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北京百奥莱博科技有限公司
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10-beta E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )哪里卖由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多10-beta E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )等分子生物学试剂产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:10-beta E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )哪里卖
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
规格:20×0.05 ml|6×0.2 ml
优点:
可克隆大质粒和 BACs
DH10B 衍生物
无动物来源产品
概述:
该 E. coli 感受态细胞为 DH10B 衍生物,广泛应用于多种高效级转化,包括克隆大质粒与BAC。
基因型:
Δ(ara-leu) 7697 araD139 fhuA ΔlacX74 galK16 galE15 e14- f80dlacZΔM15 recA1 relA1 endA1 nupG
rpsL (StrR) rph spoT1 Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)
特性:
• 可高效转化真核来源的甲基化 DNA 或来自 PCR、cDNA 或其它来源的未甲基化 DNA
• 无需 IPTG,可进行蓝/白斑筛选
• 缺失非特异性核酸内切酶 I(endA1)活性,可用 于制备高质量质粒
• 可减少克隆 DNA 的重组反应(recA1)
转化效率:
高效级:1–3 x 109 cfu/μg pUC19 DNA
电转级:> 2 x 1010 cfu/μg pUC19 DNA
抗性:
T1 噬菌体(fhuA2)、链霉素
敏感性:
*苄青霉素、*霉素、卡那霉素、呋*(代"喃")妥因、壮观霉素、四环素
随产品提供:
SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA
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文献和实验Transformation of E. coli by Electroporation
and then pressing the UP voltage control button until the voltage reading is 5 to 10 volts higher than the desired discharge voltage. For E. coli , the standard conditions are 2.4 kv, which means setting the Pulse Control unit to 405 volts (400 volts is the desired
1.O/N (5ml E.coli in LB-->1ml into 200ml LB/37℃ 2.Grow 2-3H to A660 ~0.3-0.4 3.Chill cells 10'/ice Spin down 10',5K,4℃ 4.Wash 1X 200ml 10% glycerol (sterile)40℃; Spin down 10',5K,4℃ 5.Wash 1X 40 ml 10% glycerol--> transfer to S34 tubes & spin
3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理(Invitrogen另有平端载体供高确限度酶克隆)。不需在PCR扩增产物上加接头,即可直接进行克隆。图32 The TA Cloning® ConceptTopo TA克隆方法(Topo TA Cloning Kit)Topo TA克隆原理与TA克隆一样,唯一不同的是TA克隆用的是T
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