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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Paraffin,PCR Grade
- 库存:
896
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")石蜡油,PCR级价格厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:石蜡油,PCR级价格厂家
规格:10mL
英文名:Paraffin,PCR Grade
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:BTN130841
本产品是PCR级石蜡油试剂,专门用于PCR扩增、WGA扩增等实验时添加到反应体系中,封闭反应成分,防止溶液的挥发。
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
欲咨询购买石蜡油,PCR级价格厂家,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·20%CTAB溶液(RNase-Free)
编号:BTN51202
规格:250mL
·*霉素干粉
编号:BTN60102
英文名称:Chloramphenicol Powder
规格:1g
*霉素是白色至微黄色针状结晶或片状结晶。分子式为C11H12Cl2N2O5,分子量为323.13。真空时升华。无臭,味苦。易溶于醇类,微溶于乙*(代"醚"),不溶于*、石油醚和植物油。水溶液呈中性。熔点150.5~151.5℃。在干燥时稳定,在弱酸性和中性溶液中较安定,煮沸也不见分解,遇碱类易失效。
结构式:

储存条件:常温运输、4℃保存、有效期一年。
·可保种型蓝白T载体
编号:BTN60803
英文名称:Blue-White Vector T
规格:50 ng
本产品是环状的可以制备Clion蓝白T载体的质粒DNA。T载体是克隆PCR扩增产物的必不可少的工具,但是由于市场上的各种T载体质量参差不齐,用户很难购买到满意的产品;同时购买的T载体为线性DNA,不能保种,必须反复购买,累计成本很高。为解决这一问题,我司特推出可保种型T载体,用户只需要购买Xcm I内切酶就可以自己制备高质量的T载体,随用随配,十分方便。
产品特点:
1.一次购买,终身拥有。本产品提供制备T载体用的环形质粒DNA,可以象其他质粒一样保种并长期保存。
2. 随用随配,十分方便。用户只需要提供Xcm I 限制性内切酶和基本分子生物学实验条件,就可以自己制备T载体。整个过程只需要两天。
3. T载体含T 率为100%。本方法不是使用传统的加尾法,而是使用Xcm I酶切法。质粒的多克隆位点上预先插入了一段长为1.3 Kb的Xcm I DNA片段,经Xcm I酶切后回收得到的质粒DNA(T载体)两端自然全部带有T 突出,比例远远高于用Taq DNA聚合酶加尾法和TdT 加尾法得到的T载体。
4. 方便各种下游操作。用本产品得到的蓝白T载体插入位点两侧有多种常见的酶切位点,便于后续克隆; Xcm I 位点在Alpha 互补区,可以使用蓝白斑筛选重组子;两边还有T7和SP6 RNA聚合酶启动子,便于制备RNA探针。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
使用方法:
一.细菌的转化
1. 将100μl感受态细胞于冰上解冻。注意:最好使用end A1菌种(如DH1、DH5、DH5、JM109、XL1-Blue等。常用宿主细菌的基因型可以参考《分子克隆手册》等参考书)。因为这类细菌所含DNase少,制备T载体后,残留的DNase对的T末端的破坏机会更小。
2. 取5-10μl本产品加入到感受态细胞中,轻轻旋转几次以混匀内容物。在冰上放置30分钟。
3. 将管放入预加温到42℃的水浴中,热休克90秒。快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却1~2分钟。
4. 每管中加900μl LB培养基,37℃振荡培养1小时。
5. 取100μl培养液涂布到含Amp的LB琼脂平板表面。
6. 将平板置于室温直至液体被吸收。
7. 倒置平皿,于37℃培养,12~16小时后可出现菌落。
二.细菌的鉴定
1. 挑取单个菌落进行过夜细菌培养。
2. 按常规的方法进行质粒小量制备。
3. 用Xcm I内切酶按下面条件酶切提取的质粒DNA,如果大规模酶切,需要按比例增加各成分用量:
| 成分 | 使用量 |
| Xcm I Buffer,10× | 5μl |
| 质粒DNA | <或= 2μg |
| Xcm I | 1μl |
| 超纯水 | 加到50μl |
37℃保温一小时,65℃保温20分钟使酶失活。
4.电泳,本产品被Xcm I酶切后将产生3 Kb和1.3 Kb的两段DNA。
5. 如果Xcm I酶切图谱正确,则按常规的方法进行细菌的保种。
三. T载体的制备
1. 参考《分子克隆手册》等参考书培养细菌和提取质粒DNA。注意:一定要去尽可能去除残留的RNA和蛋白质(含残留DNase)的污染。
2. 用Xcm I酶切质粒。注意:酶切时间最好不要超过一小时,避免残留的DNase对T末端的破坏。
3.电泳后切下含3Kb DNA(既蓝白T载体)的胶段。注意:千万不要用UV照射将要回收的片段,因为UV会使DNA交连,使DNA失去转化细菌的能力。如果酶切的DNA量大,可以使用百奥莱博绿如蓝核酸染料,可以直接在可见光和黑背景下切胶。如果别无选择,最好在长波(360nm)紫外灯下快速切胶,尽可能切掉多余的凝胶。为避免DNA交连,可以使用百奥莱博的DNA防护剂UV Scavenger(BTN60601)
4. 用常规DNA回收方法进行胶回收。
5. 测定T载体DNA的浓度后,将T载体DNA保存在-20℃备用或直接使用。
四.连接反应
1. 短暂离心装有T载体的离心管。
2.在两个离心管中加入下列成分:
| 成分 | 样品管 | 阴性对照管 |
| T4 Ligase Buffer,10× | 1μl | 1μl |
| 蓝白T载体 | 20-50ng | 20-50ng |
| PCR 纯化产物 | 50-500ng | 不加 |
| T4 Ligase | 3-5U | 3-5U |
| 补水到 | 10μl | 10μl |
注意: PCR纯化产物与蓝白T载体的摩尔比最好为3:1-10:1。
3. 用移液器吹打连接反应使之混匀后,16℃孵育12小时(或按T4 Ligase供货商提供的操作说明书进行连接)。
五.细菌转化和鉴定
1. 取5μl连接产物进行转化,具体步骤见本手册一,最好使用含X-gal、IPTG、Amp的LB琼脂平板以便进行蓝白筛选。
2. 按经典的质粒提取+酶切或测序鉴定,可以选用的、在插入位点两侧都有酶切位点的酶有BstZ I、EcoR I和Not I。可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。按菌落PCR方法筛选,可选用百奥莱博的菌落PCR试剂盒(BTN50901)进行快速筛选,需要T7和SP6 RNA聚合酶启动子引物。
MCS位点:
石蜡油,PCR级价格厂家关键词:石蜡油,PCR级,BTN130841,Paraffin,PCR Grade
HC0090 离心管(尖底罗口)
50-81-7 抗坏血酸 Aseorbie acid(Vitamin C)
BL1061 麦康凯琼脂
ARB14120 人高香草酸(HVA)检测服务
ARB10836 人抗环胍*酸肽抗体(CCP)Elisa方法检测 Human anti-cyclic citrullinated Peptide,ccp ELISA KIT
ARB12799 小鼠β*基己糖苷酶A(β-Hex A)Elisa分析 Mouse β-hexosaminidase a,β-hex a ELISA KIT
ARB13078 小鼠性激素结合球蛋白(SHBG)尿液中含量检测 Mouse sex hormone-binding globulin,shbg ELISA KIT
ARB12518 大鼠热休克蛋白40(HSP-40)含量检测 Rat heat shock protein 40,hsp-40 ELISA KIT
PY08-028 一次性血液增菌培养基 10ml 10支/盒,用于从血液中分离病原菌
ARB10565 人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)含量测试 Human peroxisome prolifeRators activator receptors alpha,ppar-α ELISA KIT
F020225 兔抗鸭IgY IgG抗体 Rabbit Anti-Duck IgY
F040318 牛IgG抗原 Bovine IgG
ARB12131 大鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)代做ELISA实验 Rat paRathyroid hormone related protein,pthrp ELISA KIT
BL0793 猪IgG抗原(干粉)
石蜡油,PCR级价格厂家关键词:石蜡油,PCR级,BTN130841,Paraffin,PCR Grade
·TdT加尾法DNA探针标记试剂盒
编号:BTN90605A
英文名称:TdT-Tailing DNA Labeling Kit
规格:5次
本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3´端添加dNTP尾巴的原理而设计,该反应的示意图如下:
产品特点:
1.快速,15分钟即可完成标记反应。
2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记,还可用于3´突出的双链DNA标记,但后者标记效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高*(代"辛")标记核苷酸三种选择。
5. 同时提供非标记的dATP,用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| TdT缓冲液,5× | 20μl |
| TdT(末端转移酶,10U/μL) | 10μl |
| dATP,2mM | 5μl |
| 标记核苷酸 | (A、B、C不同,见注) |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
注:A型用于自选标记,用户需自备标记核苷酸,本产品不提供标记核苷酸;B型提供5μl Biotin-11-dUTP;C型提供含5μl DIG-11-dUTP。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针,请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度):
| 成份 | 用量 |
| 探针DNA | 100-200 pmol |
| TdT Buffer,5× | 4μl |
| 标记核苷酸,1mM (A型需自备标记核苷酸) |
1μl |
| dATP,2mM | (见下注) |
| TdT末端转移酶(10U/μL) | 2μl |
| 超纯水 | 补到20μl |
注:dATP可以不加,但这样得到的加尾全部是标记核苷酸,由于空间阻碍,灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好,掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中,以控制标记的密度,提高比活。具体比例如何可以自己优化。
2. 37℃反应15分钟,延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在,一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长);如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本试剂盒只提供dATP而已),每条探针上可加上约100个核苷酸,平均含5个标记核苷酸
3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
4. 如果需要,可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率,带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
5. 如果是非同位素标记,探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针,请不要酚/*仿抽提,因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA,加入前还需热变性)。如果不立即使用,非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年,同位素标记的探针DNA不能放置。
我公司生产供应销*(代"售")的核酸扩增(PCR)产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购石蜡油,PCR级价格厂家。
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