pET-28c(+)

pET-28c(+)

pET28c载体基本信息

出品公司:	Ybscience
别名:	pET28c, pet 28c
质粒类型:	大肠杆菌蛋白表达
表达水平:	高
克隆方法:	多克隆位点，限制性内切酶
载体大小:	5367 bp
5' 测序引物及序列:	T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
3' 测序引物及序列:	T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
载体标签:	N-His, N-Thrombin, N-T7, C-His
载体抗性:	Kanamycin
表达宿主菌:	BL21(DE3) 、BLR(DE3)、BL21(DE3)pLysS
备注:	Nterm thrombin cleavage site; a,b,c vary by MCS;
稳定性:	瞬时表达 Transient
组成型:	组成型 Constitutive
病毒/非病毒:	非病毒

 

pET28c载体质粒图谱和多克隆位点信息

pET28c载体简介

pET-28a-c(+)载体带有一个N端的His/Thrombin/T7蛋白标签，同时含有一个可以选择的C端His标签。pET28c载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。

注意：载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的，所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。 T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的，所以在T7噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒粒子能够产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。

pET28c载体序列

LOCUS       pET-28c(+)    5367 bp     DNA  circular   SYN
DEFINITION  pET-28c(+)
ACCESSION   
KEYWORDS    
SOURCE      
  ORGANISM  other sequences; artificial sequences; vectors.
COMMENT     This file is created by Vector NTI
            http://www.biofeng.com/
COMMENT     ORIGDB|GenBank
COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT     VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..5367
                     /organism="pET-28 c (+)"
                     /mol_type="other DNA"
     terminator      complement(1..129)
                     /label="T7_terminator"
     misc_feature    69..87
                     /label="T7_Terminal_primer"
     misc_feature    complement(205..237)
                     /label="T7_leader"
     misc_feature    complement(220..238)
                     /label="Xpress_fwd_primer"
     misc_feature    complement(305..321)
                     /label="T7_transl_en_RBS"
     misc_feature    complement(339..366)
                     /label="lacO"
     promoter        complement(366..384)
                     /label="T7_promoter"
     gene            416..679
                     /label="tet (300 - 563)"
                     /gene="tet (300 - 563)"
     misc_feature    complement(468..487)
                     /label="pBRrevBam_primer"
     CDS             521..1021
                     /label="ORF frame 2"
     misc_feature    762..1853
                     /label="lacI"
     CDS             894..1853
                     /label="ORF frame 3"
     gene            1912..2187
                     /label="tet (576 - 851)"
                     /gene="tet (576 - 851)"
     misc_feature    2662..2853
                     /label="ROP"
     misc_feature    complement(2847..2869)
                     /label="pGEX_3_primer"
     rep_origin      complement(3268..3887)
                     /label="pBR322_origin"
     gene            3993..4808
                     /label="KanR2"
                     /gene="KanR2"
     CDS             3993..4808
                     /label="ORF frame 3"
ORIGIN
    1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
   61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
  121 tgttagcagc cggatctcag tggtggtggt ggtggtgctc gagtgcggcc gcaagcttgt
  181 cgacggagct cgaattcgga tccgacccat ttgctgtcca ccagtcatgc tagccatatg
  241 gctgccgcgc ggcaccaggc cgctgctgtg atgatgatga tgatggctgc tgcccatggt
  301 atatctcctt cttaaagtta aacaaaatta tttctagagg ggaattgtta tccgctcaca
  361 attcccctat agtgagtcgt attaatttcg cgggatcgag atctcgatcc tctacgccgg
  421 acgcatcgtg gccggcatca ccggcgccac aggtgcggtt gctggcgcct atatcgccga
  481 catcaccgat ggggaagatc gggctcgcca cttcgggctc atgagcgctt gtttcggcgt
  541 gggtatggtg gcaggccccg tggccggggg actgttgggc gccatctcct tgcatgcacc
  601 attccttgcg gcggcggtgc tcaacggcct caacctacta ctgggctgct tcctaatgca
  661 ggagtcgcat aagggagagc gtcgagatcc cggacaccat cgaatggcgc aaaacctttc
  721 gcggtatggc atgatagcgc ccggaagaga gtcaattcag ggtggtgaat gtgaaaccag
  781 taacgttata cgatgtcgca gagtatgccg gtgtctctta tcagaccgtt tcccgcgtgg
  841 tgaaccaggc cagccacgtt tctgcgaaaa cgcgggaaaa agtggaagcg gcgatggcgg
  901 agctgaatta cattcccaac cgcgtggcac aacaactggc gggcaaacag tcgttgctga
  961 ttggcgttgc cacctccagt ctggccctgc acgcgccgtc gcaaattgtc gcggcgatta
 1021 aatctcgcgc cgatcaactg ggtgccagcg tggtggtgtc gatggtagaa cgaagcggcg
 1081 tcgaagcctg taaagcggcg gtgcacaatc ttctcgcgca acgcgtcagt gggctgatca
 1141 ttaactatcc gctggatgac caggatgcca ttgctgtgga agctgcctgc actaatgttc
 1201 cggcgttatt tcttgatgtc tctgaccaga cacccatcaa cagtattatt ttctcccatg
 1261 aagacggtac gcgactgggc gtggagcatc tggtcgcatt gggtcaccag caaatcgcgc
 1321 tgttagcggg cccattaagt tctgtctcgg cgcgtctgcg tctggctggc tggcataaat
 1381 atctcactcg caatcaaatt cagccgatag cggaacggga aggcgactgg agtgccatgt
 1441 ccggttttca acaaaccatg caaatgctga atgagggcat cgttcccact gcgatgctgg
 1501 ttgccaacga tcagatggcg ctgggcgcaa tgcgcgccat taccgagtcc gggctgcgcg
 1561 ttggtgcgga tatctcggta gtgggatacg acgataccga agacagctca tgttatatcc
 1621 cgccgttaac caccatcaaa caggattttc gcctgctggg gcaaaccagc gtggaccgct
 1681 tgctgcaact ctctcagggc caggcggtga agggcaatca gctgttgccc gtctcactgg
 1741 tgaaaagaaa aaccaccctg gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg
 1801 attcattaat gcagctggca cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac
 1861 gcaattaatg taagttagct cactcattag gcaccgggat ctcgaccgat gcccttgaga
 1921 gccttcaacc cagtcagctc cttccggtgg gcgcggggca tgactatcgt cgccgcactt
 1981 atgactgtct tctttatcat gcaactcgta ggacaggtgc cggcagcgct ctgggtcatt
 2041 ttcggcgagg accgctttcg ctggagcgcg acgatgatcg gcctgtcgct tgcggtattc
 2101 ggaatcttgc acgccctcgc tcaagccttc gtcactggtc ccgccaccaa acgtttcggc
 2161 gagaagcagg ccattatcgc cggcatggcg gccccacggg tgcgcatgat cgtgctcctg
 2221 tcgttgagga cccggctagg ctggcggggt tgccttactg gttagcagaa tgaatcaccg
 2281 atacgcgagc gaacgtgaag cgactgctgc tgcaaaacgt ctgcgacctg agcaacaaca
 2341 tgaatggtct tcggtttccg tgtttcgtaa agtctggaaa cgcggaagtc agcgccctgc
 2401 accattatgt tccggatctg catcgcagga tgctgctggc taccctgtgg aacacctaca
 2461 tctgtattaa cgaagcgctg gcattgaccc tgagtgattt ttctctggtc ccgccgcatc
 2521 cataccgcca gttgtttacc ctcacaacgt tccagtaacc gggcatgttc atcatcagta
 2581 acccgtatcg tgagcatcct ctctcgtttc atcggtatca ttacccccat gaacagaaat
 2641 cccccttaca cggaggcatc agtgaccaaa caggaaaaaa ccgcccttaa catggcccgc
 2701 tttatcagaa gccagacatt aacgcttctg gagaaactca acgagctgga cgcggatgaa
 2761 caggcagaca tctgtgaatc gcttcacgac cacgctgatg agctttaccg cagctgcctc
 2821 gcgcgtttcg gtgatgacgg tgaaaacctc tgacacatgc agctcccgga gacggtcaca
 2881 gcttgtctgt aagcggatgc cgggagcaga caagcccgtc agggcgcgtc agcgggtgtt
 2941 ggcgggtgtc ggggcgcagc catgacccag tcacgtagcg atagcggagt gtatactggc
 3001 ttaactatgc ggcatcagag cagattgtac tgagagtgca ccatatatgc ggtgtgaaat
 3061 accgcacaga tgcgtaagga gaaaataccg catcaggcgc tcttccgctt cctcgctcac
 3121 tgactcgctg cgctcggtcg ttcggctgcg gcgagcggta tcagctcact caaaggcggt
 3181 aatacggtta tccacagaat caggggataa cgcaggaaag aacatgtgag caaaaggcca
 3241 gcaaaaggcc aggaaccgta aaaaggccgc gttgctggcg tttttccata ggctccgccc
 3301 ccctgacgag catcacaaaa atcgacgctc aagtcagagg tggcgaaacc cgacaggact
 3361 ataaagatac caggcgtttc cccctggaag ctccctcgtg cgctctcctg ttccgaccct
 3421 gccgcttacc ggatacctgt ccgcctttct cccttcggga agcgtggcgc tttctcatag
 3481 ctcacgctgt aggtatctca gttcggtgta ggtcgttcgc tccaagctgg gctgtgtgca
 3541 cgaacccccc gttcagcccg accgctgcgc cttatccggt aactatcgtc ttgagtccaa
 3601 cccggtaaga cacgacttat cgccactggc agcagccact ggtaacagga ttagcagagc
 3661 gaggtatgta ggcggtgcta cagagttctt gaagtggtgg cctaactacg gctacactag
 3721 aaggacagta tttggtatct gcgctctgct gaagccagtt accttcggaa aaagagttgg
 3781 tagctcttga tccggcaaac aaaccaccgc tggtagcggt ggtttttttg tttgcaagca
 3841 gcagattacg cgcagaaaaa aaggatctca agaagatcct ttgatctttt ctacggggtc
 3901 tgacgctcag tggaacgaaa actcacgtta agggattttg gtcatgaaca ataaaactgt
 3961 ctgcttacat aaacagtaat acaaggggtg ttatgagcca tattcaacgg gaaacgtctt
 4021 gctctaggcc gcgattaaat tccaacatgg atgctgattt atatgggtat aaatgggctc
 4081 gcgataatgt cgggcaatca ggtgcgacaa tctatcgatt gtatgggaag cccgatgcgc
 4141 cagagttgtt tctgaaacat ggcaaaggta gcgttgccaa tgatgttaca gatgagatgg
 4201 tcagactaaa ctggctgacg gaatttatgc ctcttccgac catcaagcat tttatccgta
 4261 ctcctgatga tgcatggtta ctcaccactg cgatccccgg gaaaacagca ttccaggtat
 4321 tagaagaata tcctgattca ggtgaaaata ttgttgatgc gctggcagtg ttcctgcgcc
 4381 ggttgcattc gattcctgtt tgtaattgtc cttttaacag cgatcgcgta tttcgtctcg
 4441 ctcaggcgca atcacgaatg aataacggtt tggttgatgc gagtgatttt gatgacgagc
 4501 gtaatggctg gcctgttgaa caagtctgga aagaaatgca taaacttttg ccattctcac
 4561 cggattcagt cgtcactcat ggtgatttct cacttgataa ccttattttt gacgagggga
 4621 aattaatagg ttgtattgat gttggacgag tcggaatcgc agaccgatac caggatcttg
 4681 ccatcctatg gaactgcctc ggtgagtttt ctccttcatt acagaaacgg ctttttcaaa
 4741 aatatggtat tgataatcct gatatgaata aattgcagtt tcatttgatg ctcgatgagt
 4801 ttttctaaga attaattcat gagcggatac atatttgaat gtatttagaa aaataaacaa
 4861 ataggggttc cgcgcacatt tccccgaaaa gtgccacctg aaattgtaaa cgttaatatt
 4921 ttgttaaaat tcgcgttaaa tttttgttaa atcagctcat tttttaacca ataggccgaa
 4981 atcggcaaaa tcccttataa atcaaaagaa tagaccgaga tagggttgag tgttgttcca
 5041 gtttggaaca agagtccact attaaagaac gtggactcca acgtcaaagg gcgaaaaacc
 5101 gtctatcagg gcgatggccc actacgtgaa ccatcaccct aatcaagttt tttggggtcg
 5161 aggtgccgta aagcactaaa tcggaaccct aaagggagcc cccgatttag agcttgacgg
 5221 ggaaagccgg cgaacgtggc gagaaaggaa gggaagaaag cgaaaggagc gggcgctagg
 5281 gcgctggcaa gtgtagcggt cacgctgcgc gtaaccacca cacccgccgc gcttaatgcg
 5341 ccgctacagg gcgcgtccca ttcgcca
//