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现货
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两年
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件:
-80 ℃
- 规格:
10mg/ml×1ml/10mg/ml×5ml/250mg
| 规格: | 10mg/ml×1ml | 产品价格: | ¥208.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10mg/ml×5ml | 产品价格: | ¥868.0 |
| 规格: | 250mg | 产品价格: | ¥3298.0 |
产品简介:
Puromycin是来源于Streptomyces alboniger的一种氨基核苷类抗生素,中文名为嘌呤霉素,常用于筛选通过质粒转染/转
化、病毒感染等方法能表达pac基因(puror)的真核或原核多克隆或单克隆细胞。Puromycin不仅用于稳定细胞株的筛选,也用于稳定细胞株的维持。本产品的10mg/ml包装经过滤除菌,可以直接用于细胞培养。
Puromycin的特点是快速作用于细胞,一般2天内可以杀死99%的不表达pac基因的细胞。
在革兰氏阳性菌、动物或昆虫细胞中,嘌呤霉素通过抑制蛋白质合成而抑制或杀死细胞。其作用机制为嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3'末端的类似物,能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素与A位点结合后,不会参与随后的任何反应,从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。
Pac基因表达嘌呤霉素N-乙酰转移酶(Puromycin N-acetyl-tranferase),该基因是在Streptomyces alboniger中发现的。如果表达基因,就会对嘌呤霉素产生抗性,这一特性目前普遍应用于筛选表达pac基因的哺乳动物稳定细胞株等。例如,很多商业化的慢病毒载体都携带pac基因(一般在质粒图谱上标记为puror),从而利用嘌呤霉素筛选特定基因的稳定表达细胞株。嘌呤霉素也可以用来筛选表达pac基因的大肠杆菌菌株、酵母菌株等。
本产品10mg/ml包装配制在20mM HEPES(pH7.4)溶液中,浓度为10mg/ml,经0.22μm滤膜过滤除菌,可以直接用于细胞培养。本产品250mg包装为粉末装。
保存条件:
-20℃保存,至少一年有效。10mg/ml包装避免反复冻融。
注意事项:
本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验由白黑链霉菌( Streptomyces alboniger)的培养滤液中获得的抗菌素,除对所有细菌具抗性外,还具有抗肿瘤活性。由于其结构与 tRNA的末端结构类似,故能抑制细菌及真核细胞的蛋白质合成。常作为实验用药。它作用于结合在核糖核蛋白体上相应部位的肽酰 tRNA,可使肽酰嘌呤霉素从核糖核蛋白体上游离出来。
嘌呤霉素是一种蛋白质合成抑制剂,它具有与tRNA分子末端类似的结构, 能够同氨基酸结合,代替氨酰化的tRNA同核糖体的A位点结合,并掺入到生长的肽链中。虽然嘌呤霉素能够同A位点结合,但是不能参与随后的任何反应, 因而导致蛋白质合成的终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟的多肽。
:pCas9/gRNA1 载体本身不带筛选标签。我们用带有嘌呤霉素和 EGFP 标签的载体 pLV-EGFP(2A)puro 和 pCas9/gRNA1 载体共转染,再用嘌呤霉素筛选转染成功的细胞。 简要步骤 设计靶点→构建 pCas9/gRNA1 载体→pTYNE 验证靶点→pCas9/gRNA1 载体转染 293T 细胞→挑选培养细胞克隆→测序验证基因敲除 靶点设计和基因敲除载体构建 人 TP53 基因有多个 mRNA 和蛋白拷贝,2 个转录起始位点,以及多个
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