- 询价
- 北京
- CRISPER-CAS技术
- 2025年07月13日
企业认证
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
基因敲除/敲入动物建模
- 提供商：
艾柏森（北京）生物科技有限公司
一种来源是细菌获得性免疫的由RNA指导Cas蛋白对靶向基因进行修饰的技术。细菌利用该系统可抵御噬菌体入侵。CRISPR/Cas系统可以识别出外源DNA，并将它们切断，沉默外源基因的表达。在自然界中，CRISPR/Cas系统拥有多种类别，其中CRISPR/Cas9系统是研究最深入，应用最成熟的一种类别。具有成本低廉，操作方便，效率高等优点。
其基本作用原理为：当噬菌体病毒首次入侵宿主细菌，病毒的双链DNA被注入细胞内部。CRISPR/Cas系统会从这段外源DNA中截取一段序列作为外源DNA的“身份证”，然后将其作为新的间隔序列被整合到基因组的CRISPR序列之中。因此，这段与间隔序列对应的“身份证”被称为原间隔序列（protospacer），原间隔序列向两端延伸的几个碱基都十分保守，被称为原间隔序列临近基序（protospacer adjacent motif，PAM）。Cas9 蛋白含有两个核酸酶结构域，可以分别切割与crRNA 杂交的DNA单链（类HNH蛋白功能区）和解旋的游离单链（类RuvC蛋白功能区）。Cas9 首先与crRNA 及 tracrRNA 结合成复合物，然后通过 PAM 序列结合并侵入 DNA，形成 RNA-DNA 复合结构，进而对目的DNA 双链进行切割，使 DNA 双链断裂。
流程：
1. 在把基因序列中寻找NGG序列获得其附近20多个碱基的系列，与tracrRNA序列融合，设计出sgRNA（small-guide RNA）并合成该序列
2. 将该序列以及cas9基因连入载体
3. 转化感受态，质粒小提，测序验证
4. 细胞培养与转染
5. 建立稳定的敲除细胞株
网址：
http://www.ebiofield.com/goods-174137.html
欢迎您沟通洽谈，我们将竭诚为您服务！
办公电话：010-56256916
官方售后：400-965-8633
企业 QQ：3536562335
地 址：北京大兴经济技术开发区(亦庄)同济中路7号兴盛国际A栋4层
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验选育新方法。而 CRISPR-Cas9 技术的出现，更是极大推动了微生物基因组编辑准确性和效率的提高。【背景】泓迅科技利用 CRISPR-Cas9 技术编辑酵母菌中的一个 920bp 的 ADE1 基因。ADE1 是腺嘌呤合成相关基因，如果 ADE1 失活，则细胞将会积累红色色素，呈现红色菌落。【方法】1、质粒构建2、sgRNA 活性检测3、挑选活性较高的 sgRNA 进行基因组定点编辑4、利用基因功能变化、表性变化和测序等方法检测基因定点修饰结果。【结论】1、从颜色表型变化得知，酵母菌落变成红色菌落，可知 ADE
最近，随着基因编辑技术不断曝光，这项技术也越来越火，越来越受到关注，但大部分媒体都只是浅尝辄止进行宣传而已，实质性的怎么操作，具体的步骤却很少涉及。鉴于此，师兄就把张峰的手稿扒拉出来，分享给大家。同时也欢迎大家与我探讨，我的微信号;shixiongcoming，向我申请的时候注意，写上你的理由哦，最近加我的人太多，不注明来由的读者，别怪师兄拒绝你呦。 Genome Engineering Using CRISPR-Cas9 System Le Cong
CRISPR/Cas 是进行基因编辑的强大工具，可以对基因进行定点的精确编辑。在向导 RNA（guide RNA， gRNA）和 Cas9 蛋白的参与下，待编辑的细胞基因组 DNA 将被看作病毒或外源 DNA，被精确剪切。一、寻找目的基因的靶标使用在线设计网站 CRISPR direct，如需直接复制网址，可在生物学霸后台对话框回复 direct即可。靶点挑选要点：基因敲除靶点应设计在起始密码子附近（包括起始密码子）或者起始密码子下游的外显子范围内。不同 Cas9/gRNA 靶点在基因敲除效率
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
