BTN80804型柱式真菌RNA提取试剂盒批发

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百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN80804型柱式真菌RNA提取试剂盒批发，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：BTN80804型柱式真菌RNA提取试剂盒批发
规格：50次
英文名：Fungal RNA Column extraction kit
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：BTN80804
本试剂盒是在本公司真菌RNA提取试剂盒(BTN60305)基础上改进的柱式产品，跟真菌RNA提取试剂盒相比，它具有下列特点：
1. 柱式操作，更加简单快捷，整个过程只需要约30分钟。
2. RNA 纯度高，OD260/280一般都在2.0左右，可直接用于RT-PCR、Norther杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
3. RNA产量高，一般在 20-70μg/mL 酵母培养物(约2.0 ×107个细胞)。
4. 非酶细胞破裂法，适用于各种形态和各个种属的真菌及革兰氏阳性细菌，包括 Candida albican、Saccharomyces cerevisiae、Schizosaccharomyces pombe 、 Pichia pastoris 、Bacillus subtilis、Staphylococcusaureus等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	20ml
溶液B	25ml
溶液C	75ml
溶液D	25ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将50mg左右的干菌丝(或100mg左右的鲜菌丝、或适当数量的真菌菌落)转移到 1.5mL塑料离心管中。如果是液体真菌培养物，则直接将1-10mL液体真菌在 1.5mL塑料离心管中 12000～15000g离心 1分钟，并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入0.4mL溶液A 并充分吹打混匀。如果 A溶液存放时产生沉淀，请置于65℃融化，用前充分摇晃均匀。
3. 加入0.4mL溶液B，剧烈振荡 30秒。
4. 65℃保温 5分钟。
5.室温 12000～15000g离心 3～5分钟，转移上清到一干净的1.5mL塑料离心管中。
6. 再加入0.1mL溶液B和0.1mL自备*仿，振荡混匀 30秒。
7.室温 12000～15000g离心 3～5分钟，转移上清到一自备的、干净的5mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清 3倍体积的溶液C(约1.2-1.5mL)和1倍体积的溶液D(约0.4-0.5mL)，充分混匀。
9. 将混合液(约2.5mL)分 3-4次转 移 到离 心 吸 附 柱中 。 每次13000-15000g室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
10. 用 0.5mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
11.一次洗涤一般足够去除杂质。但如果样品 OD260/280 比值不高，可以再用 0.5mL 通用洗柱液重复此步一次。
12.室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的洗柱液会影响 RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 1.5mL塑料离心管中，加入30-100μL RNA 洗脱液。
14.室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA 完整性的电泳检测：
 如果需要做 Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414 ，2000)。 如 果是简 单 检 测 ，可以使 用 TAE或SuperBuffer-2 DNA/RNA 两用快速电泳液，但文献报道必须使用变性上样液(BioTechniques，9:558，1990)。普通 DNA上样液不含变性剂，也没经过去 RNase处理，所以最好不要使用。 尤其需要注意的是不要使用 TBE进行 RNA电泳，因为TBE 所含硼*(代"酸")是研究多糖的经典方法----硼*(代"酸")络合法中的关键成分，硼*(代"酸")通过与RNA 核糖中的羟基发生络合反应，形成 RNA分子内或RNA分子间的络合复 合物，使同样长度的RNA 具有不同的泳动速度，电泳条带弥散，同时有大的RNA 络合复合物迟留在加样孔中(一般会误以为是基因组 DNA污染)。RNA分子内或RNA分子间的络合物的形成的多少和比例又与硼*(代"酸")与RNA的数量比例有关，而 RNA样品中污染的其他多糖也会参与此反 应，使硼*(代"酸")对 RNA电泳的影响更复杂，所以TBE 对 RNA电泳的影响 没有规律性和重复性。有的样品可以使用有的又不行，最好是避免使用。
16. RNA产量产率测定：
 将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在 OD260的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出 RNA的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在 DEPC 水中检测 OD260和OD280，否则光吸收比在 TE中测得的低 10%-15%。
17. RNA 纯度测定：
 无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，OD260/OD230一般在2.0-2.3 之间，如果低于或高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质或多糖的污染，但一般不影响 RT-PCR等反应。蛋白质污染可以通过酚/*仿抽提一次然后酒精沉淀去除，DNA和多糖污染可以分别用我公司的DNA Scavenger和PS Scavenger 去除。测 OD时 RNA 不能过度稀释使 OD 读数低于仪器的有效范围。

疑难解答：
Q：为何从酵母中提取的总 RNA 有 3 条小带？
A：它们分别是70bp左右的tRNA，120bp左右的5S RNA，160bp左右的5.8 S RNA。
Q：上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组 DNA吗？
A：不是。用 TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳 RNA时容易产生此现象，百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用 TBE作电泳液的话)形成的复合物加 RNase处理后，这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶，也必须在上样前使 RNA变性。使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液 RNAload可以使 RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时，可以使用 TAE或超快电泳液 SuperBuffer-2，最好不要使用 TBE缓冲液，因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物，RNA 很难形成锐利的条带。
Q：如何确认和去处除污染的基因组 DNA？
A：如果怀疑有 DNA污染，可以用 RNase处理 RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组 DNA污染。进一步确认可以使用 PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。

BTN80804型柱式真菌RNA提取试剂盒批发正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·GTP溶液(2.5mM)
编号：BTN131218
英文名称：GTP Solution，2.5mM
规格：2mL
GTP分子式为C10H13N5O14P3Na3，分子量是589.2，消光系数为13.7×103M-1 ×cm-1(pH7.0)，λmax为253nm。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·沉淀型TMB显色试剂盒
编号：BTN101106
英文名称：Precipitated TMB Chromogenic Kit
规格：100mL
TMB因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用。本产品采用稳定敏感的配方，辣根过氧化物酶接物反应时产生一种深蓝色的沉淀产物，适用于Western Blot及其适用于蛋白质杂交和免疫化学，以及原位杂交染色等。即开即用，性能稳定，操作便捷，敏感度高，显色清晰，重复性好。

产品特点：
1．相对于DAB来说，灵敏度高。
2．色泽稳定，无须避光显色。
3．色带为蓝色，便于观察。
4．无毒环保，可以放心使用。

产品组成：

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B	100ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃避光保存，有效期一年。

使用方法：

一、免疫印迹染色
1．准备好含有待测蛋白的固相膜：包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤
2．加入1滴溶液A和1滴溶液B，铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3．置于平式摇荡仪上，在室温下孵育2-5分钟，直至深蓝色沉淀出现。
4．用镊子夹起固相膜，放入去离子水中清洗。
5．空气中晾干。
6．拍照记录。

二、免疫化学染色
1．准备好含有待测蛋白的组织切片：包括固着、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
2．加入1滴溶液A和1滴溶液B，铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3．室温下，小心加入上述显色工作液使其铺满整个切片样品表面。
4．室温下孵育5-10分钟，或直至样本出现深蓝色。
5．小心移去切片上显色工作液。
6．室温下，小心将切片置入50 毫升PBS缓冲液中浸泡5秒。
7．小心移去切片上的PBS缓冲液。
8．放上盖玻片或封片。
9．(选择步骤)进行甲基绿复染。
10．立即在一般光学显微镜下观察：阳性呈现深蓝色。

注意事项：
1．加入1滴溶液A和1滴溶液B，可按比例增减
2．如果封闭欠佳，易造成背景颜色过深
3．固相膜显色后数小时将会褪色，不能永久存在。
4．该显色液只能用于辣根过氧化酶(HRP)标记的杂交和沉淀反应。
5．染色后可用甲基绿或苏木素复染，增强对照。

疑难解答：
Q：在ELISA底物反应过程中，为何有些孔呈蓝色，而另外的孔呈蓝绿色？
A: 这是TMB底物反应过程中的正常现象，不影响实验结果。这是由于辣根过氧化物酶的浓度过高引起的，建议降低二抗的浓度。
Q：ELISA 显色时为何孔中会出现沉淀？
A：HRP浓度过高，建议降低二抗-HRP浓度或加入100μL 冰醋酸以溶解沉淀。
Q：如何降低背景读数？
A：建议降低一抗或二抗浓度，延长封闭时间。


BTN80804型柱式真菌RNA提取试剂盒批发关键词：BTN80804,柱式真菌RNA提取试剂盒,Fungal RNA Column extraction kit

ARB13710 兔骨形成蛋白(BMPs)Elisa分析 Rabbit bone morphogenetic proteins,bmps ELISA KIT
2829-43-8 Sirius Red 天狼猩红
73049-39-5 小牛胸腺DNA DNA(calf thymus)
TD溶液(4×,pH7.4)   500ml
BTN120615 dATP溶液,100mM dATP Solution
BL0870 羊抗兔IgG免疫血清 0.5ml
BTN100831 5-*-4-*-3-吲哚磷酸 BCIP
J0306 兔抗山羊IgG(H+L)抗血清 1ml/10ml
BFD060 *霉素检测卡
超低分子量蛋白Marker(3.3-22KD) 10次
BL0617 镍-琼脂糖凝胶H.P Ni Sepharose H.P
ARB11873 人糖链抗原19-9(CA19-9)Elisa方法检测 Human carbohydRate antigen19-9,ca19-9 ELISA KIT
PP0501 新型快速蛋白染色试剂盒
L-丙交酯 Ferric citrate 4511-42-6
脱脂奶粉 β-Napthyl acetate
C1801 巴比西鼠血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml
SJ0661 RNA提取试剂
Tris-HCl缓冲液(1mol/L,pH8.0,RNase free)   100ml|500ml
纤粘连蛋白 QAE Sephadex A-25 86088-83-7
ARB11038 人环孢素A(CsA)酶免分析 Human cyclosporine a,csa ELISA KIT
ARB10726 人异常凝血酶原(APT)酶标法分析 Human abnormal prothrombin,apt ELISA KIT
HC0158 离心管盒
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·酸酚-*仿-异戊醇混合液(RNA提取用)
编号：BTN100805C
规格：250mL

·抗凝血酶Ⅲ(10mg/mL)
编号：BTN130534
英文名称：Antithrombin III Solution
规格：1mL
本产品为抗凝血酶Ⅲ水溶液，浓度为10mg/mL,pH=7.0-9.0。工作浓度为1 Inh.U/mL。抗凝血酶Ⅲ(抗纤维蛋白酶Ⅲ，ATⅢ，antithrombin Ⅲ)是一种维生素K依赖的单链糖蛋白，分子量是65000。属丝*酸蛋白酶抑制剂，可以抑制血液凝固过程中的所有丝*酸蛋白酶(凝血酶及因子Ⅻα、Ⅺα、Ⅸα等等)的活性，也可以抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等。

活力单位定义：一个抑制单位Inh.U是指，在肝素存在下，ATⅢ灭活一个单位的25℃，pH8.1的凝血酶。

储存条件：低温运输，4℃一周内稳定。

·Pfu DNA聚合酶
编号：BTN51207
英文名称：Pfu DNA Polymerase
规格：100U
Pfu DNA Polymerase是Pyrococcus furiosis(激烈火球菌)DNA Polymerase基因在大肠杆菌中表达并经多次过柱纯化分离而得。可用于高保真PCR、长链PCR的扩增，还可以用于DNA片段的粘转平反应。

产品特点：
1．它具有3´-5´聚合酶活性，跟常用的Taq DNA聚合酶一样，能够用于PCR反应。
2．与Taq DNA Polymerase不同的是，它还具有3´-5´外切酶活性，能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。
3．其出错率最低的是具有校正功能的耐高温DNA Polymerase中最低的。
4．Pfu DNA聚合酶比普通Taq DNA聚合酶热稳定性更好，95℃ 1小时仍维持90％以上活性。

产品组成：

成分	规格
Pfu DNA聚合酶(3U/μL)	100U
10×Pfu Buffer	0.1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存。

使用方法：(以λDNA为模板进行PCR扩增反应为例)

1．按下列组份配制PCR反应液

Pfu DNA聚合酶(3U/μL)	0.5-1μL
10×Pfu Buffer	5μL
dNTP Mixture(各2.5mM)	4μL
模板DNA	见下
引物1(10 uM)	1μL
引物2(10 uM)	1μL
灭菌蒸馏水	Up to 50μL

推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量

哺乳动物基因组DNA	0.5-1μg
酵母基因组DNA	5-500ng
细菌基因组DNA	0.5-50ng
质粒DNA	5-500pg
PCR回收片段	1-100pg

2．PCR反应条件
以λDNA为模板，扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下：

温度	时间	循环数
94℃	3min
94℃	30sec	30~50循环数
55℃	30sec
72℃	2min
72℃	5min

注：PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

注意事项：
PCR的反应液请在冰中配制，然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法可增强PCR扩增的特异性，减少PCR过程中的非特异性反应，能得到良好的PCR结果。

10×Pfu Buffer的组成：200mM Tris-HCl(pH8.8)，100mM KCl，100mM(NH₄)2SO₄，500mM MgSO₄

活性定义：用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，摄入10nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位。

质控标准：
1．SDS-PAGE 考马市亮蓝染色无杂带污染。
2．无核酸内切酶活性检测(切刻酶活力)、核酸外切酶活性、核酸酶活性检测。

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