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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
Streptavidin,AP Conjugated
- 库存:
810
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
AP标记的链霉亲和素优惠价由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多AP标记的链霉亲和素等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:AP标记的链霉亲和素优惠价
英文名:Streptavidin,AP Conjugated
产地:国产|进口
规格:0.5mL
编号:BTN131022
本产品为碱性磷酸酶(AP)标记的链霉亲和素,可用于检测生物素分子及生物素标记物质。此产品建议使用浓度:
➤ 免疫印迹:1:200~500
➤ 免疫组化:1:200~1000
➤ Immunocytocehmistry:1:200~1000
➤酶联免疫吸附试验:1:200~2000
储存条件:低温运输,4℃保存,请勿冷冻。有效期一年。
更多有关AP标记的链霉亲和素优惠价的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·DNA探针变性液
编号:BTN131208
英文名称:DNA Probe Denaturation Solution
规格:10mL
杂交反应进行时,探针和靶核酸都必须是单链的。如果用双链DNA探针进行杂交(包括检测RNA时),双链DNA探针在杂交前必须进行变性。本产品就是即用型的DNA探针变性液,专门针对DNA探针在杂交前进行变性处理。
产品特点:
1. 即开即用。
2. 使用方便快捷,可用于核酸杂交。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
使用方法:
一、根据探针和靶分子的不同,分别按下面不同情况计算杂交分子的Tm 值
1. 对 DNA-DNA杂交,其Tm = 81.5 + 16.6×log10[Na+] + 0.41×GC%–500/L
说明:L是探针或靶分子的长度(用两者中最短的一个)
GC%是探针或靶分子中的GC 百分比(用两者中最短的一个)
Na+浓度是超级杂交液中Na+的浓度,为0.75 M,16.6×log10[Na+]=(-2.07)
2. 对 DNA-RNA杂交,其Tm 值比DNA-DNA的Tm 值要高10-15℃。
3. 对 RNA-RNA杂交,其Tm 值比DNA-DNA的Tm 值要高20-25℃。
4. 对 Oligo探针杂交,Tm=GC 数量×4℃+AT 数量×2℃。
二、确定最佳杂交温度(预杂交温度跟杂交温度应该一样)
1. 对于大于200bp的DNA-DNA杂交,最佳杂交温度一般比Tm低15-25℃,一般选择68℃。
2. 对 RNA-RNA或DNA-RNA杂交,最佳杂交温度一般比Tm低15-25℃。
如果这样计算出的杂交温度很高(如高于70℃),则RNA 容易降解,所以最好选用含甲酰胺的超级杂交液(超级杂交液B型),以便能在42℃完成杂交。
3. 对 Oligo探针的杂交,最佳杂交温度一般比Tm低5℃。由于Oligo 较短,更容易受各种因素影响(如错配率、修饰碱基比例等),所以最佳温度需要适度摸索和优化。
三、确定洗膜温度
一般使用0.1×SSC做洗膜液,在此条件下的最佳洗膜温度比Tm低5-12℃,一般情况下可以在55℃进行洗膜。Oligo探针可以室温洗膜。
四、预杂交步骤
预杂交就是用不含探针的超级杂交液跟印迹膜进行孵育,其目的是用所含的非特异性DNA分子(鲑精DNA或小牛胸腺DNA)及其它高分子化合物将印迹膜上会非特异地吸附探针分子的位点封闭,否则这些位点会吸附标记的探针,造成高背景。
1. 将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的6×SSC溶液中,使其充分湿润。
2. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋最好预先封口,再剪掉一角,留一个小口),按每平方厘米印迹膜加0.2mL超级杂交液的比例沿小口加入超级杂交液,然后用塑料封口机将口封牢。
3. 将此塑料袋浸没入温度设定在最佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中,保温1-2小时,延长到12-16小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停的摇动状态中,使超级杂交液与印迹膜充分接触。
五、杂交步骤
1. 如果标记的探针是双链核酸,则需经变性处理。具体操作是:根据探针浓度和杂交所需探针的量计算出所需的探针体积,取出所需体积的探针到一干净的硅化的塑料离心管中,加入等体积的本产品,吹打混匀后室温放置5分钟变性后,将探针样品放入冰浴中冷却,加入0.05倍体积的自备的1 M的Tris-Cl溶液(pH7.2)以及等体积的自备的0.4 M的HCl溶液。
将探针样品保存在冰浴中直至需要。如果是单链DNA或RNA探针,则不需变性,直接使用。
2. 将单链探针或变性后的双链探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪刀剪一小口,加入探针后用热封机封口)。探针的加入量视探针标记效率而定,一般要求终浓度不能低于1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷贝基因,探针的加入量应加大,而对于检测克隆的基因片段,则探针的量可减少。如果是放射性探针,应将此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
3.在选定的杂交温度下继续保温,时间一般为6-12小时。
六、洗膜步骤。
注意在下面的所有操作过程中,一定不要使印迹膜干燥。此步是将与印迹膜非特异结合的探针分子洗去而只留下特异结合的探针分子。由于非特异性杂交的杂交分子解链温度较低,热稳定性较差,在一定的温度和较低的离子强度下,即可洗掉。
1.杂交完毕,取出塑料袋,剪去一角,倒出所有的含探针的杂交液。此含探针的杂交液可以多次使用再倒弃。
2. 剪开杂交袋,用镊子取出印迹膜,浸没于大量的2×SSC(含0.5 % SDS)溶液中,室温下振荡漂洗15分钟。
3. 重复上步操作一次。
4. 将印迹膜转移至0.1×SSC(含0.1% SDS)溶液中,在计算好的洗膜温度下振荡漂洗30分钟至1小时。
5. 重复上步操作一次。如果是同位素标记探针,则需要重复至用盖革计数器在无核酸区域检测不出放射信号为止。
6. 将印迹膜转移到滤纸上,吸去表面液体后印迹膜即可用于后续检测。
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·DNA marker(λDNA/BstE II)
编号:BTN90602E
英文名称:DNA ladder(λDNA/BstE II)
规格:50次
本系列产品为传统的酶切分子量标准,由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后,加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知,每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。
每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5uL。
使用效果:

疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
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68157-60-8 Forchior fennron *吡*脲
ARB11057 人苗条素受体(LR/Ob-R)含量检测 Human leptin receptor,lr/ob-r ELISA KIT
咖啡酸 DMBA 331-39-5
硝*吡*(代"啶") Clarithromycin 21829-25-4
乙酸纤维素 Sodium 4-amino-1-naphthalenesulfonate 9004-35-7
偏钒酸* BUCHE 16519-65-6
BTN100212 一管式点突变试剂盒 One-Tube Mutagenesis Kit
ARB11965 大鼠CD30分子(CD30)elisa测定使用说明书 Rat cluster of differentiation 30,cd30 ELISA KIT
乙二*(代"胺")四乙酸二**盐 Coumarin 23411-34-9
4-乙基*酚 Acid red 66 123-07-9
BL0800 人血清IgA抗原(液体)70-80%纯度
SJ0401 L-Valine L-缬*酸
ARB14081 犬降*素原(PCT)elisa检测操作说明书
2,2-二羟甲基丁酸 2,6-Dimethylphenol 10097-02-6
27025-41-8 L-谷胱甘肽(氧化型)/氧化型谷胱甘肽
ARB12486 大鼠总抗氧化能力(T-AOC)ELISA代测服务
结合珠蛋白 TBHBA 9087-69-8
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