一站式miRNA柱式大提试剂盒价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")一站式miRNA柱式大提试剂盒价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：一站式miRNA柱式大提试剂盒价格
编号：BTN80906
规格：5次
英文名：One-stop miRNA column large-scale extraction kit
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒是在柱式miRNA提取试剂盒(BTN80104)基础上自主开发的大提升级产品，是目前国内外市场上最快速最简单的小RNA分离纯化产品。

试剂盒特点：
1.样品处理量大，一次最多可以处理2g的样品。
2.一步法直接分离纯化小RNA，比Ambion的两步法和PAGE电泳回收法更简单。整个过程只需要二十多分钟。
3. 得到的小RNA 长度大部分在200nt以下，包括 5S RNA、tRNA、miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
4.小RNA 纯净，OD260/280一般都在1.9以上。无基因组DNA的污染。可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。
5.产率一般为20-40μg/100mg动物组织。
6.适用范围广，可以用于动物组织、血液及部分植物组织等实验材料。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	100ml
离心吸附柱(大提)	10套
通用洗柱液	100ml
RNA洗脱液	5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
由于离心吸附柱的吸附量限制，本产品每次提取只能处理2 g左右的各种组织，可以在50mL塑料离心管中操作。
1. 新鲜配制裂解液20mL。将溶液A和溶液B按 1:1的比例混合(即溶液A和溶液B各10mL)，然后根据组织细胞类型的不同分为下面几种情况使用。注意：溶液A和溶液B混合后必须立即使用，不要放置，否则会产生沉淀。如果产生沉淀，需加热到65℃使其溶解后才能使用。
a)对贴壁细胞：吸尽培养液，按每10 平方厘米细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，按每 1-5×106悬浮细胞中加入1mL 新鲜配制的裂解液，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell，1mL 新鲜配制的裂解液的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜的动物组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中，每克组织加10mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，建议组织的使用量不要超过50mg/ mL 裂解液，否则十分容易产生DNA污染。
d)对新鲜的植物组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入50mL塑料离心管中，每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。
e)对 RNAhold 保存动物或植物组织：先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块，放入50mL塑料离心管中，每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。
2. 将裂解物转移至一个干净的50mL塑料离心管中，然后加入0.2-0.3倍体积的自备*仿(1mL 裂解物需0.2-0.3mL *仿)，振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 12000～15000g室温离心3～5分钟。
4. 将上清液(约12-16mL)转移到一个离心吸附柱(大提)中以去除大RNA。注意：离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下部分上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。本试剂盒提供的离心吸附柱(大提)之间没任何区别，可以随机选一个做大RNA 吸附，另一个做小RNA 吸附。
5. 12000～15000g室温离心离心吸附柱(大提)1分钟，收集管中的穿透液。大RNA 将与离心吸附柱的膜结合，小RNA 将存在于穿透液中。如果需要回收大RNA，请按附录的方法操作，但需要单独购买本公司的通用洗柱液和RNA 洗脱液。
6.在穿透液中加等体积的溶液C，混匀。此时溶液的总体积约30mL。
7. 分一次或分两次将混合液转移到新的离心吸附柱(大提)中，每次转移后需要12000～15000g室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液。
 注意：不要使用已经使用过的、用来吸附大RNA的离心吸附柱(大提)。
8. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中，12000～15000g室温离心1分钟，弃穿透液。
9. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱(大提)中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
10. 12000～15000g室温离心1分钟以甩出残留液体。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响 miRNA的使用。
11. 将离心吸附柱(大提)转移到一自备的、50mL RNase-free 收集管中，加入0.5-1mL RNA 洗脱液。
12. 12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的溶液即为miRNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

附录：
1. 用 10mL自备的通用洗柱液洗涤结合有大RNA的离心吸附柱(大提)。
2. 重复上步一次。
3.干甩一次。
4. 加入0.5-1mL RNA 洗脱液，室温放置2-3分钟。
5. 12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的溶液即为大RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

一站式miRNA柱式大提试剂盒价格极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·链霉亲和素
编号：BTN131021
英文名称：Streptavidin
规格：1mg
本产品为通过亲和层析纯化获得高纯度链霉亲和素。链霉亲和素是四聚体蛋白，大小为66KDa，一条完整的SA肽链中有159个*基酸残基，一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合，两者之间的亲和力极为强烈，链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于10 mol/L 数量级，这一性质常用于分子生物学用途。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·硅胶膜DNA离心吸附柱(大量提取)
编号：BTN90303
英文名称：Silica Spin Column For Maxiprep
规格：1套
硅胶膜离心吸附柱目前广泛用于基因组DNA提取、总RNA提取、DNA反应纯化、DNA胶回收和质粒DNA制备等分子生物学实验，但是由于硅胶膜吸附核酸的能力千差万别(详细分析见百奥莱博综述Silica-DNA结合原理及影响因素)，使得市场上相关产品的质量也良莠不齐。百奥莱博经过精心研究，找到特殊的化学修饰方法，使普通硅胶膜吸附核酸的能力增加3-12倍，优于市场上绝大多数产品。本产品就是基于化学修饰硅胶膜的高载量离心吸附柱。

产品特点：
1.高载量，在同等上样条件下吸附能力比同类产品高1-2倍左右。
2.与50mL离心管兼容。
3.与各种常用的，基于Silica-DNA结合原理的上柱液和洗柱液兼容。
4.可以再生使用(需要百奥莱博的离心吸附柱再生液)。
5. 结合DNA的性能不会随放置的时间变化。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

使用效果：

图注：高拷贝质粒pWXL001从70mL过夜培养菌液中提取得到。从左到右分别为第一次，第二次，第三次，第四次和第五次洗脱，每次洗脱体积均为1mL。上样体积为10μl，最后在0.8%琼脂糖凝胶中电泳后紫外观察。使用的染料为百奥莱博绿如蓝染料，电泳缓冲液为超快电泳液。第一次洗脱约25%的质粒DNA，第二次洗脱约35%的质粒DNA；第三次洗脱约20%的质粒DNA；第四次洗脱约10%的质粒DNA；第五次洗脱约8%的质粒DNA。本次实验质粒DNA产量是465.5μg，产率是6.65μg/mL


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BTN100102A His标记蛋白质微量纯化套装 One-Stop His-Tagged Protein Miniprep Pack(A)
HR0013 活性蛋白提取试剂盒 Active protein extraction kit
SV0934 IsoAmp II 通用 tHDA 试剂盒
WE0403 尿液DNA样本保存管 Urine DNA Storage Tube
BTN130958A 红色DNA上样液(6×,非甘油) DNA Loading Buffer(Red)
SY0311 磷酸酶抑制剂混合物(100×) Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×)
SV0014 AclI限制性内切酶 AclI Restriction Endonuclease
KFS284 Caspase 3抑制剂Ac-DEVD-CHO(10mM) Ac-DEVD-CHO
SY0522 大鼠纤连蛋白 Rat Fibronectin
YT901 L-谷*酰胺溶液(100X) L-Glutamine Solution(100X)
BTN120509 Poly(A)聚合酶 Poly (A) Polymerase
HR0470 CCCP (50 mM) 细胞凋亡诱导剂 CCCP (50 mM) apoptosis inducing agent
SY0162 PR-GFP报告基因质粒 Progesterone receptor (PR) GFP Reporter Plasmid
YT247 PPAR凝胶迁移突变探针(10μM) PPAR Mutation Probe For EMSA(10μM)
BTN81221 大肠杆菌HB101化学感受态细胞 E.coli HB101 Chemical Competent Cell
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·生物素化的Oligo(dT)
编号：BTN130977
英文名称：Biotinylated Oligo(dT)
规格：5μg
本产品是生物素标记的Oligo(dT)，其可与大部分真核生物 mRNA中携带的ploy(A)形成共价杂交偶联实现的，通过生物素和链霉亲和素的亲和作用，实现对mRNA的直接分离，也可用于从总 RNA中进行第二轮纯化mRNA。

储存条件：常温运输及保存、有效期一年。

·自诱导培养基(lac启动子)
编号：BTN100825
英文名称：Auto-induction Medium
规格：200mL
本产品是本产品是在pET 专用生长培养基的基础上开发而成的，它利用E.coli自身对培养基中不同碳源的调控利用机制，实现外源蛋白在细菌达到饱和生长期后的自动诱发。

产品特点：
1．本产品自动诱导表达，不需要添加任何IPTG或相关诱导物，节约成本。
2．免去了密切监控菌液密度的过程，尤其适合大规模筛选。
3．极大将细菌的生长密度OD600从2左右提高20以上。
4．极大提高外源蛋白的表达量，最高可占细菌总蛋白的45%。
5．与各种细胞培养容器(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)兼容。
6．本产品即开即用，非常方便。
7．适用于T7 RNA聚合酶基因由lac启动子控制的任何表达系统，如pET系列。
8．不适用于lacZ或lacY突变的宿主菌。

产品组成：

成分	规格
成分A	200ml
成分B	1.25ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

使用方法：

一、培养基的配制
1．配制自诱导培养基：将1.25mL溶液B全部加入到200mL的溶液A中即得自诱导培养基。
 注意：必须严格无菌操作，否则自诱导培养基非常容易长细菌。
2．贴好标签待用。如果长期时间不用，可以冻存在-20℃。

二、培养基的使用
1．将构建好的质粒转化入细菌，如BL21(DE3)，涂于自备的、含有1%葡萄糖的LB培养基中(需要加入适当浓度的抗菌素)，37℃培养过夜。
2．挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗菌素的液体LB培养基中，37℃培养直到菌液浑浊但不饱和(一般需要6-8小时)。
3．将所得菌液按千分之一的体积比例加入自诱导培养基中(如果自诱导培养基体积是100mL，则加入100μl菌液)，同时加入适当的抗菌素。注意：在自诱导培养基中，如果使用卡拉霉素，其终浓度比一般的培养基高，需要100μg/mL。由于本方法所得菌液密度大，故需要大量氧气，因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底最好是皱褶式的，这样摇晃中氧气供应更充分。
4．37℃培养过夜，或37℃培养到菌液饱和时降低摇床的温度到所需温度(对温度诱导型启动子)。
5．收集菌液开始蛋白纯化步骤。

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