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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
3年
- 抗原来源:
人
- 应用范围:
western blot
- 适应物种:
人
- 级别:
亲和纯
- 抗体英文名:
Goat anti-Human IgM,IgG
- 是否单克隆:
多克隆
- 供应商:
佰泰科
- 抗原:
人IgM
- 目录编号:
Ov04-14
- 库存:
10000
- 宿主:
山羊
- 规格:
1mg
Purification:Immunoaffinity Chromatography
Form: buffered aqueous solution
Antibody Uses:ELISA, IHC, IF, Blot, Optimal dilution to be determined by
storage temp: -20 ℃
Specificity: Recognizes human IgM:100%.No cross-reaction with human IgG and IgA.
多克隆抗体, 免疫亲和层析纯化,缓冲液形态,可用于ELISA、IHC、IF、Blot,可根据实际情况,确定最佳稀释浓度。-20℃储存.
特异性:特异性识别人IgM,与人IgG、IgA无交叉反应。
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。当前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3)酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是当前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
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文献和实验我是用来做筛选IgG型单克隆抗体,用它做二抗,筛到的阳性克隆化和扩大培养后用SIGMA亚类试剂盒鉴定却是IgM,郁闷!!!这个试剂盒能与IGM交叉?是不是抗轻链?我这种方式不对吗?谁知道有较好的抗鼠IgG而与IgM不交叉的抗体?? 试剂盒说明书:Anti-mouse IgG-HRP Antibody FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN HUMANS. R&D Systems, Inc. 1-800-343-7475 2/21/06
未染色标准品,10 μL;(2) 大鼠肝裂解液,10 μg;(3) 溶菌酶,6 μg;(4) Bio-Rad® 宽范围标准品,1:50稀释;(5) BSA ,6 μg;(6) MagicMark™ XP标准品;10 μL;(7)人IgG,6 μg;(8)人IgM,6 μg;(9)大肠杆菌裂解液,10 μg;(10) Novex® Sharp未染色标准品,10 μL。 误区:NuPAGE® 凝胶跑得太慢了 事实
到固相上。因此如用抗人IgM作为二抗,间接测定IgM抗体,必须先将标本用A蛋白或抗IgG抗体处理,以除去IgG的干扰。在临床检验中测定抗体IgM时多采用捕获包被法。先用抗人IgM抗体包被固相,以捕获血清标本中的IgM(其中包括针对抗原的特异性IgM抗体和非特异性的IgM)。然后加入抗原,此抗原仅与特异性IgM相结合。继而加酶标记针对抗原的特异性抗体。再与底物作用,呈色即与标本中的IgM成正相关。此法常用于病毒性感染的早期诊断。甲型肝炎病毒(HAV)抗体的检测模式。类风湿因子(RF)同样能干扰捕获包被
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