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北京现货BLOTTO溶液哪里卖

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  • ¥160 - 1780
  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN100812-AQB
  • 2025年07月07日
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    • 保存条件

      低温运输、-4℃保存(不能保存在-20℃

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      长期

    • 英文名

      BLOTTO Solution

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      743

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货BLOTTO溶液哪里卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:北京现货BLOTTO溶液哪里卖
    产地:国产|进口
    品牌:百奥莱博
    英文名:BLOTTO Solution
    规格:250mL
    BLOTTO全名是Bovine Lacto TransferTechnique Optimizer,是一种含有脱脂奶粉、磷酸盐和抗菌剂的杂交阻断剂,可以用于DNA杂交(Southern杂交、斑点杂交、菌落杂交)、Western杂交、ELISA;但不能用于RNA杂交和低拷贝的Southern杂交。也不能与含高浓度的SDS混用。

    储存条件:低温运输、-4℃保存(不能保存在-20℃),有效期一年。

    北京现货BLOTTO溶液哪里卖外,我公司正在打折促销以下产品:

    ·His标记蛋白质微量纯化套装(含核酸酶和溶菌酶)
    编号:BTN100102B
    英文名称:One-Stop His-Tagged Protein Miniprep Pack(B)
    规格:2mL
    本产品基于His-Ni亲和层析的蛋白质纯化方法是目前分离纯化重组表达蛋白质的重要方法,本产品就是专门用于上述实验的一站式产品。

    产品特点:
    1.一站式套装,含所需的介质、溶液和层析柱,用户只需要提供表达His蛋白的细菌(酵母、杆状病毒、培养细胞)即可,非常方便。
    2. 专一性强,一次过柱即可获得纯度高达95%的His-标记蛋白。
    3.变性和非变性条件均可使用,也适用于纯化包涵体中的His标记蛋白。
    4. 每次可以处理20mL的表达菌液,适合初步筛选和鉴定。
    5. 提供4mL浓度为50%的Ni-Agarose介质,其最大载量为20-30mg His标记蛋白质/mL介质。
    6. 介质为CL-6B琼脂糖,含四个Ni离子螯合基团,比只有四个Ni离子螯合基团的Ni-IDA更有效。
    7. 本介质可以反复使用多次。
    试剂盒组成:

     
    成份 规格
    Ni-Agarose介质,50% 4mL
    1M咪唑溶液 25mL
    1M Tris-HCl pH7.9 25mL
    5M NaCl溶液 25mL
    溶菌酶(20 KU/mg) 30mg(A型无)
    Benzonase(2U/μL) 20μL(A型无)
    盐*(代"酸")胍 6g
    尿素 20g
    PMSF(10mg/mL) 0.5mL
    亲和层析柱,6mL 1套
    使用手册 1份


    储存条件:常温运输和保存,但介质需4℃保存,溶菌酶、Benzonase和PMSF需-20℃保存,有效期一年。

    自备试剂:去离子水、20%乙醇、0.45μm滤膜

    使用方法:
    1.将Ni-Agarose介质充分混匀后,取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中(介质用量需要根据His蛋白产量决定,其最大载量为20-30mg His标记蛋白质/mL介质,请根据实验需要取适量的Ni-Agarose介质加入层析柱)。
    2.用5倍柱体积(指填料的体积,下同)自备去离子水洗柱,共三次。
    3.用5倍柱体积的新配结合液洗柱(配方如下,以10mL为例),共三次:
    成分 用量 在结合缓冲液中浓度
    1M Tri-HCl(pH7.9) 0.2mL 20mM
    1M咪唑溶液 0.1mL 10mM
    5M NaCl溶液 1mL 500mM
    自备去离子水 8.7mL -

    4.室温5000g离心10分钟收集20mL表达菌液,弃上清,沉淀(约100mg)放冰上待用或放-80℃保存。最好用不加诱导物的菌液做对照样。
    5.如果用本产品A型:加入1mL冰浴的结合液(1mL菌液需要用50μL结合液),再加入25μL PMSF(10mg/mL)溶液,冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索,但裂解物必须不粘稠,否则会堵塞层析柱。如果用本产品B型:加入1mL冰浴的含溶菌酶的结合液(先取20mL结合液,加入所有30mg溶菌酶干粉,溶解后分装成1mL/管,剩余的-20℃放置),再加入25μL PMSF(10mg/mL)溶液和1μL Benzonase,冰上放置30分钟。
    6.4℃下13000-15000g离心10分钟,去除残留细胞和细胞碎片以防堵柱,收集上清,留样做SDS-PAGE电泳对照。如果要纯化裂解液中可溶部分的His标记蛋白,则直接进入第7步;如果要纯化裂解液中包涵体(沉淀部分)中的His标记蛋白,则直接进入第12步。

    A、纯化细胞裂解液中可溶部分的His标记蛋白
    7.将上步得到的上清液上柱,让重力使裂解液自然流出。如要提高His标记蛋白与介质的结合效率,可用试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上,让细菌裂解液和介质在4℃结合30分钟或过夜。
    8.用10倍柱体积结合液洗柱(配方见上表),收集并保存穿透液(含杂质或没被吸附的His标记蛋白,可做SDS-PAGE电泳的对照)。
    9.如果用一步式洗脱法(适合已经找到最佳咪唑浓度的情况),则直接用适量的新鲜配制的洗脱液洗柱,收集并保存穿透液(含His标记蛋白)。洗脱液的配方如下(以1mL体积和最佳咪唑浓度是500mM为例):
    成分 用量 在洗脱液中的浓度
    1M Tri-HCl(pH7.9) 20μL 20mM
    1M咪唑溶液 500μL 500mM
    5M NaCl溶液 100μL 500mM
    自备去离子水 380μL -

    10.如果用多步式洗脱(适合不知道最佳咪唑浓度或一步式洗脱杂质多的情况),则按上表配制一系列咪唑浓度不同(如40、60、100、200、300和500mM),其他成分浓度不变的洗液,按从低到高的顺序洗涤并收集样品,SDS-PAGE电泳检测His标记蛋白所在的区域。
    11.洗脱后,依次使用10倍柱体积的去离子水洗涤柱子,再用3倍柱体积的20%乙醇平衡(乙醇要将填料浸没),最后堵住层析柱下端的漏口,4℃保存待下次使用。

    B、纯化包涵体中His标记蛋白
    12.将第6步离心得到的包涵体沉淀重悬于1-3mL含盐*(代"酸")胍结合液中或1-3mL含尿素结合液中(建议优先使用尿素做变性剂,因为得到的洗脱液可以直接跑SDS-PAGE,而用盐*(代"酸")胍的洗脱液需先除盐后才能电泳)。冰浴1小时以使包涵体溶解,期间可轻柔摇晃几次。含变性剂的结合液配方如下(以10mL为例):
    成分 含盐*(代"酸")胍结合液 含尿素结合液
    1M Tri-HCl(pH7.9) 200μL 200μL
    5M NaCl溶液 1mL 1mL
    盐*(代"酸")胍(MW=95.6) 5.7g
    尿素(MW=60.1) 4.8g
    自备去离子水 加水到10mL 加水到10mL

    13.室温10000×g离心20分钟,沉淀为未溶解的包涵体。将上清(含溶解后的His标记蛋白)以自备的0.45μm滤膜过滤。
    14.将滤过液上柱,后续纯化步骤同第7-第11步。只是所用结合液和洗脱液均含变性剂,含变性剂的洗脱液配方见下表(以1mL为例):
    成分 含盐*(代"酸")胍洗脱液 含尿素洗脱液
    1M Tri-HCl(pH7.9) 20μL 20μL
    1M咪唑溶液 500μL 500μL
    5M NaCl溶液 100μL 100μL
    盐*(代"酸")胍(MW=95.6) 0.57g
    尿素(MW=60.1) 0.48g
    自备去离子水 补水到1mL 补水到1mL


    注意事项:整个实验需避免含巯基乙醇、DTT和EDTA等成分。若洗脱液不能将His标记蛋白洗脱下来,可改用pH6.5- 4.5的pH递减的Tris-HCl洗脱。


    北京现货BLOTTO溶液哪里卖关键词:BTN100812,BLOTTO Solution,BLOTTO溶液

    绿原酸 D-Luciferin sodiu*(代"m") salt 327-97-9
    F020232 兔抗驴IgG抗体 Rabbit Anti-Donkey IgG
    ARB10908 人抗缪勒管激素(AMH)ELISA检测服务 Human mullerian inhibiting substance/anti-mullerian hormone,mis/amh ELISA KIT
    甜菜碱盐*(代"酸")盐 L-Arabinitol 590-46-5
    SJ0835 定影粉
    21931-53-3 5-尿苷二磷酸 5-UDP
    ARB12592 大鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)含量分析 Rat matrix metalloproteinase 8/neutrophil collagenase,mmp-8 ELISA KIT
    BL1432 1M Tris-HCL(PH=7.4)
    *佐卡因 (+)-Dibenzoyl-D-tartaric acid monohydrate 94-09-7
    F030623 FITC标记兔抗猴IgG抗体 Rabbit Anti-monkey IgG*FITC
    HC0102 25mm针头式滤器
    PY04-038  吖啶黄素(I)  3.75mg/支×10支  每支添加于225ml胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE)培养基中,用于单增李氏菌增菌肉汤(EB)的配制,也可用于李斯特氏菌的培养
    北京现货BLOTTO溶液哪里卖关键词:BTN100812,BLOTTO Solution,BLOTTO溶液

    二硫代草酰* Polyarabinogalactan 79-40-3
    L-天冬*酸二甲酯盐*(代"酸")盐 DL-Ornithine HCL 32213-95-9
    002012 枸橼酸纳抗凝兔血 100ml|500ml
    F030805 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG抗体 Goat Anti-Mouse IgG*BIOTIN
    PY02-050  高盐甘露醇培养基  250克  
    F020215 兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG
    BL0869 羊抗大鼠免疫血清
    ARB12246 大鼠血管生成素受体TIe1(ANG-R-TIe1)Elisa方法检测 Rat angiopoietin receptor tie1,ang-r-tie1 ELISA KIT
    变旋酶 Streptozotocin 9031-76-9
    ARB13321 山羊促黄体生成素(LH)酶标法分析 
    ARB10444 人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)elisa检测说明书 Human alpha-fetoprotein,afp ELISA KIT
    M0110 TMB-2HCL                    
    BFD075 鸡新城疫抗原快速检测卡
    C0301 优级新生牛血清(无菌过滤)
    F020226 兔抗猫IgG抗体 Rabbit Anti-Cat IgG
    F030839 BIOTIN标记山羊抗人IgG Fab抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG Fab*BIOTIN
    BL1214 0.4%吕氏碱性美蓝染色液
    DL-丙*酸 Diphenylcarbinol 302-72-7
    ARB10206 人β2糖蛋白1抗体IgM(β2-GP1 Ab IgM)代做ELISA实验 Human β2-glycoprotein 1 antibody igm,β2-gp1 ab igM ELISA KIT

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