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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体英文名:
Goat anti-rabbit IgG,IgG
- 宿主:
goat
- 应用范围:
,
- 适应物种:
,
- 库存:
大量
- 供应商:
佰泰科
- 抗原来源:
rabbit
- 是否单克隆:
多克隆
- 规格:
BR
本品为亲和纯化级羊抗兔IgG,效价测定(ELISA)>1:40万。与兔IgG免疫反应性良好;与人IgG、鼠IgG 等无交叉反应,可用于ELISA, IHC, Blot等科学研究实验。
聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度>96%。
4℃可短期存放,-20℃分装可长期储存,避免反复冻融。
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。当前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3)酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是当前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
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文献和实验上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 兔IgG 定量 EIA 试剂盒使用说明 原理 本实验采用双抗体夹心 ELISA 法。用抗兔 IgG 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 IgG 与单抗结合,加入酶标抗体,形成免疫复合物连接在板上,加入酶底物TMB ,出现蓝色,加终止液硫酸,颜色变黄,在 4 50 nm 处测 OD 值
我是用来做筛选IgG型单克隆抗体,用它做二抗,筛到的阳性克隆化和扩大培养后用SIGMA亚类试剂盒鉴定却是IgM,郁闷!!!这个试剂盒能与IGM交叉?是不是抗轻链?我这种方式不对吗?谁知道有较好的抗鼠IgG而与IgM不交叉的抗体?? 试剂盒说明书:Anti-mouse IgG-HRP Antibody FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN HUMANS. R&D Systems, Inc. 1-800-343-7475 2/21/06
第1节- 试剂1.1涂层缓冲液PBS(137 mM氯化钠,2.7 mM的氯化钾,8.1 mM的磷酸氢二钠,1.5 mM磷酸二氢钾)1.2封闭液5%脱脂乳于PBST中(0.05%Tween-20)1.3稀释剂2%脱脂乳于PBST中(0.05%Tween-20)1.4柠檬酸缓冲液3.65克柠檬酸,4.76克磷酸氢二钠,溶解于500毫升双蒸水1.5兔抗GST抗体兔抗GST抗体1.6 HRP结合山羊抗兔IgG(H + L)山羊抗兔IgG(H + L),結合过氧化物酶第2节- 分析方法注:以下方法是一个
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