大肠杆菌TG1电击感受态细胞多少钱

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名称：大肠杆菌TG1电击感受态细胞多少钱
规格：50μL×5
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：BTN160801
 TG1电击感受态细胞只能用于电击转化，不能用于热激转化。TG1 来源于E. coli K-12菌株，是目前生长速度最快的克隆用大肠杆菌菌株，在平板上37℃，7小时可见克隆，是主要的噬菌体展示用菌株，同时也可用于普通质粒的构建，lacIqZΔM15的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验；但不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。TG1电击感受态细胞适用于噬菌体展示文库的构建，经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>0.5×1010cfu/μg DNA。

菌株基因型：[F´ traD36 proAB lacIqZΔM15] supE thi-1 Δ(lac-proAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(rK–mK–)。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC培养基等。

使用方法：
1. 将0.1 cm的电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟，待其沥干水分，正置5分钟，使乙醇充分挥发，待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖，冰中静置5分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的TG1电击感受态细胞插入冰中5分钟，待其融化，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。(注：对于质粒，测定转化效率使用1μl 10 pg/μL的对照质粒pUC19；对于连接产物，请用乙醇沉淀DNA后加入适量TE缓冲液(10mM Tris HCl，pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA浓度不超过100 ng/μL，体积不超过5μl/50μl感受态。)
3. 用 200μl 枪头(用刀切除0.5 cm 枪尖)将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖。
4.启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV(此为BioRad电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推荐的参数操作)，将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。
5. 2分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入1mL 不含抗生素的无菌SOC培养基(室温)，用1mL 枪吹吸电击杯底部数次混匀后，转移到50mL离心管(BD Falcon 50mL 锥形离心管等)，向离心管中补加SOC培养基至10mL。倾斜45 度放入摇床，37℃，225 rpm 复苏60分钟。
6. 5000rpm离心一分钟收菌，重悬后取100-200μl 涂布到含相应抗生素的SOC 平板上(因菌量较大，若全部涂板请选用直径15cm培养皿2-5个)。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养13-17小时。

注意事项：
1. 加入DNA时体积不应大于感受态体积的1/10。
2.电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4.电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和DNA的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
6. 对于连接产物转化，最好转化前乙醇沉淀DNA后用适量TE缓冲液(10mM Tris HCl,pH7.5; 1mM EDTA)重悬产物，保证DNA浓度不超过100 ng/μL。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时避免用力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞最好保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。

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大肠杆菌TG1电击感受态细胞多少钱关键词：大肠杆菌TG1电击感受态细胞,BTN160801,E.coli TG1 Electroporation-Competent Cell

枸橼酸*抗凝剂(3.2%)   100ml
腺嘌呤 PAR 73-24-5
ARB14041 植物磷脂酰甘油(PG)含量测试 Plant phosphatidylglycerol,pg ELISA KIT
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胆固醇氧化酶 STAB 9028-76-6
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大肠杆菌TG1电击感受态细胞多少钱关键词：大肠杆菌TG1电击感受态细胞,BTN160801,E.coli TG1 Electroporation-Competent Cell


·OPD干粉
编号：BTN131115
英文名称：o-phenylenediamine dihydrochloride
规格：25g
OPD和HRP反应时生成水溶性橙黄色产物，在492nm时有最大吸收峰。

储存条件：常温运输，避光保存，有效期一年。

·柱式白色念球菌RNA提取试剂盒
编号：BTN130847
英文名称：Candida albicans RNA Column extraction kit
规格：50次
OPD和HRP反应时生成水溶性橙黄色产物，在492nm时有最大吸收峰。

储存条件：常温运输，避光保存，有效期一年。

·痰液DNA提取试剂盒
编号：BTN111201
英文名称：Sputum DNA extraction kit
规格：50次
痰液是重要的检测样品，可以用于诊断肺癌，肺结核等各种疾病。但是从痰液中纯化DNA十分棘手，为此本公司开发了本产品，专用于从痰液或其他上呼吸道分泌样品中纯化DNA，用于后续的分子生物学分析。

产品特点：
1. 每次可以处理10-20mL痰液，得到2-5μg DNA。
2. 纯度高,可直接用于后续得PCR检测。
3.一管式操作，减少污染，节约成本。
4.含痰液保存液(溶液A)，便于取样和运输。
5. 无毒环保，不需要使用*酚和*仿等有毒的有机溶液。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A(痰液细胞固定液)	500ml
溶液B(痰液解稠剂)	500ml
溶液C	30ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
一：痰标本的获取与保存(注意：痰液以及下列操作的废弃液都可能含有致病性的结核杆菌等致病菌，需按传染源相关规定流程进行操作)
1. 每例患者在常规痰标本采样时，最好连续三天采集三次样品以防误差。具体做法是先在每个50mL的痰液收集管内新鲜加入10mL溶液A和10mL溶液B，待患者晨起漱口后，咳深部痰7～8口(约10-20mL)，收集到装有溶液A和溶液B混合液的痰液管收集内，混匀后储于4℃冰箱或阴凉处。第二、三天重复此操作。取足三管后一起送实验室，4℃冰箱保存直到使用。
2. 使用时，在室温反复振摇装有样品(总体积约30-40mL)的痰液收集管5～10分钟，充分混匀直到痰液中无粘稠痰块而呈均匀的液相。
3. 4℃2500g离心5分钟，弃上清。
4.沉淀再用自备的PBS液洗两遍。
5. 所得沉淀可以直接用于涂片，用于比较细胞形态学分析。也可以将细胞沉淀在0.2mL PBS缓冲液中重悬后转入1.5mL螺旋盖塑料离心管，-20℃冰箱长期保存，或立即用于下步的DNA提取。为避免盖子崩开而出现交叉污染或痰液的分枝杆菌污染环境，建议不要使用压盖式塑料离心管。同时最好设置一个阳性和一个阴性对照。
二：DNA提取
6.在上步所得的0.2mL样品中加入0.6mL溶液C。溶液C容易形成沉淀，用前需37℃加热融化并摇晃均匀。
7.室温放置10分钟。此间可以在每个管外壁上做个标记，以在下步区别向心面和离心面。
8. 振荡数秒后加入0.7mL自备的异丙醇，旋紧盖后振荡30秒混匀。
9. 把离心管的向心面对向转头，13,000-15000g室温离心至少15分钟。
10.小心移弃上清，注意不要触及管底和管壁离心面的DNA沉淀(此时可能看不见)。
11. 加入1.0mL 70%乙醇，振荡数秒后 15000g室温离心5分钟。注意：在离心机中放置离心管时将其向心面对向转头的中央。
12.小心移弃上清，注意不要触及管底和管壁离心面的DNA沉淀(此时呈膜状沉淀)。
13. 将离心管放回离心机再短暂离心数秒，然后用移液器移弃约50μL残留液体(70%乙醇)，否则它会影响后续反应。
14. 加入200μl RNase-free水，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁离心面的膜状DNA沉淀，溶液将呈混浊状，含少量不溶，短暂离心后存上清(含DNA)。
15. 直接取适量用于PCR，样品使用量不超过PCR体系的1/2。剩余DNA样品可以室温放置2小时，也可保存于-80℃保存一个月。

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