藻类RNA柱式提取试剂盒厂家直销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博供应的藻类RNA柱式提取试剂盒厂家直销用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多藻类RNA柱式提取试剂盒等RNA纯化产品请联系我司咨询订购。

名称：藻类RNA柱式提取试剂盒厂家直销
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：50次
编号：BTN120503
本试剂盒是专门用于各种藻类样品RNA提取的产品。

试剂盒特点：
1. 操作简单快捷，整个过程只需要约30分钟。
2. RNA纯度高，OD260/280一般都在2.0左右，可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA合成等。
3. RNA产量高，一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0 ×107个细胞)。
4. 非酶细胞破裂法，适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	100ml
溶液D	30ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	100ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将1-5mL液体藻类培养物在1.5mL塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心 1分钟，并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入0.5mL溶液A并充分吹打混匀。注意：溶液A存放时容易产生沉淀，如果有沉淀，用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入0.5mL溶液B，剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意：不要超过5分钟，否则RNA容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3～5分钟，转移上清到一自备的、干净的1.5mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入0.2mL自备的*仿，充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3～5分钟，转移上清液到一自备的、干净的5-10mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约1mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D，充分混匀。如果上清为1mL，则加入3mL溶液C和1mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中，每次转移0.7mL混合液到离心吸附柱中，室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合，然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒，弃收集管中的穿透液，然后再加入0.7mL混合液，重复上面的操作，直到混合液全部挂柱。
10. 第一次洗涤：将0.7mL通用洗柱液加到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤：一次洗涤一般足够去除杂质，但如果样品OD260/280比值不高，可以再用0.3mL通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 1.5mL塑料离心管中，加入30-100μL RNA洗脱液。具体加多少根据RNA浓度决定，建议先使用小体积洗脱液，这样浓度过高还可以稀释。
14.室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测：
 注意：普通DNA上样液不含变性剂，更没经过去RNase处理，所以最好不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定：
 将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA稀释在DEPC水中检测OD260和OD280，否则光吸收比在TE(pH7.5-8.2之间)中测得的低10%-15%；也不要稀释过度，使OD读数在仪器的有效范围之外，这样得到的OD比值没有意义。

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·即用型高保真PCR试剂盒
编号：BTN90708
英文名称：Instant HiFi PCR MasterMix
规格：1.5mL
本产品是即用型的2×高保真PCR预配反应液，含有除引物、模板以外的所有PCR试剂，包括Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等，特别适合于高保真PCR反应。

产品特点：
1. Pfu DNA聚合酶是使用最广泛的高保真酶，其保真度为普通Taq酶的10倍。
2. 使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，非常方便，简化了PCR的准备工作。
3. PCR反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配置。由于加样过程少，有利于减少污染，降低实验误差。
4. 本产品A型含电泳染料，PCR反应液可直接上样电泳，进一步简化了操作。
5. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化，反应的灵敏度高，特异性强。
6.适用于基因的高保真扩增和基因定点突变等实验，得到的PCR产物可用于平末端克隆。

储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期限为12个月。

使用方法：
将本产品与用户自备的模板，引物混合液按下列推荐使用量(30μL反应体系)加入PCR 管中即可进行PCR，反应结束后直接取5-15μL电泳检查扩增结果。如果反应体系不是30μL，各成分需要按比例增加或减少。

试剂		加入量
2×高保真PCR MagicMix		25μL
DNA模板(自备)	哺乳动物基因组DNA	0.5-1μg
	酵母基因组DNA	5-500ng
	细菌基因组DNA	0.5-50ng
	质粒DNA	5-500ng
	PCR回收片段	1-100pg
PCR引物(自备)		10-20pmol each
补水到		30μL

参考扩增条件：

预变性	94℃	4min
PCR(30个循环)	94℃	30s
	50℃	30s
	68℃	0.5kb/min
延伸	68℃	10min

注意事项：
1. 本产品的Pfu DNA聚合酶比Taq DNA聚合酶的延伸反应速率低，因此我们推荐的扩增延伸反应时间为每kb 需2 分种。
2. Pfu酶3´-5´外切酶活性可降解引物，所以强烈建议在冰上配置完成PCR反应液后，立即放入PCR 仪中进行扩增，扩增完毕后立即进行电泳检测。
3. 本产品扩增产物为平末端，不可以直接进行TA 克隆，可以使用ClionB载体(BTN51104)进行克隆。如需要进行TA克隆，建议对PCR产物纯化后，用加A 试剂盒(BTN60105)加A后再进行TA克隆。
4. 由于Pfu 无 5´到 3´外切酶的活性，所以本试剂盒不能用于实时荧光PCR。

疑难解答：
Q：为何Pfu DNA Polymerase扩增效率不如Taq DNA Polymerase？
A：一是由于Pfu DNA Polymerase 具有3´-5´的外切活性，所以在合成过程中，该酶会随时校对新添加的核苷酸是否配对，影响了合成效率；二是它能通过3´-5´的外切活性使引物部分降解，降低引物结合模板的能力，进而影响扩增效率。三是上面提到的尿嘧叮抑制作用。
Q：使用本产品时还有哪些注意事项？
A：1.引物长度和浓度一般应比常规的PCR 长和高(考虑到被Pfu DNA Polymerase的3´-5´的外切活性降解的因素)；
 2.最好在反应前加Pfu DNA Polymerase。


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·IPTG溶液
编号：BTN80909
英文名称：IPTG Solution
规格：1.5mL
本产品为浓度为200mg/mL的无色液体。IPTG是β-半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性，当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ基因载体DNA)以lacZ缺失细胞为宿主进行转化时，或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X-Gal和IPTG，由于β-半乳糖苷酶的α-互补性，可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

·miRNA分离纯化试剂盒(凝胶法)
编号：BTN130972
英文名称：miRNA isolation Kit(Gel method)
规格：50次
本产品为浓度为200mg/mL的无色液体。IPTG是β-半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性，当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ基因载体DNA)以lacZ缺失细胞为宿主进行转化时，或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X-Gal和IPTG，由于β-半乳糖苷酶的α-互补性，可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

·Southern DNA Marker DL2000(DIG标记)
编号：BTN120654D
英文名称：Southern DNA Marker DL2000(Labeled by DIG)
规格：20次
本产品为浓度为200mg/mL的无色液体。IPTG是β-半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性，当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ基因载体DNA)以lacZ缺失细胞为宿主进行转化时，或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X-Gal和IPTG，由于β-半乳糖苷酶的α-互补性，可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

·PLP固定液(Nakane-McLean固定液)
编号：BTN131289
英文名称：Periodate-Lysine-Paraformaldehyde Fixative Solution
规格：250mL
PLP固定液即过碘酸*-赖*酸-多聚甲醛固定液，又可称为Nakane-McLean固定液。该固定液的作用机制是借助于过碘酸氧化组织中的糖类形成醛基，通过赖*酸的双价*基与醛基结合，从而与糖形成交联。由于组织抗原绝大多数都是由蛋白质和糖两部分构成，抗原决定簇位于蛋白部分，故该固定液有选择性地使糖类固定，这样既稳定了抗原，又不影响其在组织中的位置关系。

产品特点：
1．较适于富含糖类的组织，对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好。
2．即开即用，用户不需单独购买各种试剂来配制。
3．固定时间一般需要12-24小时。

产品组成：

成分	规格
溶液A	240ml
溶液B	80ml
成分C	1g
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃避光保存，保存期限半年。

使用方法：

一、配制PLP 固定液(以配制50mL 固定液工作液为例，如果用户需要配制其他体积，请按比例增加或减少各成分的用量)
1．取 30mL溶液A加入到50mL的聚乙*(代"烯")离心管中。
2．继续向离心管中加入10mL的溶液B，混合均匀。
3．称取 0.085g成分C的干粉，加入到上步混合液中，搅拌直至干粉溶解，即得到PLP固定液工作液。
注：此固定液最好临用前配制，否则时间长了会产生一些沉淀，亦会发生氧化反应，从而影响后续组织固定实验。

二、固定液的使用(以皮肤活组织切片为例)
4．取皮肤活组织，切成小长方块。
5．置入PLP 固定液工作液中，固定12-24小时(根据样品材料、大小不同，固定时间或固定温度可能会有较大差异)。
6．用 0.1 M自备的PBS溶液漂洗固定后的组织样品。
7．将样品置于自备的20%甘油或0.1 M PBS溶液中，4℃下保存过夜。
8．将上述样品转移至-20℃下保存备用(20%甘油或0.1 M PBS溶液应淹没组织样品，以防组织样品暴露在液面外被冻伤)，或用冷冻的滑动式切片机将固定后的组织样品切成薄片，光镜或电镜下观察组织。

注意事项：
1．本产品对人体有一定的损害，请在通风好的环境下小心操作，避免吸入。
2．组织取材的厚度不同，固定时间也不同，对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3．固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
4．固定后的组织样品在转移到-20℃下保存之前，4℃下最长可保存1周。
5．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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