Hoechst 33258干粉现货促销

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百奥莱博专业生产销*(代"售")Hoechst 33258干粉现货促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：Hoechst 33258干粉现货促销
规格：10mg
产地：国产|进口
英文名：Fluorescent Dye Hoechst 33258，Powder
品牌：百奥莱博
编号：BTN130864
Hoechst 33258是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂，它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光，其常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

CAS号：23491-45-4
分子式：C25H24N6O•3HCl
分子量：533.88

产品特点：
1．Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。
2．Hoechst 33258常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
3．Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；其和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。
4．Hoechst 33258溶于水，溶解度可达10mg/mL。用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/mL。

储存条件：低温运输，-20℃干燥避光保存，有效期一年。

使用举例：
1．用PBS或合适的缓冲液制备10～50 µM Hoechst33258染料。
2．将1/10细胞培养基体积的Hoechst染料溶液加入细胞培养物中。
3．在37℃培养细胞10～20分钟。
4．用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
5．用带有350nm激发波长，460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

Hoechst 33258干粉现货促销正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·CpG甲基转移酶(M.SssI)
编号：BTN120511
英文名称：CpG Methyltransferase(M.SssI)
规格：100U
CpG甲基转移酶(M.Sssl)能识别双链DNA上的二核苷酸序列并甲基化其中的所有胞嘧啶残基(C5)，其甲基化过程如下图所示：


产品用途：
1．阻止限制性内切酶的切割。
2．CpG甲基化依赖性基因表达的研究。
3．研究特异序列与DNA大沟的相互作用。
4．改变DNA的物理特性。
5．对DNA统一进行［3H］ 标记。
6．减少限制性内切酶的酶切位点数目，提高限制性内切酶的特异性。

备注
1．CpG甲基转移酶(M.Sssl)可以特异性地模拟高等真核生物基因组的修饰模式，因而可用于研究高等级真核生物体内胞嘧啶甲基化的功能。与哺乳动物甲基转移酶不同，CpG甲基转移酶对未甲基化和半甲基化的DNA底物的甲基化效率相同，因此该酶是更为有效的DNA修饰工具。
2．只要限制性内切酶的识别位点含有CG序列或此二核苷酸的重叠序列，CpG甲基转移酶均能有效地阻止其发挥切割活性。需要注意的是，CpG甲基转移酶使DNA甲基化，而E.coli中的Mcr和Mrr的限制作用不受甲基化影响，故应使用Mcr-、Mrr-的E.coli菌株作为转化的宿主菌。
3．胞嘧啶残基被甲基化后，可影响DNA的物理特性，如：降低Z-DNA形成的自由能，增加DNA的螺旋程度，改变DNA十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联*的反应性降低，5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。
4．MgCl2并不是必需的辅因子。Mg2+存在时，M.Sssl更倾向于分散甲基化，而不是连续甲基化，同时，M.Sssl还具有拓扑异构酶的活性。

活性定义：1单位指在20μL反应体系中，37℃条件下，1小时能保护1μgλDNA不被BstUl限制性内切酶切割所需要的酶量。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


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·T3体外转录试剂盒
编号：BTN91108
英文名称：T3 in vitro Transcription Kit
规格：50次
本试剂盒是基于沙门氏噬菌体T3 RNA聚合酶的RNA体外转录试剂盒，它利用含有T3启动子的模版DNA，以NTP为底物，从T3启动子下游开始合成与模板DNA中一条链互补的RNA，简单快速获得大量的RNA分子。

产品特点：
1. 即开即用，用户只需提供含T3启动子的DNA模板即可以进行体外转录实验，不需耍单独准备每一个成份。
2. 单溶液预配液，减少加样次数，避免了操作误差，增加了可重复性。
3. 模板DNA可以是线性化的质粒DNA，也可以是PCR扩增产物。
4.可以合成的RNA的最佳长度在20nt到5000nt之问。
5.产品配方经过精心优化，每μg DNA模板可以合成2-6μg RNA。
6. 得到的RNA可以用于RNA结构研究、核解生物化学、体外翻译、RNA-蛋白质相互作用、反义技术、SELEX技术和RNA干扰(RNAi)等实验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
转录预配液(2×)	0.5mL
阳性对照DNA(1.3 Kb片段)	20μL(10ng/μL)
T3 RNA聚合酶混合液	50μL
RNase-free水	1mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、制备DNA模板
PCR片段和质粒DNA都可以用作体外转录的模板，但是必须注意以下几点：
1)必须使用线性化的DNA。如果是质粒DNA，则必须先用适当的限制性内切酶切成线状。
2)是需要转录的DNA序列的上游必须有T3启动子。如果模板是PCR产物，则可以在设计引物时将T3启动子序列(5´AATTAACCCTCACTAAAGG 3´)加上。如果是将DNA片段克隆到载体上，则需要选择有T3启动子的载体，并且克隆位点必须位于T3启动子下游。
3)是需要转录的DNA序列的下游端最好不要是3´突出。如果是3´突出(如选择了Pst I来线性化质粒)，则最好用T4 DNA聚合酶修平。
4)是必须保证DNA模板中没有RNase。由于提取质粒DNA的过程中一般要使用大量的RNase A，因此质粒DNA一般都有严重的RNase A污染，所以在用作模板前，最好采取胶回收得方法回收质粒DNA。并且加入少量总RNA一起保温，然后电泳检测RNA是否被降解，以此判断纯化的DNA模板是否有残留RNase A。

二、体外转录反应
1.在一个RNase-free的塑料离心管中，在室温下(不是在4℃下)按次序加入下列成分：

成分	加入量	备注
DNA模板	xμl	总量在50 ng-1μg(如果模板是PCR片段，建议用50ng左右；如果模板是质粒DNA，建议用1μg左右；如果用本产品提供的阳性对照，建议用4μL)
转录预配液，2×	10μl	需室温时使用
T3 RNA聚合酶混合液	1μl	本成分还含其他促进剂，所以是混合物
RNase-free水	补水到20μL

注：此为20μL反应体系的用量，对其他体积的反应体系，各成分的用量可以按比例增减。如果需要标记RNA探针，则需要定做NTP分开而不是NTP预先混合的试剂盒。如果需要得到加帽RNA，则需要加入自备的加帽修饰核苷酸(本公司有各种加帽修饰核苷酸)。
2. 37℃保温1-2小时。注意：延长保温时间并不能提高产量。
3. 70℃加热10分钟灭活T3 RNA聚合酶。
4. 取1-3μL电泳检测转录效果。一般1μg DNA可以合成 5-10μg的RNA。
5. 得到的RNA可以放-80℃保存。

若需进一步去除DNA模板，可参考下列操作步骤，但所用试剂需另行购买，本试剂盒不提供。
1.在体外转录结束后，在反应体系中加入3-5U自备的RNase-free DNase(BTN90903；3-5U/μL)。
2. 37℃保温15-30分钟。
3. 补水到100μL，
4. 用自备的等体积(100μL)的Tris饱和酚-*仿抽提一次去除残留的DNase和RNA聚合酶。
5.在上清中加200μL自备的微量核酸沉淀剂(BTN50903；用前需要摇晃混匀)，振荡后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
6. 加入1mL 75%乙醇，震荡10秒后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
7. 短暂离心数秒，用枪头吸弃上清。
8. 晾干半分钟，所得沉淀即去除DNA模板后的RNA。可溶于RNase-free水中后立即使用或放-80℃长期保存。

疑难解答：
1、没有RNA产物。最常见原因是DNA模板有RNase污染，测试方法是用纯化的RNA跟模板DNA一起保温，再检测RNA是否降解。本试剂盒缓冲液和酶混合液中有RNase inhibitor，如果模板RNase污染严重，可能需要用户补加RNase inhibitor。
2、RNA产量低。最常见的原因是DNA模板序列。在转录序列的第一个和第二个碱基最好都是G，在前14个碱基内避免有U存在。
3、RNA长度比预期的短。可能是模板序列中有T3 RNA聚合酶的终止序列。可以改用SP6或T7体外转录试剂盒(启动子也必须改成SP6或T7启动子)。
4、RNA长度比预计的长。T3 RNA聚合酶跟Taq DNA聚合酶一样，有不依赖于模板的加尾功能，最多有一半的RNA可以带一个或两个碱基的尾巴。如果RNA长度比预计的长很多，使用的模板又是质粒DNA，则可能是质粒DNA线性化不彻底。
5、5´单磷酸还是三磷酸。如果使用GTP，则得到的RNA是三磷酸，体外转录时如果保温时间太长(如12小时)，则有50%的三磷酸会变成单磷酸。如果在转录体系中加入GMP，则T3 RNA聚合酶将优先使用GMP，所得RNA产物中5´端是单磷酸的比例将大大增加。


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9005-79-2 糖元Ⅱ Glycogen fromoyster TypeⅡ
9003-98-9 (Dnase Ⅰ)DeoxyribonueleaseⅠ
67-42-5 乙二醇-双-(2-*基乙基)四乙酸 EGTA
PY01-053  无水*化*  500克  
十二烷基吡喃葡萄糖苷 L-Arginine 59122-55-3
N-(2-羟yi基)哌*(代"嗪")-N-3-丙磺酸 BPA 16052-06-5
酚试剂 Enzyme Stabilizer APD 38894-11-0
9005-65-6 Tween-80  吐温-80
BTN130957 免RNA提取RT-PCR试剂盒 Cell Lysate RT-PCR Mix
ARB14090 牛腹泻病毒酶标法分析 
海柯皂苷元 Florfenicol 467-55-0
ARB13363 牛卵泡抑素(FS)代做ELISA实验 Bovine follistatin,fs ELISA KIT
BL0936 生物素化羊抗人IgG抗体
ARB12695 大鼠凝血酶受体(TR)血清中含量检测 Rat thrombin receptor,tr ELISA KIT
ARB13253 小鼠游离甲状腺素(FT4)酶免分析 Mouse free thyroxine,ft4 ELISA KIT
ARB11859 人糖皮质激素受体β(GR-β)检测服务 Human glucocorticoid receptor-β,gr-β ELISA KIT
玉米蛋白 Sodium hyaluronate 9010-66-6
BTN130905 超级杂交液(芯片) SuperHyb Solution for Chip

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