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- 简石生物
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- TD422-10
- 2026年03月31日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温
- 保质期：
1年
- 英文名：
Plasmid extraction kit
- 库存：
大量
- 供应商：
简石生物
产品介绍:
- 独有的显色反应，可以直接观察到细胞裂解中和的程度，极大方便操作者判断其状态。
- 快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的质粒DNA产量高、纯度好，且内毒素含量极低。 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序 转染等各种分子生物学实验。
- 此产品仅供科研使用。
注意事项:
- 环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
- 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
- 溶液P3和结合液中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
- 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。
特性:
- DNA 纯度: 获得的质粒产量高、纯度好， 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等一般情况Abs260/280 ≥ 1.8 ，Abs260/230 ≥ 2.0，内毒素含量小于1EU/µg 。
- 质粒DNA产量: 每次可提取到约 1.2 mg ，主要依据质粒的拷贝数，培养物的成长环境等因素。
- 质粒DNA大小: 最高可达25 kb。
- 洗脱体积: ≥ 200 µl。
- 操作温度: 室温 (15-30°C)。
- 操作时间：20分钟
溶液制备:（使用之前需要配制）
如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会有微量RNA残留，在溶液P1中补加RNase A即可。
试用装的P1已添加过RNaseA
10次反应的 质粒DNA洗涤液2 应添加40 ml 100%的乙醇到10ml的质粒DNA洗涤液2中。
20次反应的 质粒DNA洗涤液 2应添加60 ml 100%的乙醇到15ml的质粒DNA洗涤液2中。
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文献和实验，不能得到足够的菌量来抽提质粒，摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型，导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多：容易导致裂解不充分，且容易超过硅胶膜柱的承载上限，最终使得质粒提取效率降低，建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当：比如在加入缓冲液重悬菌体时，菌体没有充分分散悬浮，导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解，可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂（QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂），均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用
程度等等。 现在大部分质粒提取都用试剂盒， 根据实验需要我们可以选择不同级别的产品： 1. 从纯度上看：常规操作（如酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化），普通纯度的质粒即可；对于转染实验，则需要无内毒素质粒提取试剂盒。 2. 从提取量上看：1-20μg，小量提取试剂盒；20-40μg，中量提取试剂盒；大于40μg，大量提取试剂盒。 3. 宿主菌类别上：主要分为普通细菌质粒提取试剂盒，真菌质粒提取试剂盒，酵母菌质粒提取试剂盒。 举例：SunShinecleanTM无内毒素质粒小量抽提试剂盒采用新型
原理将样品经增菌后划平板分离单菌落，挑取可疑菌落到胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤 (TPGY)培养基培养，对培养物用 DNA 提取试剂盒抽提 DNA，进行 PCR 扩增，用琼脂糖凝胶电泳检验 PCR 产物中是否含有肉毒杆菌的的特征条带，从而初步判断食品是否被肉毒杆菌污染。 二、仪器和试剂 紫外检测仪 NanoDrop1000 (Eppendorf)，台式微量冷冻离心机 Microfuge 22R（Beckman Counter），凝胶成像分析系统 Gel DocTM XR （Bio
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