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2~8℃
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长期
- 英文名:
Virus RNA extraction kit with 96-well plate(Centrifugal method)
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467
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")96孔板病毒RNA提取试剂盒(离心法) RNA纯化,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:96孔板病毒RNA提取试剂盒(离心法) RNA纯化
规格:1次|5次
产地:国产|进口
英文名:Virus RNA extraction kit with 96-well plate(Centrifugal method)
品牌:百奥莱博
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96孔板病毒RNA提取试剂盒(离心法) RNA纯化关键词:BTN80922,Virus RNA extraction kit with 96-well plate(Centri,离心法,96孔板病毒RNA提取试剂盒,96孔板病毒RNA提取试剂盒(离心法)
·软骨RNA柱式提取试剂盒
编号:BTN101121
英文名称:Cartilage RNA column Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒专门从各种软骨组织样品中快速提取总RNA的试剂盒,它能有效克服传统TRIzol方法提取软骨组织RNA时,十分容易产生糖蛋白和酸性多糖污染这一缺点。
试剂盒特点:
1. 能有效去除糖蛋白、粘蛋白污染,OD260/280一般均在1.9以上。
2. RNA产率一般为5-15μg/100mg。
3. 操作简单,整个提取过程一般只需要10 多分钟。
4. 得到的RNA可以直接用于RT-PCR、Northern杂交、mRNA 纯化、Primer Extension、RNA Protection、in vitro translation等研究。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA 洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。溶液B需4℃保存。
使用方法:
1. 先将50-200mg 新鲜或冷冻的软骨组织液氮研磨成粉,加入1mL溶液A溶解(溶液A使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并摇晃混匀),然后将研磨物转移到新的1.5mL离心管中,振荡混合30秒。也可以将软骨组织剪碎后与溶液A一起用Polytron 匀浆机(内切式匀浆机)匀浆5-20秒,再转移到1.5mL离心管中。匀浆时会产生泡沫,但不影响提取效果。
2.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿,在振荡器上振荡30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
3.室温12000~15000g离心3~5分钟,两相间将有约5-10 毫米厚的细胞破碎物。
4. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。最好留下100μl上清液不取。
5. 加入等体积的溶液C,充分颠倒混匀。
6. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
7. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加0.7mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 加0.3mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。
10.室温离心半分钟。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
11. 将离心吸附柱转移到自备的RNase-free离心管中,加入50-100μl RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。
12. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。注意:测定OD时不要稀释过度,否则浓度会在仪器能测的范围之外。本方法提取的RNA 测OD时一般最多只能稀释10-20倍。
15. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
96孔板病毒RNA提取试剂盒(离心法) RNA纯化关键词:BTN80922,Virus RNA extraction kit with 96-well plate(Centri,离心法,96孔板病毒RNA提取试剂盒,96孔板病毒RNA提取试剂盒(离心法)
·RecJf核酸外切酶
编号:BTN130629
英文名称:RecJf Exonulease
规格:1000U
RecJf作用于单链DNA,沿5´→3´方向催化去除单磷酸脱氧核苷酸。RecJf与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合表达。其催化特性与野生型RecJ相同。与MBP的融合,增强了RecJf的溶解度。当底物为5´端突出了22个核苷酸的DNA时,经RecJf酶切后可得到含有以下三种末端的混合产物:平齐末端、5´突出末端(1-5个核苷酸)和5´凹陷末端(1-8个核苷酸)。RecJf发挥活性时无需5´末端磷酸化。
产品特点:
1.特异性5´→3´单链DNA核酸外切酶;
2.从DNA上切下单磷酸脱氧核苷酸。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期半年。
活性定义:1单位指在50μl反应体系中,37℃条件下,30分钟内产生0.05nmol可溶于TCA的脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。
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文献和实验分析实验。 解决方案 1. 血液越新鲜越好,在血液收集管中使用 RNA 稳定试剂来保存 RNA。 2. 血液 RNA 提取本质上是白细胞 RNA 提取,使用 Ficoll-Hypaque 密度梯度离心法回收单核细胞。 3. 去除抗凝剂和酶抑制剂。 4. 可采用专门用于血液样本的 RNA 提取试剂盒(如:QIAamp RNA Blood Mini Kit,货号:52304),其中含有高效的红细胞裂解液,在有效裂解细胞的同时也能防止其中释放出的大量 RNase 对后续 RNA 提取的影响。
RT2 Profiler PCR Arrays新手小技巧及注意事项
以下是做了几百次PCR Array的Matt Finley博士的经验之谈:RNA纯化和分析:起始RNA样品的质量是成功实验的最重要的因素之一。我强烈推荐使用QIAGEN的RNA纯化试剂盒来进行RNA纯化。RNA样品必须进行柱上DNase处理,以保证你的RNA的纯度。假如你的样品很特别,需要选择一个最合适的试剂盒进行纯化,请致电或e-mail联系QIAGEN技术人员,他们很乐意帮您选择一个合适的试剂盒。确保RNA样品适合进行PCR array。RNA样品进行PCR array实验前必须先通过吸光
序列。他的研究目标是了解病毒与宿主的共生关系。Dumbacher博士为改善RNA提取提出了几点建议。 优化RNA的保存 研究小组常常从偏远地区采集样本,如热带雨林或珊瑚礁。他们的最大挑战在于无法用液氮迅速冷冻样本,而RNA在乙醇中逐步降解。于是,他们用拭子蘸取鸟的泄殖腔,并放在RNA稳定剂或其他包含4M 硫氰酸胍(GITC)的溶液中。由于盐的浓度,一些RNA稳定剂可能会给RNA的分离造成困难。当然,如果能解决冷藏问题,保存RNA的最好办法是采集后立即
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