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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
江蓝纯
- 规格:
10mg/ml×1ml
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| ST551-10mg | Puromycin Dihydrochloride (嘌呤霉素) | 10mg/ml×1ml | 168.00元 |
Puromycin是来源于Streptomyces alboniger的一种氨基核苷类抗生素,中文名为嘌呤霉素,常用于筛选通过质粒转染/转
化、病毒感染等方法能表达pac基因(puror)的真核或原核多克隆或单克隆细胞。Puromycin不仅用于稳定细胞株的筛选,也用于稳定细胞株的维持。本产品的10mg/ml包装经过滤除菌,可以直接用于细胞培养。
Puromycin的特点是快速作用于细胞,一般2天内可以杀死99%的不表达pac基因的细胞。
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文献和实验由白黑链霉菌( Streptomyces alboniger)的培养滤液中获得的抗菌素,除对所有细菌具抗性外,还具有抗肿瘤活性。由于其结构与 tRNA的末端结构类似,故能抑制细菌及真核细胞的蛋白质合成。常作为实验用药。它作用于结合在核糖核蛋白体上相应部位的肽酰 tRNA,可使肽酰嘌呤霉素从核糖核蛋白体上游离出来。
嘌呤霉素是一种蛋白质合成抑制剂,它具有与tRNA分子末端类似的结构, 能够同氨基酸结合,代替氨酰化的tRNA同核糖体的A位点结合,并掺入到生长的肽链中。虽然嘌呤霉素能够同A位点结合,但是不能参与随后的任何反应, 因而导致蛋白质合成的终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟的多肽。
:pCas9/gRNA1 载体本身不带筛选标签。我们用带有嘌呤霉素和 EGFP 标签的载体 pLV-EGFP(2A)puro 和 pCas9/gRNA1 载体共转染,再用嘌呤霉素筛选转染成功的细胞。 简要步骤 设计靶点→构建 pCas9/gRNA1 载体→pTYNE 验证靶点→pCas9/gRNA1 载体转染 293T 细胞→挑选培养细胞克隆→测序验证基因敲除 靶点设计和基因敲除载体构建 人 TP53 基因有多个 mRNA 和蛋白拷贝,2 个转录起始位点,以及多个
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