北京现货菌落PCR试剂盒2.0打折促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货菌落PCR试剂盒2.0打折促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：菌落PCR试剂盒2.0
规格：50次
英文名：Colony PCR Kit 2.0
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：BTN50901
菌落PCR是筛选重组子的有效方法，可以使质粒鉴定过程从两天缩短到几小时。但由于它直接以E.coli菌落为PCR而菌落中常常含有未进入细菌的、来源于连接反应的载体DNA和插入片段，所以十分容易产生假阳性。本产品针对此缺点进行了改良。

产品特点：
1. 无假阳性率，特殊的溶菌方式能有效降低菌落中未转化DNA 对PCR的干扰，使假阳性率低于5%，远低于绝大部分同类产品。
2. 简单快速，用户只需要提供PCR引物和E.coli菌落，不需要细菌培养和质粒提取,整个筛选过程从一天缩短到2-3小时，节约时间和成本。本产品与常用E.coli菌株和载体兼容。既可小规模筛选，也适用于大规模筛查。
3.高灵敏度，既可用于高拷贝质粒，也适合于低拷贝质粒。
4. PCR反应体系中含有惰性电泳染料，反映完成后可直接上样电泳，不需另加上样液。
5.处理过的菌落样品低温长期保存后仍能用于PCR 筛查。
6. 性价比高，价格跟质粒提取试剂盒相当，但节约一天时间。

成分	规格
溶菌液A	0.5ml
溶菌液B	0.1ml
PCR 2.0	0.75ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 标记1.5mL塑料离心管，除样品管外，还必须加上阳性和阴性对照管。
在每个管中加入下列成份配制100μL 溶菌液：

H2O(自备)	88μl
溶菌液A	10μl
溶菌液B	2μl
合计	100μl

2. 用无菌牙签或无菌移液枪头从培养皿上挑取一个菌落或部分菌落，放入溶菌液中，充分震荡直到菌落彻底分散混匀。为方便回查，最好在培养皿上给已取样的菌落做好标记。
3. 重复第2 步直到待筛查菌落全部转移到相应的离心管中。
4.在阳性对照管中，加入已知含有待筛选质粒的菌落；如果没有此菌落，直接进入第6 步，用连接反应液直接作PCR的阳性对照。
5.在阴性对照管中，加入已知的不含有待筛选质粒的任何E.coli菌落(如常见的宿主细菌)，其他处理同第2 步。
6. 将所有离心管置于37℃保温30分钟，然后转入100℃水浴处理10分钟。振荡混匀溶液数秒后10,000 g离心1分钟，转移上清到一新的离心管中待用。此溶液为样品DNA溶液。
7. 标记与第1 步数量相同的PCR 管，每个管中分别加入下列成份并充分混匀：

样品DNA溶液	1-5μl
PCR MagicMix	15μl
引物1(10 pmol/μL)	1μl(自备)
引物2(10 pmol/μL)	1μl(自备)
Taq物DNA聚合酶(5U/μL)	0.2-0.4μL(1-2U)
补水到	30μl

 注意:引物选择有三种情况，
 一是选用商品化的能与多克隆位点两边顺序结合的通用引物(如T7、T3、SP6等)；
 二是使用用户自己合成的能与插入片段结合的引物(如果插入片段是PCR产物，引物是现成的)；
 三是组合第一种情况和第二种情况的引物。选择前两种引物在筛查到重组子后还必须用其他方法(如质粒制备后酶切或使用载体引物/插入片段引物PCR)进一步确定插入方向。选择第三种引物则可以同时完成重组子筛选和DNA 插入方向确定两项工作。用户可以根据自己的具体情况选择。
8. 将PCR 管放入PCR 仪器中进行扩增，PCR 温度参数根据引物和模板情况由客户自己预先确定。
9. PCR结束后取10μl电泳直接进行琼脂糖电泳分析。(注：本试剂盒提供的PCR buffer中已经含有电泳染料和甘油，故可以直接上样)
关键词：BTN50901,Colony PCR Kit 2.0,菌落PCR试剂盒2.0


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编号	名称
BTN111207A	动物线粒体纯化试剂盒A(粗提)
BTN60705	一管式植物DNA提取试剂盒
BTN61201	电泳级耐热型SYBR染料
BTN130848B	即用型LB平板培养基(含Amp)
BTN131113	CN/DAB底物套装
BTN130979	柱式血清血浆DNA提取试剂盒
BTN70202	柱式酵母质粒DNA提取试剂盒
BTN140649	1mL亲和层析柱
BTN140652	30mL亲和层析柱
BTN91108	T3体外转录试剂盒
BTN130592	HRP标记内参抗体(β-actin)
BTN100815	溶菌酶溶液(10mg/mL)
BTN131197	96孔板病毒DNA提取试剂盒(真空法)
BTN140436	非蛋白型Western封堵液
BTN140654	HEPES溶液(1M,pH7.3)(DNA级)
BTN120512	即用型蓝白T载体B型(T7-T3，有MCS)
BTN61202	一步式复杂样品DNA提取试剂盒
BTN130843	分枝杆菌RNA提取试剂盒
BTN130910	长片段Taq DNA聚合酶
BTN60605	20%PVP K30溶液(不含RNase)
BTN100930	硝酸纤维素膜
BTN71001	柱式病毒RNA提取试剂盒
BTN90901	菌体内毒素清除剂
BTN80202	PAGE胶DNA柱式回收试剂盒
BTN111207B	动物线粒体纯化试剂盒B(精提)
BTN100810	超快蛋白银染试剂盒
BTN130657	热稳定无机焦磷酸酶(PPase)
BTN131119	HRP稳定剂/稀释剂
BTN81024	大肠杆菌DH5α化学感受态细胞
BTN131280	Zetterqvist固定液
BTN120643	硫*(代"酸")葡聚糖
BTN100307B	酸洗玻璃珠(200μm)
BTN90602J	DNA marker(λ-EcoT14 I)
BTN81203	SDS-PAGE电泳液(干粉)
BTN100865	20% PVP K30溶液(DNA级)
BTN130644	甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(FPG)
BTN130529	真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂
BTN100603	银染清除剂
BTN100209	大片段Bst DNA聚合酶
BTN120601	革兰氏阳性菌质粒DNA提取试剂盒
BTN100805B	Tris饱和酚-*仿-异戊醇混合液(DNA提取用)
BTN130637	Tma核酸内切酶III
BTN70601	粪便DNA提取试剂盒
BTN131035	K562 DNA
BTN130511	大肠杆菌JM110化学感受态细胞