泳级)
编号：BTN100882
英文名称：Bromophenol Blue Solution
规格：10mL
*酚蓝分子式为C19H10Br4O5S，分子量为669.97，CAS号为115-39-9。易溶于*氧化*溶液，溶于甲醇、乙醇和*酚，是一种pH指示剂，在pH3.0(黄)~4.6(蓝紫)范围，颜色由黄变蓝。本产是*酚蓝的1%水溶液，用作制备常用做电泳指示染料，其泳动率在0.5-1.4%琼脂糖中，相当于300bp dsDNA，在8% PAGE变性胶中相当于20bp dsDNA。如果含*酚蓝的上样液跟样品混合后变黄，则表示样品中酸性物质没去除干净，必须用1M Tris pH8.8调到*酚蓝呈蓝色，否则蛋白将向相反方向移动。

储存条件：常温运输及避光干燥保存，有效期一年。

·Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH8.0)(不含RNase)
编号：BTN70607
英文名称：RNase-Free Tris-HCl Solution
规格：250mL
*酚蓝分子式为C19H10Br4O5S，分子量为669.97，CAS号为115-39-9。易溶于*氧化*溶液，溶于甲醇、乙醇和*酚，是一种pH指示剂，在pH3.0(黄)~4.6(蓝紫)范围，颜色由黄变蓝。本产是*酚蓝的1%水溶液，用作制备常用做电泳指示染料，其泳动率在0.5-1.4%琼脂糖中，相当于300bp dsDNA，在8% PAGE变性胶中相当于20bp dsDNA。如果含*酚蓝的上样液跟样品混合后变黄，则表示样品中酸性物质没去除干净，必须用1M Tris pH8.8调到*酚蓝呈蓝色，否则蛋白将向相反方向移动。

储存条件：常温运输及避光干燥保存，有效期一年。

·IPTG溶液
编号：BTN80909
英文名称：IPTG Solution
规格：1.5mL
本产品为浓度为200mg/mL的无色液体。IPTG是β-半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性，当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ基因载体DNA)以lacZ缺失细胞为宿主进行转化时，或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X-Gal和IPTG，由于β-半乳糖苷酶的α-互补性，可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。


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·即用型高保真PCR试剂盒
编号：BTN90708
英文名称：Instant HiFi PCR MasterMix
规格：1.5mL
本产品是即用型的2×高保真PCR预配反应液，含有除引物、模板以外的所有PCR试剂，包括Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等，特别适合于高保真PCR反应。

产品特点：
1. Pfu DNA聚合酶是使用最广泛的高保真酶，其保真度为普通Taq酶的10倍。
2. 使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，非常方便，简化了PCR的准备工作。
3. PCR反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配置。由于加样过程少，有利于减少污染，降低实验误差。
4. 本产品A型含电泳染料，PCR反应液可直接上样电泳，进一步简化了操作。
5. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化，反应的灵敏度高，特异性强。
6.适用于基因的高保真扩增和基因定点突变等实验，得到的PCR产物可用于平末端克隆。

储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期限为12个月。

使用方法：
将本产品与用户自备的模板，引物混合液按下列推荐使用量(30μL反应体系)加入PCR 管中即可进行PCR，反应结束后直接取5-15μL电泳检查扩增结果。如果反应体系不是30μL，各成分需要按比例增加或减少。

试剂		加入量
2×高保真PCR MagicMix		25μL
DNA模板(自备)	哺乳动物基因组DNA	0.5-1μg
	酵母基因组DNA	5-500ng
	细菌基因组DNA	0.5-50ng
	质粒DNA	5-500ng
	PCR回收片段	1-100pg
PCR引物(自备)		10-20pmol each
补水到		30μL

参考扩增条件：

预变性	94℃	4min
PCR(30个循环)	94℃	30s
	50℃	30s
	68℃	0.5kb/min
延伸	68℃	10min

注意事项：
1. 本产品的Pfu DNA聚合酶比Taq DNA聚合酶的延伸反应速率低，因此我们推荐的扩增延伸反应时间为每kb 需2 分种。
2. Pfu酶3´-5´外切酶活性可降解引物，所以强烈建议在冰上配置完成PCR反应液后，立即放入PCR 仪中进行扩增，扩增完毕后立即进行电泳检测。
3. 本产品扩增产物为平末端，不可以直接进行TA 克隆，可以使用ClionB载体(BTN51104)进行克隆。如需要进行TA克隆，建议对PCR产物纯化后，用加A 试剂盒(BTN60105)加A后再进行TA克隆。
4. 由于Pfu 无 5´到 3´外切酶的活性，所以本试剂盒不能用于实时荧光PCR。

疑难解答：
Q：为何Pfu DNA Polymerase扩增效率不如Taq DNA Polymerase？
A：一是由于Pfu DNA Polymerase 具有3´-5´的外切活性，所以在合成过程中，该酶会随时校对新添加的核苷酸是否配对，影响了合成效率；二是它能通过3´-5´的外切活性使引物部分降解，降低引物结合模板的能力，进而影响扩增效率。三是上面提到的尿嘧叮抑制作用。
Q：使用本产品时还有哪些注意事项？
A：1.引物长度和浓度一般应比常规的PCR 长和高(考虑到被Pfu DNA Polymerase的3´-5´的外切活性降解的因素)；
 2.最好在反应前加Pfu DNA Polymerase。

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