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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
RNase-Free Water
- 库存:
313
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京现货无RNA酶水(国产,进口),我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货无RNA酶水(国产,进口)
规格:100ml
编号:WE0217
产地:国产|进口
本品为不含RNase的水,常用于RNA的提取纯化、RT-PCR等分子生物学实验。
关于北京现货无RNA酶水(国产,进口)的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·生物素化驴抗人IgG(H+L)
编号:WE0371
英文名称:Donkey Anti-Human IgG,Biotin Conjugated
规格:100μl
本产品为生物素标记的经亲和纯化的驴抗体,特异识别人IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应。生物素(Biotin)与链霉亲和素(Streptavidin,SA)具有极高的亲和力,反应呈高度专一性。每个链霉亲和素分子具有4个生物素分子结合位点,因此,链霉亲和素可同时以多价形式结合生物素。生物素化的抗体与辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的链霉亲和素联合使用,将检测信号级联放大,最后通过显色反应或化学发光可检测到微量蛋白。
免疫原:人IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
应用范围:
WB 酶链亲和素检测(1:20000-400000)
ELISA(1:20000-400000)
Enzyme immunohisto/cytochemistry(1:500-5000)
Fluorescence Immunohisto/cytochemistry(1:200-1000)
Flow cytometry(1:200-1000)
·2×BAmp MasterMix(含染料)
编号:WE0106
英文名称:2×BAmp MasterMix(With Dye)
规格:5ml
BAmp MasterMix由BAmp DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。BAmp DNA Polymerase是一种兼具高扩增效率和高保真性的耐热聚合酶。其主要特点是可以高效扩增长片段DNA,尤其在扩增>10 kb的DNA片段方面,其优势更加明显,所扩增的片段最长可以达到40 kb。该酶具有高度的延伸和校对能力,保真度高于普通Taq酶。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷,可最大限度地减少人为误差和污染。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定,重复性好。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。适用于构建基因图谱、序列测定及分子遗传学研究等。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×BAmp MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意:2×BAmp MasterMix含有BAmp DNA Polymerase,3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BAmp MasterMix(With Dye) | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 30 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,BAmp DNA Polymerase的扩增效率为2.0 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
北京现货无RNA酶水(国产,进口)关键词:无RNA酶水,WE0217,RNase-Free Water
·细胞周期与凋亡检测试剂盒
编号:WE0326
英文名称:Cell Cycle and Apoptosis Detection Kit
规格:50次
细胞周期与凋亡检测试剂盒是一种采用经典的碘化丙啶染色方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。本试剂盒每个样品的细胞数量可以为10-100万。
碘化丙啶是一种双链DNA的荧光染料。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光,并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定,然后根据DNA含量的分布情况,可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。碘化丙啶染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片断在染色过程中丢失,因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染,即荧光强度小于1,在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰,即凋亡细胞峰。细胞发生凋亡时,由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂,产生凋亡小体,使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期,细胞对前向角光散射的能力显著降低,对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期,前向和侧向光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察细胞凋亡情况。
本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测,则必须把组织消化成单细胞状态,才可以进行检测。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Dyeing Buffer | 22.5ml |
| 25×Propidium Iodide,PI | 750μl |
注意事项:
1、本试剂盒需使用流式细胞仪进行检测。
2、需自备PBS、95%乙醇和RNase A。
3、荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
4、PI对人体有刺激性,请注意适当防护。
5、请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤:
1、细胞样品的准备:
a.对于贴壁细胞:小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞,至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时,加入前面收集的细胞培养液,吹打下所有的贴壁细胞,并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50μl左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞,小心吸除上清。再次加入1ml冰浴预冷的PBS,重悬细胞。
b.对于悬浮细胞:1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50微升左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1ml冰浴预冷的PBS,重悬细胞,并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞,小心吸除上清,可以残留约50μl左右的PBS,以避免吸走细胞。再次加入1ml冰浴预冷的PBS,重悬细胞。
2、细胞固定:
取4毫升冰浴预冷的95%乙醇,低速涡旋震荡的同时加入1毫升细胞悬液,混匀后4℃固定2小时或更长时间。固定12-24小时可能效果更佳。1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50μl左右的乙醇,以避免吸走细胞。加入约5ml冰浴预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞,小心吸除上清,可以残留约50μl左右的PBS,以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞,避免细胞成团。
3、PI染色液的配制:
参考下表,根据待检测样品的数量配制适量的PI染色液:
| 1个样品 | 6个样品 | 12个样品 | |
| Dyeing Buffer | 0.4ml | 2.4ml | 4.8ml |
| 25×Propidium Iodide,PI | 15μl | 90μl | 180μl |
| RNase A(10mg/ml,自备) | 1μl | 6μl | 12μl |
注:配制好的PI染色液短时间内可以4℃保存,宜当日使用。
4、染色:
每管细胞样品中加入400μl PI染色液,缓慢并充分重悬细胞沉淀,37℃避光温浴30分钟。随后可以4℃或冰浴避光存放。染色完成后宜在24小时内完成流式检测,最好能在当日完成流式检测。
5、流式检测和分析:
用流式细胞仪在激发波长488 nm波长处检测红色荧光,同时检测光散射情况。采用适当分析软件进行细胞DNA含量分析和光散射分析。
储存条件:-20℃,避光保存
北京现货无RNA酶水(国产,进口)关键词:无RNA酶水,WE0217,RNase-Free Water
25988-63-0 Poly-L-Lysine 多聚-L-赖*酸(15-30万)
NF-206 羊抗人IgG血清
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邻甲*(代"酚")酞络合剂 CSA 2411-89-4
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BL1318 dNTPs Mix(10mM each)
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1、【仪器名称】:进口代谢笼。 2、【仪器型号】:2602动物器具。 3、【生产厂家】:意大利TECNIPLAST公司。 4、【检测适用范围】:完全地分离粪便和尿液,尿液不会被污染。 5、【仪器使用优点、缺点】:独特的漏斗和锥形体设计保证了粪便和尿液的分离收集,尿液不会被污染
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