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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体英文名:
Goat anti-Human IgG+IgM+IgA,IgG
- 是否单克隆:
多克隆
- 应用范围:
wb,
- 供应商:
佰泰科
- 抗原:
人IgA、人IgG、人IgA
- 适应物种:
human
- 保存条件:
-20
- 目录编号:
Ov04-26
- 库存:
10000
- 级别:
亲和纯
- 宿主:
goat
- 保质期:
3年
- 抗原来源:
human
- 规格:
1mg
|
Clone: polyclonal
Purification:Immunoaffinity Chromatography
Form: buffered aqueous solution
Antibody Uses:ELISA, IHC, IF, Blot, Optimal dilution to be determined by the researcher.
storage temp: -20 ℃
Specificity: Recognizes human IgG+IgM+IgA:100%.This product is suitable for the detection of all human subclasses, isotypes and chain combinations.。
多克隆抗体, 免疫亲和层析纯化,缓冲液形态,可用于ELISA、IHC、IF、Blot,可根据实际情况,确定最佳稀释浓度。-20℃储存.
特异性: 免疫原为亲和纯化的人IgG、IgM、IgA,所产抗体特异性识别人IgG、IgM、IgA。 |
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。当前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3)酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是当前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
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文献和实验,不抗凝。【试剂】 免疫比浊仪配套IgG、IgM、IgA试剂,内含有稀释液、缓冲液、抗血清等,按说明书配制。【仪器】 全自动特种蛋白分析仪。【检测步骤】1、标本处理,3 500rpm离心l0min,分离血清。2、根据程序要求进行样品测定:(1)输入杯号;(2)选择所测项目IgG、IgM、IgA;(3)存盘;(4)编程完毕后,将标本放人标本杯中,且放人标本盘中相应位置,将所做项目的试剂放人试剂盘中相位置,确认无误后,开始运行特种蛋白分析仪。【正常参考值】 IgG:8.00~16.00g/L IgM
IgG 和IgM 介导的效应 1.对抗原的中和作用 抗体通过Fab段与抗原结合形成抗原抗体复合物,使抗原失去生物学活性或易于被吞噬细胞所吞噬。具有中和作用的抗体主要是血循环中的IgG,作用对象主要包括两类:①针对细菌外毒素,可通过阻断外毒素与敏感宿主细胞表面的受体结合,或封闭毒素的活性部位,而使其不能发挥毒性作用;②针对病毒,可阻止病毒吸附于易感靶细胞,降低病毒的传染性。 2.免疫调理作用 IgG类抗体与颗粒抗原(如细菌)结合后,其h段与吞噬
及重链和轻链之间由二硫键连接,形成的构象与英文大写字母“Y”类似。根据重链的不同将Ig分为5个同种型(isotype),分别是IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。其中IgG、IgD和IgE只有单体形式,而IgA和IgM具有由数个相同单体组成的多聚体形式。 图2:抗体结构示意图 Ig轻链和重链中氨基酸序列变化较大的区域称为可变区(variable region, V),氨基酸序列较保守的区域称为恒定区(constant region, C)。重链和轻链可变区(VH和VL)各有3个区域的氨基酸组成
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