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-20℃
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长期
- 英文名:
T4 RNA Ligase
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959
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")T4 RNA连接酶厂商,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:T4 RNA连接酶厂商
英文名:T4 RNA Ligase
品牌:百奥莱博
规格:200U
产地:国产|进口
本酶来源于由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体,是一种ATP-依赖的可以催化单链RNA、单链DNA或单核苷酸分子间或分子内5"-P末端与3"-OH末端之间形成磷酸二酯键的酶。
T4 RNA连接酶主要用于RNA和RNA之间的连接,连接时需要5"磷酸基团和3"羟基的存在。不仅可以进行RNA分子间的连接,也可以进行RNA分子(最短8个碱基)的环化连接。可以用于RNA和单核苷酸之间的连接,单核苷酸必须为5"和3"均磷酸化的形式,此时常用于RNA的3"末端标记。也可以用于DNA和RNA之间的连接。当DNA提供5"磷酸基团,RNA提供3"羟基时,连接效率较高;当DNA提供3"羟基,RNA提供5"磷酸基团时,连接效率非常低。也可以用于DNA和DNA之间的连接,但连接效率非常低。主要用于DNA的环化连接,例如5" RACE中的cDNA环化。DNA和DNA之间的连接尽管可以进行,但比较困难。
用途:
用RNA 3"末端标记;RNA和RNA分子间连接;
寡核苷酸的环化;tRNA修饰;
5" RACE中寡核苷酸连接到cDNA单链;
在蛋白质特定位点引入非天然*基酸。
活性定义:37℃30分钟内,催化1 nmol 5"-[32P]-(A)12-18成为磷酸酶不能消化的环形产物所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件:50mM Tris-HCl(pH7.5),10mM MgCl2,10mM DTT,1mM ATP,10μM 5"-[32P]-(A)12-18(10μM in 5"-termini)。
纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶,不含磷酸酯酶。
酶储存溶液:10mM Tris-HCl(pH7.5),1mM DTT,50mM KCl,0.1mM EDTA,50%(v/v)glycerol。
产品组份:
T4 RNA Ligase(10U/μl)————200U
Reaction Buffer(10X)—————40μl
ATP(10mM)——————————40μl
BSA(1mg/ml)—————————40μl
Reaction Buffer(10X):500mM HEPES-NaOH(pH8.0 at 25℃),100mM MgCl2,100mM DTT。
失活或抑制:70℃加热10分钟可使T4 RNA Ligase失活。
储存条件:-20℃
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T4 RNA连接酶厂商关键词:T4 RNA Ligase,YT407,T4 RNA连接酶
·AP1凝胶迁移探针(1.75μM)
编号:YT193
英文名称:AP1 Probe For EMSA(1.75μM)
规格:60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的AP1 consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的AP1结合位点,可以用作EMSA研究时的探针。
AP1 consensus oligo的序列如下:
5"-CGC TTG ATG ACT CAG CCG GAA-3"
3"-GCG AAC TAC TGA GTC GGC CTT-5"
本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记,也可以用于生物素标记。
一个包装的探针可以进行约30个同位素标记探针的反应,每次标记的探针可以测定约100个样品;或约可以进行20个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争(cold competition),可以进行30-60个冷竞争反应。
注意事项:避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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文献和实验使RNA的 3′- OH末端与 5′ - 磷酸末端以磷酸二酯键而连结的酶。 EC 6. 5. 1. 3.是 J. Hurwitz等( 1972)从感染 T4 噬菌体的大肠杆菌中提取的,与促进该噬菌体尾部纤维结合的基因 63的蛋白质为同一物质。作为其反应机理,首先是酶与 ATP形成酶 - AMP复合体,复合体的 AMP与 RNA的 5′ - 磷酸末端形成焦磷酸键,它与 RNA的 3′- OH末端形成磷酸二酯键将 AMP游离出。一个 RNA链的 5′与 3′末端结合则生成一个环状分子。对基质
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
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