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- 百奥莱博
- 北京
- JN0053-BGM
- 2025年07月13日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
Probe One-Step qRT-PCR UltraMix
- 库存：
251
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")一步法RT-qPCR试剂盒(荧光探针)厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：一步法RT-qPCR试剂盒(荧光探针)厂家
编号：JN0053
规格：100次
英文名：Probe One-Step qRT-PCR UltraMix
品牌：百奥莱博
本试剂盒向PCR体系中添加了荧光探针（TaqMan或Molecular Beacon等），在扩增过程中，荧光量与扩增产物量成正比，因此可通过荧光量来测定样品核酸量。本制品以RNA为模板反转录合成cDNA第一链，然后再以合成的cDNA为模板，继续用基因特异性引物扩增，并用荧光探针进行检测。在同一反应体系中可完成从反转录到qPCR的全部过程。
本制品采用的酶是HotStart Taq，并结合了特别的缓冲液体系，能有效抑制非特异性反应，在更广的范围内对核酸含量进行准确定量。
试剂盒组分：
| 组份 | 体积 |
| 2×BalbScript Probe One-Step qRT-PCR UltraMix | 1ml支 |
| BalbScript RT Enzyme Mix | 100μl |
| RNase Free Water | 1ml×2支 |
| ROX Reference Dye I | 200μl |
| ROX Reference Dye II | 200μl |
产品特点：
高特异性：采用特殊工艺制造的热启动HotStart Taq DNA聚合酶，大大提高了PCR扩增的特异性。
高效：百奥莱博精心配制的RealTime PCR专用试剂，具有更高扩增效率和灵敏度。
使用建议：
请将体系上下颠倒混匀，动作轻柔，避免起泡，并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的（无污染的）枪头及Microtube等，尽量避免污染。
·用ROX Reference Dye I校准的Real Time PCR仪有：
Applied Biosystems 5700/7000/7300/7700/7900/7900 HT/7900 HT Fast；Applied Biosystems StepOne/StepOne Plus；其他仪器。
·用ROX Reference Dye II校准的Real Time PCR仪有：
Applied Biosystems 7500/7500 Fast；Stratagene MX4000/MX3500P/MX3000P；其他仪器。
·不需要用ROX Reference Dye校准的Real Time PCR仪有：
Bio-Rad CFX96/CFX 384/iCycler iQ5/ iQ /My iQ5/MiniOpticon/Opticon/Opticon /Chromo4；Eppendorf MasterCycler realplex/ realplex 2s。Cepheid SmartCycler；Illumina Eco qPCR；R℃he Applied Science LightCycler 480；Thermo Scientific PikoReal Cycler；Qiagen/Corbett Rotor-Gene Q/Rotor-Gene 3000/ Rotor-Gene 6000；其他仪器。
常用反应体系（20μl）：
| 加入物 | 加入量 |
| 2×BalbScript Probe One-Step qRT-PCR UltraMix | 10μl |
| BalbScriptR RT Enzyme Mix | 1μl |
| 上游引物 | 0.2-1.0μM（终浓度） |
| 下游引物 | 0.2-1.0μM（终浓度） |
| 探针 10uM | 0.4μl |
| 模板 | 1pg～1μg |
| RNase Free Water | 至20μl |
常用PCR循环：
| 两步法扩增程序（推荐）： | |
| 42℃ | 30min |
| 94℃ | 5min |
| 35-40次循环 | 95℃，15s 60℃，1min |
| 三步法PCR扩增程序(引物Tm值较低或其他原因)： | |
| 42℃ | 30min |
| 94℃ | 5min |
| 35-40次循环 | 95℃，15s 57℃，20s 72℃，30s |
储存条件：-20℃
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