相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RNase A溶液需4℃或-20℃保存,
- 保质期:
长期
- 英文名:
Endotoxin-free plasmid DNA large-scale extraction kit
- 库存:
747
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应无内毒素质粒DNA大量提取试剂盒现货供应,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:无内毒素质粒DNA大量提取试剂盒现货供应
产地:国产|进口
英文名:Endotoxin-free plasmid DNA large-scale extraction kit
编号:BTN81107
品牌:百奥莱博
本试剂盒是整合大提质粒DNA提取试剂盒和菌体内毒素清除剂两产品而成。菌体内毒素清除剂是我司独家推出的产品,在质粒提取前就把细胞壁上的内毒素清除掉,彻底避免了目前通用的先提取DNA+内毒素混合物,再从中纯化质粒DNA的弊端。用本产品提取的质粒DNA,内毒素的污染浓度低,适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。
试剂盒特点:
1. 操作简单,只在经典的柱式质粒DNA提取前,增加菌体内毒素清除一步。
2. 去内毒素效果好,处理一次可以去除99%以上的内毒素。
3.质粒丢失少,产率只比柱式质粒DNA提取试剂盒低5-10%,效果好于先提质粒DNA,再用液相内毒素清除剂处理的方法。
4. DNA可以直接用于转染等实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 菌体内毒素清除剂 | 200ml |
| 溶液A | 25ml |
| 溶液B | 25ml |
| 溶液C | 35ml |
| RNase A溶液(10mg/mL) | 300μl |
| 吸附柱活化液 | 12.5ml |
| 大提离心吸附柱 | 5套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| DNA洗脱液3.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:RNase A溶液需4℃或-20℃保存,其余成分可室温保存,如有沉淀可加热溶解后再使用。
使用方法:
1. 用50mL塑料离心管收集不超过40mL的E.coli 饱和菌液,5000rpm离心5-10分钟,弃上清,得到细菌沉淀。
2. 加入10mL菌体内毒素清除剂,温和混匀后5000rpm离心5-10分钟,弃上清(含内毒素)。
3. 重复上述操作3次,得到的菌体将丢失了绝大部分细胞表面的内毒素。
4. 往细菌沉淀中加入5mL溶液A(第一次使用时需要将RNase A溶液全部加入并混合均匀,未用完的部分放4℃保存),充分振荡悬浮。注意:充分重悬细胞沉淀(无块状物)对于获得高的质粒产量十分重要。
5. 加5mL溶液B,温和翻转10 余次至透明。若混合液不透明,应减少细菌的用量或室温放臵5-10分钟直到裂解液变透明。注意: 避免剧烈振荡,否则细菌基因组DNA 将断裂为小片段,与质粒难以分离,污染质粒DNA。
6. 加入冰浴的7mL溶液C,颠倒混匀,冰上放臵10分钟。混合物中将有白色絮状物形成。注意不要过分振荡。
7.在等待期间,活化离心吸附柱。在离心吸附柱中加入2.5mL活化液,套上收集管后室温放臵2分钟,然后5000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须立即使用。如果不活化,质粒得率将低20-40%左右。
8. 6000rpm离心10分钟。如果离心管承受能力强,离心速度还可以适当提高以充分沉淀絮状物。
9. 将上步得到的上清液移入到大提离心吸附柱中,放入50mL收集管中。室温放臵5分钟左右以便让质粒DNA跟膜结合。
10. 6000rpm离心5分钟,质粒DNA 将与大提离心吸附柱中的膜结合。弃穿透液。
11. 将10mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,室温静臵2分钟后6000rpm离心5分钟,弃穿透液。
12. 重复上步一次。
13.室温6000rpm 空甩5分钟,弃穿透液。注意:此步很重要,不能跳过,否则残留乙醇会影响后续实验。
14. 将大提离心吸附柱放入一个干净的50mL塑料离心管中,加0.5mL DNA洗脱液3.0(洗脱液如加热到50-65℃效果更佳),室温静臵2分钟后6000rpm离心5分钟,收集液即是质粒DNA溶液。
15. 重复上步3-4次可洗脱更多的质粒DNA。DNA 洗脱液3.0 不够可以用TE或超纯水替代。
16. 合并所得质粒DNA,立即使用或-20℃储存。
注意事项:
1.细菌培养时间一般为12-16小时,但接种量大时应减少时间。过度培养会降低质粒的质量甚至导致质粒DNA突变。
2.注意溶液A:溶液B:溶液C的比例为5:5:7。若细菌量增大,需按比例放大这些溶液的使用量。
3.随菌体增多应延长溶液B的作用时间,直至溶液成粘稠透明状。但时间过长会导致质粒DNA变性。
4.加溶液C后形成的白色沉淀中有变性的蛋白质、细菌基因组DNA和细胞碎片,离心后应避免带入到后续处理中。
5.通用洗柱液洗涤离心柱后必须甩干一次,否则残留通用洗柱液中的乙醇会干扰后续实验。
6.质粒的具体产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。一般1.5mL 过夜培养菌体可收获约10μg高拷贝质粒。
7.纯化的质粒在电泳中表现为2-3 条带有时甚至为4-6 条带均属正常,未分开的环套质粒,易被误判为基因组DNA。
无内毒素质粒DNA大量提取试剂盒现货供应极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·SDS-PAGE样品预处理试剂盒
编号:BTN131074
英文名称:Sample Preparation Kit for SDS-PAGE
规格:50次
本产品为SDS-PAGE电泳样品制备专用试剂盒。
产品特点:
1.减少由于不兼容污染物造成的电泳假象,提供重复性好的SDS-PAGE 结果。
2.快速且容易使用的离心管形式(微量离心)。
3.在20分钟以内将稀释的蛋白溶液富集成六倍浓缩液。
4.无需透析即可去除染料、还原剂、去污剂、糖、甘油、胍、尿素及硫*(代"酸")铵。
5.对于大多数蛋白可以得到75-85%的蛋白回收率。
6.洗脱缓冲液与BCA蛋白定量分析试剂盒兼容,因此可以对处理过的样品进行定量。
7.最少可以处理2微升样品。
试剂盒组成:
| 成份 | 规格 |
| PAGEprep树脂(浆状物,溶剂为DMSO) | 1mL |
| PAGEprep洗脱缓冲液 | 5mL |
| DMSO | 27mL |
| 离心收集管-硝酸纤维素薄膜滤器 | 50个 |
| 收集管 | 72个 |
| 泳道指示剂,非还原性上样缓冲液(5X) | 5mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
无内毒素质粒DNA大量提取试剂盒现货供应关键词:BTN81107,Endotoxin-free plasmid DNA large-scale extraction ,无内毒素质粒DNA大量提取试剂盒
磷酸丙糖异构酶 Sodium tetraborate decahydrate 9023-78-3
J0203 兔抗人血清白蛋白抗血清 1ml/10ml
CYB168016 大鼠血清 100ml/瓶
ARB10275 人干细胞因子受体(SCFR)尿液中含量检测 Human stem cell factor receptor,scfr ELISA KIT
ARB12625 大鼠维生素D2(VD2)Elisa分析 Rat vitamin d2,vd2 ELISA KIT
62640-02-2 NADP Na2 氧化型辅酶Ⅱ
ARB11290 人*调素(CAM)酶联免疫定量检测 Human calmodulin,cam ELISA KIT
ARB12879 小鼠丙*酸转*酶/谷丙转*酶(ALT/GPT)ELISA代测服务 Mouse alanine aminotransferase,alt/gpt ELISA KIT
灿烂甲*(代"酚")蓝 Potassium oxonate 81029-05-2
甘*酸 Hydroxymethyl resin 56-40-6
没食子酸甲酯 Trimethoprim 99-24-1
HC0167 (方孔)冻存盒
F040316 鸭IgY抗原 Duck IgY
ARB11568 人基质金属蛋白酶13(MMP-13)elisa检测 Human matrix metalloproteinase 13,mmp-13 ELISA KIT
Western封闭液I(BSA) 100ml
无内毒素质粒DNA大量提取试剂盒现货供应关键词:BTN81107,Endotoxin-free plasmid DNA large-scale extraction ,无内毒素质粒DNA大量提取试剂盒
·DNA marker(λ-EcoT14 I)
编号:BTN90602J
英文名称:DNA ladder(λ-EcoT14 I)
规格:100μg
·GpC甲基转移酶(M.CviPI)
编号:BTN130653
英文名称:GpC Methyltranferase(M.CviPI)
规格:200U
该GpC甲基转移酶(M.CviPI)能将双链二核苷酸识别序列中所有胞嘧啶残基(C5)甲基化。
产品特点:
1.阻止限制性内切酶的切割;
2.改变DNA的物理特性;
3.对DNA统一进行[3H]标记。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1酶活单位定义为在 20μl反应体系中,37℃条件下,1小时能保护1μg λDNA不被HaeIII限制性核酸内切酶切割所需要的酶量。
热失活:65℃ 20分钟。
备注:
胞嘧啶残基被甲基化后,可影响DNA的物理特性,如:降低Z-DNA形成的自由能,增加DNA的螺旋程度,改变DNA十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联*的反应性降低,5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。
北京百莱博科技有限公司专业生产DNA纯化产品,欢迎来电咨询选购无内毒素质粒DNA大量提取试剂盒现货供应。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验程度等等。 现在大部分质粒提取都用试剂盒, 根据实验需要我们可以选择不同级别的产品: 1. 从纯度上看:常规操作(如酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化),普通纯度的质粒即可;对于转染实验,则需要无内毒素质粒提取试剂盒。 2. 从提取量上看:1-20μg,小量提取试剂盒;20-40μg,中量提取试剂盒;大于40μg,大量提取试剂盒。 3. 宿主菌类别上:主要分为普通细菌质粒提取试剂盒,真菌质粒提取试剂盒,酵母菌质粒提取试剂盒。 举例:SunShinecleanTM无内毒素质粒小量抽提试剂盒采用新型
pl198242:请问各位大侠:用质粒提取试剂盒从大肠杆菌中提取质粒后,想用于细胞转染,还需要另外的操作来除菌么? 另外是否还需要纯化?丁香园网友boboyuan认为:不需要,当然,前提是你提取质粒时操作是规范的。提完的质粒放-4度保存,转染的时候直接用就行了。丁香园网友hzh_0796认为:看你是用什么方法提得,纯度如何我用小提的时候发现,最后一步用洗脱液洗时将吸附柱放进一个新的EP管时盖子居然盖不上,硬着头皮这样拿去离心,自己都不放心用。后面测了下浓度好低,只有89微克每毫升。看来小提
左右;针对干细胞、神经细胞等可以将浓缩倍数提升到 10 倍左右,因为这些细胞外泌体分泌量相对肿瘤细胞来说要少很多。 第四步外泌体提取: 方法 优点 缺点 超速离心法 提取量相对较大 一法适用多类样品 成本较低 操作复杂度高 耗时长 因离心管材质量高低,管壁吸附损失程度不同 同时检测的样品数量有限 需要超速离心机 外泌体提取试剂盒 操作简单 耗时较短 不需超速离心机 纯度较超速离心法高 单次处理体积偏小 文章来源:宇玫博生物
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









