AP标记的链霉亲和素厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

AP标记的链霉亲和素厂家由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多AP标记的链霉亲和素等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：AP标记的链霉亲和素厂家
产地：国产|进口
英文名：Streptavidin，AP Conjugated
品牌：百奥莱博
规格：0.5mL
编号：BTN131022
本产品为碱性磷酸酶(AP)标记的链霉亲和素，可用于检测生物素分子及生物素标记物质。此产品建议使用浓度：
➤ 免疫印迹：1:200～500
➤ 免疫组化：1:200～1000
➤ Immunocytocehmistry：1:200～1000
➤酶联免疫吸附试验：1:200～2000

储存条件：低温运输，4℃保存，请勿冷冻。有效期一年。

关于AP标记的链霉亲和素厂家的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·硫氧还蛋白
编号：BTN130870
英文名称：Thioredoxin
规格：5mg
硫氧还蛋白是一类广泛存在的热稳定的作为*载体的蛋白质(约12kDa)。在许多还原反应中作为*供体，特别是核苷二磷酸变成相应的脱氧产物和光依赖性的还原反应中。也以结构域的形式出现于二硫键异构酶中，在蛋白折叠过程中，硫氧还蛋白可以催化二硫键的正确形成。

·大肠杆菌SURE化学感受态细胞
编号：BTN90208
英文名称：E.coli SURE Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌SURE菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。该菌株主要是用来克隆不稳定DNA结构如重复序列、二级结构(如Z-DNA)等。

菌株基因型：

 

基因型	表现型
endA1	核酸内切酶I缺失
gyr A96	具有*啶酮酸抗性
lac	不能利用乳糖
rec B & rec J	DNA重组修复功能缺失
relA1	允许在无蛋白质合成时有RNA合成
sbcC	允许基本重组
supE44	抑制琥珀突变，为某些噬菌体必需
thi-1	需要硫*才能生长
umuC::Tn5	卡那霉素抗性
uvr C	不能切除变异碱基
mcrA△(mcr CB-hsdSMR-mrr)171	DNA甲基化系统缺失
F’[ lacIlac Z△M15 Tn10 proAB+]	提供α-互补所需的ω片断，具有四环素抗性

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


AP标记的链霉亲和素厂家关键词：Streptavidin，AP Conjugated,BTN131022,AP标记的链霉亲和素


·胃蛋白酶
编号：BTN131027
英文名称：Pepsin
规格：250mg
胃蛋白酶是一种消化性蛋白酶，由胃部中的胃粘膜主细胞所分泌，功能是将食物中的蛋白质分解为小的肽片段。胃蛋白酶优先在*丙*酸、亮*酸、酪*酸和色*酸的C 端进行水解。本产品可单独或与其他蛋白酶联合在质谱分析和其他应用中进行蛋白分析，包括多肽图谱、蛋白鉴定、检测翻译后修饰等。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

·动物细胞核蛋白微量制备试剂盒
编号：BTN90613
英文名称：Animal Nuclear Protein Miniprep Kit
规格：25次
DNA只存在于细胞核内，因此参与转录调节和DNA复制的蛋白质主要存在于细胞核中，要研究蛋白质与DNA的相互作用，首先需要制备能够与DNA作用的天然细胞核蛋白质。目前、细胞核蛋白质制备方法一般都比较繁琐，一次处理大量样品时尤其不便，为此本公司开发了本产品，用于从哺乳动物组织和培养细胞核蛋白的微量提取。

产品特点：
1. 提取制备过程简便，只需要一小时。
2. 实验重复性好，尤其适合同时处理多个样品。
3.可用于培养的动物细胞，也可以用于新鲜组织细胞。
4. 制备的核蛋白能保持天然活性，可以直接用于转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、DNA 足迹图实验和甲基化干扰实验酶活性测定等研究。
 

成分	规格
溶液A	10ml
溶液B	2.5ml
说明书	1份

储存条件：低温运输、4℃保存，有效期一年。

使用方法：
实验前准备：取适当量的溶液A和溶液B置于冰上，在使用前数分钟内分别向溶液A和溶液B中加入自备的PMSF和DTT，使PMSF的最终浓度为0.2mM，DTT的最终浓度为1mM。实验中所用试剂均需先预冷。

一、对培养细胞和悬浮细胞：
1. 对培养细胞：将覆盖率为55-65%的培养细胞用自备的胰酶溶液(BTN90306)按标准的胰酶法处理，然后刮到1.5mL塑料离心管中，4℃ 800g离心30秒，小心弃上清。
2. 对悬浮细胞：直接将5×105-7个的悬浮细胞转移到1.5mL塑料离心管中，4℃800g离心30秒，小心弃上清。
3. 用1.5mL自备的预冷的PBS缓冲液洗涤细胞沉淀一次，然后4℃离心后弃上清。
4.在细胞沉淀中加入400μL预加了PMSF和DTT的溶液A，用手指弹管壁使沉淀悬浮起来。
5. 冰浴10分钟，涡旋激烈震荡10秒混匀。
6. 4℃ 2500g离心10秒，小心弃上清。
7.在沉淀中加入100μL预加了PMSF和DTT的溶液B，轻轻混匀使沉淀悬浮起来。
8. 冰浴 20分钟。
9. 4℃ 12000-16000g离心10分钟，小心收集上清液(细胞核提取物)，可立即用于后续的凝胶滞后实验、BCA法蛋白浓度测定或活性检测等实验，也可以分装后放-70℃长期保存。
 说明：本方法可以从1×10⁶的细胞中得到50-70ug的核蛋白质。

二、对新鲜组织：
10. 将100-150mg 新鲜组织置于培养皿中，用手术剪将组织尽可能切成非常细小的碎片，尽量去除脂肪组织和结缔组织等非目的组织，用自备的预冷的PBS洗涤2次，离心后去上清。在组织沉淀中加入400μl预加了PMSF和DTT的溶液A，冰浴或4ºC下在Dounce或Potter 玻璃匀浆器(BTN101103 ，可向本公司订购)内充分匀浆，一般上下手动匀浆30-50次(匀浆后应镜检，细胞破碎率不小于90%，同时没有明显的组织小块)。
11. 匀浆后把匀浆液转移到塑料离心管内，用手指弹管壁使沉淀悬浮起来，冰浴放置10-20分钟，涡旋激烈震荡10秒混匀。
12. 接下来按照步骤6-9操作，即得到新鲜组织细胞核蛋白提取物。

注意事项：
1. 所有接触样品的用具和试剂均需预冷，以免蛋白质的降解及失活。
2. PMSF一定要在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
3. 本试剂盒只适用于新鲜的组织样品，对冻存过的组织抽提效果不是很理想。


AP标记的链霉亲和素厂家关键词：Streptavidin，AP Conjugated,BTN131022,AP标记的链霉亲和素


·SuperTOPO-Amp TA克隆试剂盒
编号：BTN160686-25A
英文名称：SuperTOPO TA Cloning Kit
规格：25次
本试剂盒是基于Topoisomerase能够在几秒钟之内高速连接DNA片段的原理开发的无背景克隆试剂盒，它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶，连接效率比野生型更高。

产品特点：
1.高效快速，连接反应几乎在几秒钟内完成，连接率几乎达到100%。
2.适用于具有A 尾巴的DNA片段使用。
3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。
4.转化时只需要37℃,10分钟复苏即可涂盘，免去冰浴、热休克和复苏步骤。
5. 零背景，无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选，故不需要IPTG-X-Gal培养基。
6. 本试剂盒按10μL标准反应体系，有25次和50次两种规格包装供选择。
7. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择(BTN160686-25A是含Amp抗性TOPO载体，BTN160686-25K是含Kan抗性TOPO载体)。

试剂盒组成：

成分	规格
SuperTOPO-Amp载体	25μl(BTN160686-25A)
SuperTOPO-Kan载体	25μl(BTN160686-25K)
连接缓冲液	25μl
超纯水	1ml
说明书	1份

注意：BTN160686-25A提供SuperTOPO-Amp载体，BTN160686-25K提供SuperTOPO-Kan载体。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

1. PCR扩增或酶切回收DNA插入片段。如果是PCR制备插入片段，所用引物不能磷酸化，使用Taq系列的DNA聚合酶。
2.电泳检测并相对定量PCR片段或酶切回收片段(跟DNA marker比较)。
 并根据插入片段长度和下表确定每次连接反应需要的最佳用量：

插入片段长度	最佳用量
100-1000bp	20-50ng
1000-2000bp	50-100ng
2000-5000bp	100-200ng

3.在一个干净的塑料离心管中，室温下(不要放在冰上)设置如下连接反应体系：

成分	用量
纯化后的PCR产物	不超过8μl(详见注意事项)
SuperTOPO-Amp载体或 SuperTOPO-Kan载体	1μl
连接缓冲液	1μl
超纯水	补到10μL

 注意：如果使用未经纯化的PCR产物，则需要加入量不能超过1μL，否则PCR 体系会干扰连接体系。
4. 轻柔吹打混匀后，短暂离心，常温(20-30℃)放置0-5分钟。如果在冬天室温低于20℃，建议使用25℃水浴或金属浴。注意：连接时间超过5分钟的话连接效率会降低。
5. 如果当天不转化，可以将离心管放-20℃保存。如果转化，则取5μL连接液加到50-100μL刚刚融化的感受态细胞中，轻柔混匀。注意：本产品要求感受态细胞的转化效率不得低于5﹡10E7cfu/ug。
6. 如果片段长度小于2Kb，则不需要冰浴和热激，直接在离心管中加入500μL不含抗菌素的SOC或LB培养基，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μl左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。
7. 如果片段长度长于2Kb，则按常规转化方式，先冰浴2-30分钟，然后42℃热激30秒，冰上防放置2分钟，再在离心管中加入500μL不含抗菌素的SOC或LB培养基，37℃ 250rpm培养60分钟，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μL左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。
8. 用菌落PCR、直接测序或其他方法鉴定重组子。

我公司强烈推荐蛋白质研究系列产品，热情期待您的咨询选购AP标记的链霉亲和素厂家。