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BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)
长期
北京百奥莱博科技有限公司
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特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶) 核酸扩增(PCR)在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶) 核酸扩增(PCR)
编号:WE0154
规格:1ml|5ml
英*(代"文")名:BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)
品牌:百奥莱博
产地:北京
本品是专用于探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含 BaldStar Taq DNA polymerase、PCR Buffer、dNTPs(dTTP全部被dUTP所取代)、UNG酶和Mg2+,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列的检测,如基因表达分析,拷贝数分析,SNP基因型分析等。本产品中运用了dUTP-UNG防污染系统,在PCR反应体系配制过程中加入了dUTP,因此就形成了含有dU碱基的扩增产物。而此产物可以在下次进行PCR反应前,由PCR体系中的UNG酶处理消除。这样就有效的去除了PCR产物的残留污染,大大降低了由于扩增产物污染而导致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活,因此不会影响新的含dU碱基PCR产物的形成。本品含有的 BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的 PCR缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,荧光信号更强,灵敏度更高,可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围,对目的基因定量更准确。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0154):
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0155):
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0156):
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
产品组成:
组份 | WE0154-5ml | WE0155-5ml | WE0156-5ml |
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG) | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
50×Low ROX | - | 200μl | - |
50×High ROX | - | - | 200μl |
ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG) | 25μl | 1× |
Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
Probe,10μM | 1μl | 0.2μM |
Template DNA | 2μl | |
50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
ddH2O | up to 50μl |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
UNG酶消化 | 37℃/50℃ | 2-10 min | |
预变性 | 95℃ | 10 min | |
变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
退火/延伸 | 60℃ | 1 min |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
UNG酶消化 | 37℃/50℃ | 2-10 min | |
预变性 | 95℃ | 10 min | |
变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
退火 | 55℃-65℃ | 30s | |
延伸 | 72℃ | 30s |
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