AP标记亲和素现货供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")AP标记亲和素现货供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：AP标记亲和素现货供应
品牌：百奥莱博
编号：BTN131087
规格：100mg
英文名：AP-Avidin
本产品为碱性磷酸酶标记的亲和素，SDS-PAGE检测均一性。每mol亲和素含有大约1mol碱性磷酸酶。

产品应用：
1．在内源过氧化物酶会对实验造成影响的免疫组化中使用；
2．免疫印记；
3．酶联免疫吸附试验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性单位定义：1单位表示在37℃，pH9.5情况下，每分钟从对硝基酚磷酸盐释放1.0μmol对硝基酚。

除AP标记亲和素现货供应外，我公司正在打折促销以下产品：

·凋亡DNA提取试剂盒
编号：BTN130812
英文名称：Apoptotic DNA extraction kit
规格：24次
细胞凋亡是生命个体中的调控基因为了维持个体生命，调控细胞进行新陈代谢，促使不需要的细胞或者具有危险性的细胞自我凋亡(自杀)的现象，与细胞的发生、分化、生理现象(特别在免疫方面)有着密切关系。细胞凋亡时，染色体DNA以核小体为单位(185bp)进行DNA片断化产生DNA Ladder，这些被片断化了的DNA片段，可以使用电泳的方法进行检出。本试剂盒能够从培养细胞中选择性地提取片断化DNA，能够最大限度地抑制起妨碍作用的完整的染色体DNA的混入，并可以通过电泳法进行高效检出。

产品特点：
1.操作简便：使用Ready-to-Use型试剂。
2.高灵敏度：能够高灵敏度地检出凋亡细胞的片断化DNA。
3.高特异性：抑制完整的染色体DNA的混入，选择性地提取片段化DNA。
4.快速操作：整体操作约需2.5小时。
5.定量性：与荧光色素组合可以对片断化DNA进行定量。
6.安全性：不使用*酚*仿等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	120ml
溶液B	1ml
溶液C	120μl
RNase A溶液(2mg/mL)	60μl
Proteinase K溶液(10mg/mL)	30μl
微量核酸沉淀剂	3ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.冰上操作，将细胞样品(106-107)重悬于0.5mL Hanks平衡盐溶液(自备)或其他常用细胞缓冲液中。
2.将细胞重悬液与5mL溶液A混合，轻柔颠倒混匀后冰上放置4小时。如果暂时不用，可在-20℃最长保存四周。
3.800g离心5分钟，彻底移弃上清。
4.在细胞沉淀中加入40μL溶液B重悬细胞沉淀，室温放置至少30分钟，期间摇动数次。为方便离心，可将细胞重悬液转移至新的0.5mL或1.5mL Eppendorf离心管中，
5.800g离心5分钟，将上清移入到新的Eppendorf管中，并在SpeedVac上真空离心浓缩15分钟。
6.向浓缩物中加入5μL溶液C和2.5μl RNase A溶液(2mg/mL)，混匀后37℃保温30分钟。
7.再加入1μl Proteinase K溶液(10mg/mL)溶液，37℃保温30分钟。
8.加5μl电泳上样缓冲液(自备)，常规0.8%琼脂糖电泳分离、EB染色并观察电泳条带。
9.如果所得凋亡DNA溶液需要纯化(溶液中有proteinase K等)，需要继续纯化，则加入50μL酚*仿混合液(自备)，震荡3分钟混匀，13000g离心3分钟后转移上清到新离心管中，再加入2倍体积(约100μL)微量核酸沉淀剂，混匀后13000g离心15分钟，弃上清，再用1mL 75%的乙醇洗涤一次，空气放干后加入适当体积的水或TE溶解沉淀，所得溶解即凋亡片段DNA溶液。

使用效果：

使用本产品提取细胞DNA效果图。M为DNA Marker，最大条带1.3Kb。
1为正常非凋亡细胞DNA。2为凋亡细胞DNA。


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·超敏型BCA法蛋白定量试剂盒
编号：BTN80816
英文名称：Hypersensitive BCA Protein Assay Kit
规格：500次
本产品是在BCA法蛋白定量试剂盒(BTN80815)基础上改进的超敏蛋白定量试剂盒，尤其适合对低浓度的蛋白质溶液进行定量分析。

产品特点：
1．超敏感，最低检测浓度为0.5μg/mL。
2．线性范围在 0.5～20μg/mL，尤其适用于低浓度的样品。
3．对大多数离子型和非离子型去污剂不敏感，但对Cu的还原剂和螯合剂敏感。
4．比 Lowry法更加简单快捷，45分钟内完成测定。
5．试剂稳定，室温可以放置两年，工作液1 天内有效。
6．终产物稳定，检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
7．最短可以检测双肽，所以适合于分子量较小的蛋白质，而Bradford法需要一定大小的蛋白质。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	250ml
溶液B	250ml
溶液C	10ml
BSA标准品(2mg/mL)	1ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存(但BSA 标准品需要低温运输，-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：(96板操作模式)
1．将本试剂盒提供的BSA标准品用自备的样品缓冲液稀释成浓度为0.04μg/uL的工作液待用(一次测试所需BSA标准品工作液的用量参见下表)。
2．取一块96孔板，先进行编号(编号可以根据样品数增加)，并按照下表加入BSA工作液、待测样品和样品缓冲液：

编号	BSA工作液 (μL)	待测样品 (μL)	样品缓冲液 (μL)	总体积 (μL)	蛋白含量 (μg)
0	0	0	150	150	0
1	5	0	145	150	0.2
2	10	0	140	150	0.4
3	20	0	130	150	0.8
4	40	0	110	150	1.6
5	60	0	90	150	2.4
6	80	0	70	150	3.2
7	100	0	50	150	4.0
样品1	0	?μl	补到150	150	未知
样品N	0	?μl	补到150	150	未知

3．计算 BCA工作液需要量：根据样品数量(包括制备标准曲线的样品的数量)和每个样品需要0.15mL BCA工作液的比例，计算所需BCA工作液的用量。
4．配制 BCA工作液：先将溶液A、溶液B和溶液C按50：48：2的比例混合，所得溶液即BCA工作液。比如：5mL溶液A + 4.8mL溶液B + 200μL溶液C。
5．将1倍体积(即150μL)的BCA工作液加入到各孔中并混匀。如果用排枪加入并混匀则更好。也可把96孔板放在振荡器上振荡30秒混匀。
6．60℃放置1小时。
7．冷至室温，10分钟内完成后续测定，否则化学反应还在继续进行，光吸收值会慢慢升高，每10分钟会升高2.5%左右。
8．在 562nm下比色测定其余样品的光吸收。如酶标仪没有562nm的设定，可用接近的波长检测，如570nm。
9．将编号为0 号的样品(对照)的读数从其余所有样品(包括0 号样品，其读数变成零)中扣除。
10．以0-7 号样品的BSA含量(μg，见上表最右行)为横坐标，以上一步得到的这几个样品的吸光值为纵坐标，绘出BSA的标准曲线。
11．再将待测样品的吸光值(减去0 号样品的读数后)标在标准曲线上，其在横坐标上对应的蛋白含量(μg)就是待测样品中的蛋白质含量，除以样品稀释液总体积(20μL)，乘以样品稀释倍数即为样品实际浓度(单位：μg/uL)。

注意事项：
1．加工作液后也可以在室温放置2小时，或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时，吸光度会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。所以，如果蛋白质浓度较低，可以改在60℃孵育60分钟。
2．待测样品浓度在20～2000 微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
3．在一定浓度范围内BCA法测定蛋白浓度不受下列化学物质的影响：

名称	在此浓度下不受影响
Ammonium Sulfate	1.5 M
Brij-35	5.0%
CHAPS	5.0%
EDTA	10mM
Hepes	100mM
Glycine，pH2.8	100mM
Guanidine HCl	4.0 M
Tween 20、60、80	5.0%
SDS	5.0%
Sodium Acetate pH5.5	200mM
Sodium Chloride(NaCl)	1.0 M
Sucrose	40%
Sodium Hydroxide(NaOH)	0.1 M
NP-40	5.0%
Triton X-100	5.0%
Urea	3.0 M

4．本方法受样品中螯合剂和还原剂的影响，所以需确保EDTA浓度不高于10mM，二硫苏糖醇不高于1mM，β-巯基乙醇不高于1mM，没有任何 EGTA，否则建议使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒(BTN80815)。
5．本试剂受温度和时间影响较大，故需要准确定时和定温，以保证精确定量。


AP标记亲和素现货供应关键词：AP-Avidin,AP标记亲和素,BTN131087


·10%Sarkosyl溶液(不含RNase)
编号：BTN100890
英文名称：RNase-free Sarkosyl
规格：250mL

·超纯水
编号：BTN100935
英文名称：Ultrapure Water
规格：250mL
本品是指将水中的导电介质几乎全部去除，又将水中不离解的胶体物质、气体和有机物均去除至很低程度的水。可以用于各种分子生物学实验。

储存条件：常温运输和保存、有效期两年。

·Southern级真菌DNA提取试剂盒
编号：BTN130943
英文名称：Fungus DNA extraction kit(Southern Grade)
规格：10次
本品是指将水中的导电介质几乎全部去除，又将水中不离解的胶体物质、气体和有机物均去除至很低程度的水。可以用于各种分子生物学实验。

储存条件：常温运输和保存、有效期两年。

·大肠杆菌JM109感受态细胞
编号：BTN90207
英文名称：E.coli JM109 Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。

产品特点：
1. 使用pUC19质粒检测，转化效率可达108，-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
2. recA1和endA1突变阻止对克隆DNA的修饰或对宿主菌染色DNA的重组，提高纯化质粒的产量和质量。
3. JM109菌株基因型：endA1 recA1 gyrA96 thi hsdR17(rk-mk+)relA1 supE44 D(lac-proAB)[F’traD36 proAB laqlqZ Δ M15 ]
4. 本产品质量稳定，使用方便，质优价廉。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：无菌超纯水，SOB和SOC液体培养基，相关抗菌素。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

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