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- 2026年01月02日
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- 英文名：
ADCC Bioassay Effector Cells, F Variant, Propagation Model
- 供应商：
普洛麦格
- 规格：
1 each
ADCC( 抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用 ) 是抗体作用的一种活性机制 (MOA)，病毒感染的细胞或其他病变细胞通过该机制被识别进而被细胞介导的免疫系统组分杀伤。是目前抗体药物研发的重要机制之一。ADCC 是利用抗体介导药物杀伤靶癌细胞的理想机制。抗体与细胞表面上的目标抗原结合 ( 见下图 1)。如果抗体的 Fc 段同时结合到效应细胞 ( 主要为自然杀伤细胞， Natural Killer Cells) 表面的 FcγRIIIa 受体上，两种类型的细胞即发生多重交联，导致 ADCC 作用机
制通路的激活。靶细胞的杀伤是此活化途径的终点，这一指标被用在经典的 ADCC 生物活性检测中，这些经典的检测方法利用供者的外周血单核细胞 (PBMCs) 或自然杀伤 (NK) 细胞亚群作为效应细胞。这种效应细胞难于获得，难于制备，变异性大，不稳定等多方面的问题导致方法学的难于控制，重复性差，强烈影响其作为抗体药研发生产的活性检测方法。Promega 革新性的 ADCC Bioassay Effector Cells, PropagationModel (ADCC 报告基因生物活性检测效应细胞系，可扩增型 ) 是专门为 ADCC 报告基因生物活性检测产品线开发的细胞系模型。这种基因工程改造的细胞系是在高度可控的条件下生产的。应用基因工程改造的 Jurkat 效应细胞进行扩增和建库，应用生物发光法，通过测
量 NFAT 信号通路的活化，定量检测治疗性抗体 Fc 效应因子功能。试剂盒中只包含可扩增的效应细胞 ( 以冻存形式提供 )。使用者可配合使用 Promega 的阳性靶标细胞、 Bio-GloTM 检测试剂 , 对待测抗体进行测定。经过优化的操作方法使该检测具有变异性低、准确度高的特点，并且，该生物活性检测的全部操作可在一天内完成。这些特性使得 ADCC 报告基因检测试剂盒适用于抗体药物的研究，开发和产品的批签发检测 (lot release)。ADCC Reporter Bioassay 选择了 ADCC 作用机制通路激活过程中较早的事件作为检测的读出指标：即效应细胞中由 NFAT( 活化 T细胞核因子 ) 通路介导的基因转录的激活。此外， ADCC 报告基因检测试剂盒使用工程改造的 Jurkat 细胞作为效应细胞，该细胞稳定表达了 Fcγ RIIIa 受体 ( 表达 V158 高亲和力突变体或 F158 低亲和力突变体 ) 和由 NFAT 应答元件驱动表达的萤火虫萤光素酶。 抗体在ADCC 作用机制中的生物活性通过 NFAT 通路活化产生的萤光素酶定量，而效应细胞中的萤光素酶活性通过生物发光读数定量 ( 图 1)。检
测的信号值高，且背景很低。ADCC Reporter Bioassay 具有生物活性检测所必需的明确的特异性
( 图 3， P34)。只有同时具备带有正确表面抗原的靶细胞、正确的特异性抗体及表达 FcγRIIIa 的效应细胞时才会获得良好的检测应答，其中任一缺失都不能产生应答。ADCC Reporter Bioassay 是一种适用于抗体药物发现、开发和生产整个流程的生物活性检测方法。其检测结果稳定，并且具有批签发检测所要求的精度和准确度。此外，该法可用于定量检测在 ADCC作用机制中糖基化差异对抗体 Fc 段效应因子功能的影响，这对于ADCC 效率变异分析非常有帮助。很重要的一点是 ADCC Reporter Bioassay 能够实现与经典LDH 释放的 ADCC 实验相当的抗体活性测定功能 ( 图 2)。
特点：
• 均质检测，简单方便： 减少实验组间变异性。
• 生物发光法： 灵敏，信噪比高。
• 基于 ADCC 作用机制研发： 与已有 ADCC 细胞毒性检测相关，并可替代已有检测。
• 灵活： 可调整至 384 孔板模式。
• 已使用 FDA 批准的抗体进行验证。
• 适用于药品批签发的质量控制： 指示稳定性，卓越的线性度、准确度和精度。
储存条件： 客户在收到 ADCC 效应细胞系后要迅速将细胞储存于 -140℃条件下 ( 冰箱或液氮的气相 ) 长期保存。出于安全的考虑，不要将细胞浸于液氮液面下。该产品包含两管细胞，每管 0.65mL，
细胞浓度 2×107 cells/mL。其中 1 管用于复苏、扩增、冻存细胞以建立细胞库。剩余 1 管保存备用。
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Biosensors for Characterizing the Dynamics of Rho Family GTPases in Living Cells
. Shen, F. and Price, J.H. 2006. Melanoma co‐culture outgrowth model for testing complete tumor contaminant ablation. Cytometry A 69:573‐581
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